无需细胞分选:荧光流式细胞术精准区分小胶质细胞表型

学术   科学   2024-07-02 07:31   北京  

本文通过ChatGLM/GPT进行辅助对近期Bio-protocol 期刊发表的方案进行解读和概括,若感兴趣请点击“阅读原文”查看详细的实验流程及试材。如果解读中有任何错误或遗漏,敬请指正

2024年6月20日,Bio-protocol 期刊在线发表了美国俄克拉何马大学健康科学中心(University of Oklahoma Health Sciences Center)Sarah R. Ocañas团队题为“Flow Cytometry Analysis of Microglial Phenotypes in the Murine Brain During Aging and Disease”的方法文章。

https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5018
关键词小胶质细胞 小胶质细胞表型 流式细胞术 自体荧光 神经炎症 疾病相关小胶质细胞 脂滴小胶质细胞 干扰素反应小胶质细胞

小胶质细胞(Microglia)系神经组织中唯一来源于中胚层的细胞。此细胞体很小,呈短棒状,伸出数支枯条样突起,突起表面粗糙,显有棘刺,分支少。胞核较小,约为5μm,形态不规则,可呈肾形、椭圆形或三角形,核染色质多。此细胞在中枢神经系统内分布较少。在灰质内多位于神经元胞体附近或在小血管周围,在白质内也可见到

小胶质细胞是大脑的常驻免疫细胞,具有碎片吞噬、神经元支持和突触修剪等多种功能。这些细胞的不同表型状态受到环境刺激和内在信号的影响,在阿尔茨海默病(AD)等神经疾病中尤为重要。例如,疾病相关的小胶质细胞(DAM)表型在AD小鼠模型中首次被发现,对神经退行性变有重要作用。区分和量化小胶质细胞表型对理解发育和疾病过程至关重要,并为治疗探索提供了新方向。
虽然荧光免疫标记和显微镜技术能区分小胶质细胞表型,但方法耗时且需要多个组织切片。基于测序的方法尽管数据高通量高分辨率,但成本高且需专业技能。本文介绍了一种基于荧光流式细胞术的方法,用于区分小鼠脑组织中不同的小胶质细胞表型,简便高效且适应性强。该方法可在不进行细胞分选、成像或单细胞RNA测序的情况下,区分稳态、DAM、干扰素响应(IRM)和脂滴积累(LDAM)等表型,适用于研究不同脑区或疾病模型中的小胶质细胞变化


  • 该方法无需进行细胞分选或显微成像,从而简化了实验流程,节省了时间和资源。

  • 利用荧光流式细胞术,可以对单细胞悬液进行高通量和多参数分析,实现快速而全面的表型鉴定。

  • 该方法具有高度的适应性,可以根据需求添加额外的荧光抗体或染料,适用于不同的细胞分析仪和实验需求。

  • 神经疾病研究
    可以用于研究阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病中小胶质细胞的表型变化,帮助揭示这些疾病的病理机制。
  • 药物筛选和疗效评估
    ‍在药物筛选和治疗效果评估中,通过分析小胶质细胞的表型变化来评价药物对神经炎症和神经退行性疾病的影响。
  • 环境影响研究
    可以用于研究外界环境因素(如压力、感染)对小胶质细胞表型的影响,帮助理解环境因素与神经疾病之间的关系。


这个方法的可重复性已经被本文作美国俄克拉何马大学健康科学中心(University of Oklahoma Health Sciences Center)Sarah R. Ocañas团队验证过,相关实验数据与结果发表在J Neuroinflammation,DOI:10.1186/s12974-023-02870-2

温馨提示:积极引用本文不仅是对作者创新技术和科研共享的最佳肯定,也是确保实验可复现性的重要方式。

Cox, J. E. J., Pham, K. D., Keck, A. W., Wright, Z., Thomas, M. A., Freeman, W. M. and Ocañas, S. R. (2024). Flow Cytometry Analysis of Microglial Phenotypes in the Murine Brain During Aging and Disease. Bio-protocol 14(12): e5018. DOI: 10.21769/BioProtoc.5018.

扫描二维码查看全文

您对这篇实验方法存在任何疑问,点击底部“阅读原文”进行提问,我们将邀请本文作者为您解答。

—————相关实验方法推荐—————


——————更多干货资料——————

关于Bio-protocol

Bio-protocol  (bio-protocol.org)于 2011 年在斯坦福大学创立,旨在提高科研的可重复性,以助力于科学的发现。与 eLifeScience/AAAS、Cell Research美国神经科学学会(SfN)、国细胞生物学学会 (ASCB) 等国际知名学术机构合作,致力于科研方案的透明度和共享。旗下拥有四个主要平台:

Bio-protocol是一本经同行评审的国际学术期刊,专注于发表高质量的生命科学实验方案。至今,已发表来自全球两万多名科研工作者的超过5000 篇文章。该期刊已被PubMed Central、Web of Science 、Scopus以及DOAJ等数据库收录,是全球为数不多的拥有影响因子的生物学实验方案期刊之一。

Bio-protocol Preprint Repository是一个实验方案的预印本平台,目前已有2000多篇来自全球科研工作者分享的实验方案预印本。

Bio-protocol Exchange是一个面向全球生命科学研究者的开放平台,提供实验方法(method) 和方案(protocol)的查找、分享和讨论。

Bio-101聚焦中文资源,已出版了多本高质量、开放获取的中文生物实验方案电子手册。

通过这四个互补平台,Bio-protocol致力于构建一个全球网络,实现科研方法的分享、交流与创新,从而推动全球科学界的进步


BioscienceProtocols
作为共享科学技术的先行者,Bio-protocol同Science等多家知名杂志合作,致力于搭建全球权威的生物实验方案分享平台,提高科研的可重复性。已发表来自全球上万名优秀科研人员的近5000余篇方法。关注我们,为您分享好的方法、技术干货。
 最新文章