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来源：俞十四搬运铺
莲花是一种水生植物，广泛分布于亚洲各国，历史悠久。莲花各个部分在中医和阿育吠陀中都有广泛的应用，用于治疗不同疾病。而在皮肤护理领域，人们业已发现从莲花植物的不同部位提取的活性物可以用来改善色素沉着的问题。在AbbVie的研究论文中，发现藕带提取物中的Neferine 和liensinine （荷花碱和莲心碱）具有诱导选择性黑素体自噬的作用，从而能够抑制黑素沉着。通过基因表达、生化分析和免疫印迹法评估了该提取物以不同途径调节黑色素水平的作用。![]()
研究人员首先发现，藕带提取物中的Neferine 和liensinine 对人类黑色素瘤细胞系MNT-1中黑色素积累的影响。使用该成分7天，MNT-1细胞中黑色素含量呈剂量依赖性降低。该浓度下，Neferine 和liensinine处理的细胞微球几乎是无色的，而载体处理的细胞微球则是明显的深色。![]()
为了了解这些化合物如何调节黑色素水平，研究人员考察了Neferine对黑色素生成相关基因表达的影响。Neferine没有降低与黑色素合成有关的TYR、TYRP1和DCT基因的表达，也没有降低与黑色素小体形成有关的PMEL和MLANA基因的表达。由于TYR基因产物酪氨酸酶是黑色素形成的中心调节因子，也是美白成分的常见靶标，因此研究人员进一步评估了Neferine对酪氨酸酶催化活性的影响，在浓度高达50 μM时，Neferine没有影响。![]()
鉴于此，研究人员转变思路，从自噬调节的角度来进行研究。结果发现，自噬标志物LC3-II水平成剂量依赖性变化，反映了自噬体积累和增加。5 μM的 Liensinine 增加了LC3-II水平，但幅度小于5 μM的Neferine。为了区分是自噬通量的增加和自噬体降解的阻断，研究人员评估了在溶酶体前蛋白酶抑制剂存在或不存在的情况下，二者对LC3-II积累的影响。结果说明，Neferine 和liensinine是通过增加自噬通量的方式来起效的。![]()
由于Neferine 和liensinine是藕带提取物中丰富的成分，因此可以推测该提取物也能以类似的机制减少了MNT-1细胞的色素沉着。治疗5天后，在最高浓度(0.4%)下，黑色素的吸光度显著下降。黑色素含量的降低也与藕带提取物治疗后LC3-II水平的显著增加相对应。为了研究诱导自噬的信号通路，研究人员分别监测了mTOR和AMPK调控的磷酸化位点Beclin-1的Ser15和Ser90位点的磷酸化。藕带提取物48小时处理后不影响Ser15磷酸化水平，而Ser90磷酸化水平显著增加，说明是通过AMPK来激活自噬。![]()
考虑MNT-1是恶性黑色素瘤细胞，研究人员又以HEMn-DP细胞（正常人类黑色素细胞）为模型进行测试。在藕带提取物治疗15天后，黑色素积累显著减少。组织学评估也显示，基底黑色素细胞和整个组织中的黑色素颗粒减少。![]()
为了验证自噬体的存在，并进一步了解藕带提取物如何影响黑素体的分布，研究人员对藕带提取物处理过的黑素体培养物进行了电子显微镜观察。在处理过的组织的基底黑色素细胞中，黑色素小体作为单个细胞器分散在细胞质中。相比之下，大多数(约90%)经藕带提取物处理的黑素细胞显示黑素小体聚集在自噬体中，可见膜分隔的区室。有趣的是，研究人员注意到藕带提取物诱导的自噬体中含有黑素体而没有其他细胞器，这表明自噬降解对黑素体是选择性的。对黑素细胞内黑素小体分布的定量分析显示，藕带提取物处理后，自噬小体中聚集的黑素小体与游离黑素小体的比例呈剂量依赖性增加。在基底黑素细胞附近的角质形成细胞中也观察到增大的黑素小体簇。![]()
经过仔细检查，研究人员观察到藕带提取物治疗后黑素体形态发生变化。在用载体处理过的MelanoDerm中，黑色素细胞主要含有IV期黑素体，偶有I、II、III期黑素体在高尔基体附近；相比之下，用藕带提取物处理的MelanoDerm中的黑色素细胞显示出正常形态和异常结构的黑色素体的混合。在藕带提取物处理的黑色素细胞中，一些黑素体的形状不规则，而在载体处理的黑色素细胞中，观察到的黑素体是均匀的椭圆形或圆形。此外，与1% 藕带提取物处理相比，5% 藕带提取物处理下的细胞看起来更大、更暗。藕带提取物处理下观察到的其他不规则现象包括黑色素小体部分着色、有明显的黑色素灶等。总之，这些观察结果表明，藕带提取物除了刺激自噬外，还可能部分破坏黑色素小体的生物发生和成熟。![]()
总结来说，这项研究揭示了藕带提取物、Neferine 和liensinine 在减少色素沉着上的机制。通过诱导自噬和随后的黑素体降解，可以用于治疗色素沉着。随着全球化妆品行业规模持续扩大，市场竞争日趋激烈，原料转化与应用、产品创新、技术更新等成为破局关键，随着生物制造技术的进步，生物活性原料与绿色可持续原料的创新开发备受瞩目，同时基于新技术也为行业注入了新的活力。InnoCosme第九届中国国际护肤技术论坛，旨在汇聚行业精英，深入探讨原料转化与应用、再生医学、皮肤微生态、递送技术、消费者洞察趋势等业内关注的热点话题，并结合抗衰、维稳修护等功效，共探产品革新路径，旨在为行业带来新的启示与机遇，共同开创行业发展的新篇章！
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