01
单细胞新鲜组织样本的制备与保存
试剂耗材准备：
· PBS缓冲液（冰上预冷，4℃冰箱保存）、
· 美天旎组织保护液（冰上预冷，4℃冰箱保存）、
取样步骤：
1. 在冻存管上做好样本名称或编号标记；
2. 取新鲜组织，转移到预冷的PBS缓冲液中，漂洗掉残留和血渍；
3. 用无菌刀去除附着在周围的脂肪、结缔组织或坏死组织，获得黄豆粒大小的均一化组织；
4. 用无菌刀片或剪刀，将组织剪碎成2mm3左右的小碎片；
5. 用吸水纸稍微擦干组织表面水分，避免稀释美天旎组织保护液；
6. 在冻存管中预先加入美天旎组织保护液约1-1.5ml，确保组织保护剂能完全浸没组织；将组织转移到冻存管中，上下颠倒冻存管，使保护液完全浸没组织；
7. 用封口膜给冻存管封口；
8. 用纸张记录好样本名称、组织部位以及取样时间，尽快联系冷链公司进行样本寄送。在样本寄送前，将冻存管保存在冰上或者4℃冰箱。
02
单细胞冰冻样本的制备与保存
试剂耗材准备：
· 一次性无菌培养皿、镊子、剪刀或刀片、离心管、液氮、干冰、封口膜等。
冰冻样本制备步骤：
1.切取目标组织，动物组织单个样品要求至少黄豆粒大小，重量在100mg以上；用无菌刀片或剪刀，将组织上残留的脂肪、结缔组织或坏死组织切除；
2.用预冷的PBS缓冲液漂洗组织上残留的血迹；
3.将组织转移到新的培养皿中。样本足够的情况下，建议均分为三份：一份作为正式样本，一份作为备份样本，一份作为RNA质检样本。在正式实验前，会将质检样本研磨并提取RNA进行质检，确保RNA没有发生降解后再开始细胞核分离实验；
4.将离心管做好标记，将组织转移到离心管中；
5.封口膜给离心管封口；
6.将离心管放入液氮速冻2分钟后，转移至干冰上，然后再转移到-80℃超低温冰箱保存；
7.联系物流公司进行样本寄送，寄送过程中需全程干冰运输，具体干冰用量、运输时间及打包细节与销售对接确认。
03
空间转录组冰冻包埋方案
1
组织样本准备
2
组织缝隙填充
3
OCT覆盖组织表面
4
包埋盒标记
5
组织置入包埋盒
6
组织与包埋剂的孵育
7
样本速冻以及包埋
8
样本保存与运输
注意事项：
1）组织冷冻过程中避免组织直接接触液氮，引起沸腾，导致速冻不均匀；
2）异戊烷在液氮中放置不宜超过10min，否则异戊烷会凝固无法完成组织速冻；
3）冷冻包埋盒先做标记，确定包埋盒中的样本名称，包埋后组织不可见，无法记录；
4）组织放入包埋剂时建议目标切面朝下，方便后续切片时寻找目标切面；
5）整个包埋过程避免气泡出现；
6）保存时注意密封，避免组织脱水 ；
04
单细胞活体植物运输：土培植物的固定与打包
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