最通俗易懂的核磁共振波谱仪解析

磁共振原理示意图

1953年，美国Varian研制成功世界第一台商品化NMR谱仪(频率30MHz,磁场7000高斯, 0.7特斯拉)；

1964年，Varian公司研制出世界第一台超导磁场的NMR谱仪(200MHz, 4.74T)；

1966年，理查德·恩斯特（Ernst）团队发展了脉冲傅里叶变换NMR测谱方法，这一革命性的飞跃，极大地提高了NMR测量的灵敏度和分辨率，使高分辨率的NMR谱仪的应用得到前所未有的发展，Ernst也因此获得1991年的诺贝尔化学奖。

1969年，Varian公司生产出第一台傅立叶变换NMR谱仪(100M, 2.35T)；

1971年，比利时Jeener首次提出关于二维谱的原理和实验方法,为二维谱的创始人；

1971年，雷蒙（Raymond Damadian）发现了在磁激条件下，核磁共振对健康细胞和癌症细胞原子核的影响是不同的，它们从高能状态返回平衡状态时，癌细胞原子核所用的时间要长的多。1972年雷蒙申请了发明专利：探测组织中癌症的设备和方法。

1973年，美国化学家保罗·劳特伯（Paul Lauterbur）和英国物理学家彼得·曼斯菲尔德（Peter Mansfield）在荷兰的中心实验室搭建完成了最初的磁共振成像系统，并对充满液体的物体进行了成像，得到了著名的核磁共振图像“诺丁汉的橙子”，拔得磁共振技术成像领域的头筹，使其进入医学成像领域，成为当今最重要的影像学手段之一。

磁共振成像系统

磁共振成像结果“诺丁汉的橙子”

1976年，R.R. Ernst等人确立了二维谱的理论基础,使之成为近代NMR中应用广泛的一种新技术。Ernst获得1991年诺贝尔化学奖；

“核磁共振波谱仪”的原理和结构

核磁共振波谱仪的原理

核磁共振现象来源于原子核的自旋角动量在外加磁场作用下的运动。根据量子力学原理，原子核与电子一样，也具有自旋角动量，其自旋角动量的具体数值由原子核的自旋量子数决定，实验结果显示，不同类型的原子核自旋量子数也不同；

I=1/2的原子核，电荷均匀地分布于原子核表面，这样的原子核不具有电四极距，核磁共振的谱线窄，最宜于核磁共振检测；

I>1/2的原子核，电荷在原子核表面呈非均匀分布，电四极距不为零。凡是有电四极距（不论是正值还是负值）的原子核都具有特殊的驰豫机制，常导致核磁共振的谱线加宽，这对于核磁共振信号的检测是不利的。

根据量子力学原理，原子核磁矩与外加磁场之间的夹角并不是连续分布的，而是由原子核的磁量子数决定的，原子核磁矩的方向只能在这些磁量子数之间跳跃，而不能平滑的变化，这样就形成了一系列的能级。当原子核在外加磁场中接受其他来源的能量输入后，就会发生能级跃迁，也就是原子核磁矩与外加磁场的夹角会发生变化。这种能级跃迁是获取核磁共振信号的基础。为了让原子核自旋的进动发生能级跃迁，需要为原子核提供跃迁所需要的能量，这一能量通常是通过外加射频场来提供的。根据物理学原理当外加射频场的频率与原子核自旋进动的频率相同的时候，射频场的能量才能够有效地被原子核吸收，为能级跃迁提供助力。因此某种特定的原子核，在给定的外加磁场中，只吸收某一特定频率射频场提供的能量，这样就形成了一个核磁共振信号。

核磁共振仪主要由磁铁、探头、射频发生器、射频接收器、扫描发生器、信号放大及记录仪六部分组成。

1. 磁铁 

磁铁是核磁共振仪最基本的组成部件。它要求磁铁能提供强而稳定、均匀的磁场。核磁共振仪使用的磁铁有三种：永久磁铁，电磁铁和超导磁铁。由永久磁铁和电磁铁获得的磁场一般不能超过2.5T。而超导磁体可使磁场高达10T以上，并且磁场稳定、均匀。

目前超导核磁共振仪一般在200~400MHz，最高可打600MHz。但超导核磁共振仪价格高昂，目前使用还不十分普遍。

2. 探头

探头装在磁极间隙内，用来检测核磁共振信号，是仪器的心脏部分。探头除包括试样管外，还有发射线圈接受线圈以及豫放大器等元件。待测试样放在试样管内，再置于绕有接受线圈和发射线圈的套管内。磁场和频率源通过探头作用于试样。

为了使磁场的不均匀性产生的影响平均化，试样探头还装有一个气动涡轮机，以使试样管能沿其纵轴以每分钟几百转的速度旋转。

3. 射频发生器

高分辨波谱仪要求有稳定的射频频率和功能。为此，仪器通常采用恒温下的石英晶体振荡器得到基频，再经过倍频、调频和功能放大得到所需要的射频信号源。

为了提高基线的稳定性和磁场锁定能力，必须用音频调制磁场。为此，从石英晶体振荡器中的得到音频调制信号，经功率放大后输入到探头调制线圈。

4、射频接收器

当原子核的拉莫尔进动频率与辐射频率相匹配时，发生能级跃迁，吸收能量，在感应线圈中产生毫伏级信号。

5. 扫描线圈  

核磁共振仪的扫描方式有两种：一种是保持频率恒定，线形地改变磁场，称为扫场；另一种是保持磁场恒定，线形地改变频率，称为扫频。许多仪器同时具有这两种扫描方式。扫描速度的大小会影响信号峰的显示。速度太慢，不仅增加了实验时间，而且信号容易饱和；相反，扫描速度太快，会造成峰形变宽，分辨率降低。

在连续NMR中, 扫描方式最先采用扫场方式，通过在扫描线圈内加一定电流，产生10-5T磁场变化来进行核磁共振扫描。相对于NMR的均匀磁场来说，这样变化不会影响其均匀性。

6. 信号检测及记录处理系统

1）接受单元  从探头预放大器得到的载有核磁共振信号的射频输出，经一系列检波、放大后，显示在示波器和记录仪上，得到核磁共振谱。现代NMR仪器常配有一套积分装置，可以在NMR谱图上以阶梯形式显示出积分数据。由于积分信号不像峰高那样易受多种条件的影响，可以通过他来估计各类核的相对数目及含量，有助于定量分析。

2）信号累加  若将试样重复扫描数次，并使各点信号在计算机中进行累加，则可提高连续波核磁共振仪的灵敏度。当扫描次数为N时，则信号强度正比于N，考虑仪器难以在过长的扫描时间内稳定，一般N=100左右为宜。

“核磁共振波谱仪”的分类

核磁共振波谱仪的分类

按仪器测定谱线宽度条件，可分为高分辨核磁共振谱仪和宽谱线核磁共振谱仪。

高分辨核磁共振谱仪只能测液体样品，谱线宽度可小于1赫，主要用于有机分析。宽谱线核磁共振谱仪可直接测量固体样品，谱线宽度达10赫，在物理学领域用得较多。高分辨核磁共振谱仪使用普遍，通常所说的核磁共振谱仪即指高分辨谱仪。

连续扫描核磁共振波谱仪（CW-NMR）是指射频频率或外磁场强度是连续变化的，即进行连续扫描，一直到被观测的核依次被激发发生核磁共振。脉冲-傅里叶变换核磁共振波谱仪（PET-NMR）是指射频振荡器产生的射频波以脉冲方式（一个脉冲中同时包含了一定范围的各种频率的电磁辐射）将样品中所有化学环境不同的同类核同时激发 ，发生共振 ，得到自由感应衰减（FID）信号，再经计算机进行傅里叶变换，得到可观察的核磁共振图谱。

目前研究使用的仪器大多为脉冲-傅里叶变换波谱仪。

有机化合物、高分子材料都主要由碳氢组成，所以在材料结构与性能研究中，以1H谱和13C谱应用最为广泛。

“核磁共振波谱仪”样品的制备

进行核磁共振分析的样品的纯度要求较高，杂质的存在将导致局部磁场的不均匀而使谱线变宽，严重时可使图谱丧失应有的细节。因此要进行试样的制备。

1、试样管

根据仪器和实验的要求，可选择不同外径（Ф=5，8，10mm）的试样管。微量操作还可使用微量试样管。为保持旋转均匀及良好的分辨率，管壁应均匀而平直。如果样品量很少，可以用容量为0.025mL的微量管进行测定。

2、溶液的配制

试样浓度一般为5~10%，需纯样品15~30mg。对傅里叶核磁共振仪，试样量可大大减少，一般只需1mg左右，甚至可少至几微克。

3、标准试样

进行实验时，每张图谱都必须有一个参考峰，以此峰为标准，求得试样信号的相对化学位移，一般简称化学位移。于试样溶液中加入约10g/L（1%）的标准试样。一般采用四甲基硅烷（TMS）作为标准试样，它的所有氢均呈现一个单峰，与绝大多数有机化合物相比，TMS的共振峰出现在高磁场区。此外，它的沸点较低（26.5℃），容易回收。在文献上，化学位移数据大多以它作为标准试样，其化学位移为0。值得主要的是，在高温操作时，需用六甲基二硅醚（HMDS）为标准试样。在水溶液中，一般采用3-甲基硅丙烷磺酸钠（DSS）作标准试样。

4、溶剂

锂/钠离子电池材料局域结构是影响材料循环性能和倍率性能的重要因素。固体核磁共振技术、XAS和对密度分布函数是常用的表征材料局域结构的办法。其中，固体NMR技术由于无损，定量，原位的优点，十分有效便利。在电池材料NMR研究中常用试验方法如下表所示。

电池材料NMR研究常用研究方法

4、在石油分析中，用它做定性和定量分析。

在日用化学和食品工业中，使用核磁测量物质的含水量和含油量以及其它性质。

NMR技术于20世纪末开始应用于石油地质研究。如今应用范围涉及到石油地质、石油测井、石油化工等领域。

在地质勘探领域中，主要使用傅里叶核磁变换共振波谱仪以及多脉冲电磁分辨谱等设备。主要应用包括：分类干酪根、确定有机质成熟度、评价生油浅量等。

在测井领域，主要利用核磁测井技术。基本原理是在井中放置一块磁体，发射等于该均匀极化区域氢核的核磁共振频率，接受氢核在退激过程中的衰减信号，利用油与水弛豫时间的差别来检验油层。使用该技术可以克服以体积模型为基础的传统方法受井眼，岩性及地层水矿化度影响的缺陷，解决油气藏的储层评价和油气识别问题。使用平均结构信息来评估原油总体特性也有助于石油工业的生产。

由于油气水在核磁共振特性上差异巨大，在储层物性上，可以用核磁测井技术评价孔隙度，渗透率及饱和度。在储层流体识别方面，可以利用油气水的纵向弛豫时间和扩散系数的差异识别三者，对于低阻油层等电阻率测井传统方法识别有困难的储层很实用。另外，核磁共振录井参数中包含了油气含量和产出能力等信息，可以为试油层位的确定提供资料，为钻井施工设计提供参考的地层压力梯度和破裂压力梯度。

5、1953年，生物学上出现了一次引人注目的重大突破--------揭示了遗传之迷，发现了核糖核酸是遗传的物质基础，从而使生物学进入了第三个发展阶段，即分子生物学阶段。生物学之所以发展到这一阶段，主要是引入了大量的高精密实验观测和检测手段，如核磁共振谱仪、色谱仪、激光发射光谱仪等。

生物中的有机相酶促反应、药物合成、生化反应及分离过程、杂环化学、电合成化学及环境生物治理等，恰是NMR谱仪在生物学、药物学和环境化学上发挥重要作用的领域。

生命科学领域：本世纪一开始，人类基因组计划取得重大进展，迎来了后基因组时代。国际上，结构基因组计划已提到日程上来了。分子生物学中一个众所周知的事实是蛋白质生物活性和功能的多是在溶液中显现的。而能用于探测溶液中蛋白质的三维构象的唯一手段就是NMR0正因为如此，2002年的诺贝尔化学奖授予瑞士 ETH的的thrich,表彰他用多维NMR波谱学在测定溶液中蛋白质结构的三维构象方面的开创性贡献。

最具前沿科学的不溶性蛋白或膜蛋白空间三位结构研究也需要用到固体核磁。

6、化学工程与技术中

分子模拟是其中一项研究内容，模拟以后，实际合成的检验必须要有可以推断分子结构的仪器来证明分子模拟的正确性，NMR则可以胜任这一检验工作。

7、光催化分解水

自从1972年Fujishima 等人首次发现使用紫外光照射TiO2电极可以分解水产生H2以来，开发廉价实用的新型催化剂一直是实现太阳能分解水高效利用的关键因素。近年来众多研究者使用STM、FTIR、TPD、DFT等手段研究分解水的微观过程，但其测试条件过于理想化，与实际存在较大差距。核磁共振技术可实现原位无损检测且可以准确鉴定未知化合物结构，因此在微观反应过程研究中有一定优势。

8、在膜的研究中，有关膜的制备及分离或合成物质的结构鉴定、物质结构环境的变化及跟踪膜催化的反应机理等需要NMR谱仪。

9、精细有机合成，环保中水质稳定剂和水质处理剂的机理、过程研究，合成反应过程的在线监控和原料、最终产品的质量监控都离不开使用NMR谱仪。

1、电磁干扰要求

2、地面震动要求

3、实验室地面承重要求

4、实验室温湿度要求

实验室温度应在17-25 摄氏度范围内，温度波动应小于1 摄氏度/小时。

实验室湿度应控制在30%-70%范围内。实验室应安装足够功率的空调及除湿机。空调出风口不要正对磁体。

建议空压机房安装空调，以防止空压机因过热而损坏。

5、电源要求

2 通道400 兆以下液体核磁谱仪需要单相电源>3KVA，插座额定电流>16安培。固体或500 兆以上液体核磁谱仪需要单相电源>5KVA，插座额定电流>25 安培。

实验室靠近磁体和操作台的墙面应安装2 个以上10 安培单相插座。

空压机房应安装至少一个16 安培单相插座（进口空压机）及一个10 安培单相插座（干燥器）,或安装至少一个10 安培三相插座（国产空压机）及一个10 安培单相插座（干燥器）。

如果市电波动大于-10%到5%，需要安装稳压电源或带稳压功能的 在线式UPS 电源。稳压电源或UPS 电源功率应不小于谱仪功率（如上）。

如果安装有断电后需人工复位的空气开关，需将其拆除。因为断电后若未能及时复位，UPS 的电池会被耗尽。

稳压后输出电压波动应小于单相1%。稳压电源响应时间应小于10 毫秒。

6、核磁共振波谱仪专用地线要求

为了减少电磁干扰和降低谱仪故障率，需要为核磁谱仪提供专用地线。

专用地线要和楼房地线分开。（老式楼房地线有时会错接成三相电的零线，而零线在三相负载不平衡时会带电）实验室空调及空压机不要接在专用地线上。

专用地线要由专业地线公司施工，以保证质量。施工后用专用设备测量接地电阻。

专用地线要求接地电阻小于1 欧姆。

专用地线要用低电阻带材引入实验室，需在带材室内端上打孔，以便将核磁谱仪机柜地线用螺栓紧固。

7、空压机、干燥器和过滤器的要求

空压机必须为无油空压机。为液体核磁谱仪供气的空压机出气量需大于100 升/分钟。为高场核磁（带氮气分离器）及固体（HRMAS）附件供气的空压机出气量需大于200 升/分钟。

干燥器可为冷冻式干燥器或无热再生式干燥器。冷冻式干燥器露点一般为-20摄氏度。无热再生式干燥器露点一般为-40 摄氏度。带BCU05 制冷单元的核磁谱仪需配无热再生式干燥器，其露点应达到-40 摄氏度。

经干燥器入口过滤器过滤后，含油量应<0.01mg/m3;

经干燥器出口过滤器过滤后，含油量应<0.005ppm(0.005mg/m3)

8、铁磁性物体要求

高斯线范围内应没有铁磁性物体，1 高斯线范围内不应有重量超过250公斤的铁磁性物体。磁体上方不应有较大含钢筋的房梁。如实验室在一楼，且楼房有地下车库，实验室下方应该封闭，保证磁体下方不能有汽车通过。

9、实验室房间高度要求

为便于安装和补加液氦，实验室房间应满足所需的最小高度。

以下为所需考虑的各种因素：

A. 升场棒长度：

a) 806mm（300-400 兆）；

b) 747mm(600 兆)；

c) 726mm(500 兆)；

d) 985mm(500 兆，flat bottom)

e) 1000mm（D3XX：US PLUS）

B. 临时短路棒长度：830mm;

C. 液氦传输管长度：

a) 磁体端：708mm;

b) 液氦运输罐端：1508mm;

D. 液氦液面高度传感器长度：

E. 液氦运输罐高度：

F. 磁体高度

各种类型磁体高度如下：

G. 安装磁体时需要考虑三脚架高度等因素。

各种类型磁体对实验室房顶最小高度的要求（不考虑更换液氦高度传感

器的因素）：

10、实验室门宽要求

实验室门宽需要考虑到的因素有：

A. 磁体包装箱宽度

B. 液氦运输罐宽度

综合以上因素，实验室最小门宽为：

500 兆（FLAT BOTTOM）:1200mm;

600 兆（用500 升液氦运输罐）：1200mm;

600 兆89mm US PLUS：1500mm；

其它磁体：1200mm;

11、实验室门高要求：

“核磁共振波谱仪”的谱图分析

1. 解析核磁共振氢谱

一般先确定孤立甲基及类型，以孤立甲基峰面积的积分高度，计算出氢分布；其次是解析低场共振吸收峰（如醛基氢、羰基氢等），因这些氢易辨认，根据化学位移，确定归属；最后解析谱图上的高级偶合部分，根据偶合常数、峰分裂情况及峰型推测取代位置、结构异构、立体异构等二级结构信息。

2. 解析核磁共振碳谱

一般先查看全去偶碳谱上谱线数与分子式中所含碳数是否相同？数目相同说明每个碳的化学环境都不同，分子无对称性；数目不相同（少）说明有碳的化学环境相同，分子有对称性；然后由偏共振谱，确定与碳偶合的氢数；最后由各碳的化学位移，确定碳的归属。

3. 结合应用碳谱和氢谱

C谱和H谱可互相补充。H谱不能测定不含氢的官能团，如羰基和氰基等；对于含碳较多的有机物，如甾体化合物，常因烷氢的化学环境相似，而无法区别，这是氢谱的弱点；而碳谱弥补了氢谱的不足，它能给出各种含碳官能团的信息，几乎可分辨每一个碳核，能给出丰富的碳骨架信息。但是普通碳谱的峰高常不与碳数成正比是其缺点，而氢谱峰面积的积分高度与氢数成正比，因此二者可互为补充。

4. 如何计算偶合常数？

在网上有这样一个求助帖：请教偶合常数的计算， 比如 ：—OCH2CH3 这两个碳上的氢之间的化学位移差值一般超过2了，400M核磁，那再乘以400的话，偶合常数岂不是快一千了？

首先我们得搞明白偶合常数的定义：自旋偶合会产生共振峰的分裂后，两裂分峰之间的距离（以Hz为单位）称为偶合常数。不是两组氢之间化学位移的差值，而是一组峰中相邻两个峰之间的化学位移的差值！

可以从偶合常数看出基团间的关系，邻位偶合常数较大，远程偶合常数较小。还可以利用Kapulus公式计算邻位氢的二面角。对于有双键的化合物，顺式的氢之间偶合常数为6～10Hz，反式的氢之间偶合常数为12～16Hz。

“核磁共振波谱仪”的常见问题

Q1. 元素周期表中所有元素都可以测出核磁共振谱吗？

首先，被测的原子核的自旋量子数要不为零；其次，自旋量子数最好为1/2（自旋量子数大于1的原子核有电四极矩，峰很复杂）；第三，被测的元素（或其同位素）的自然丰度比较高（自然丰度低，灵敏度太低，测不出信号）。

对于 5mm 探头来说，其中探头内部隔离样品和线圈的石英管内径只有5.4mm，如果样品管过粗或者弯曲，很容易卡在探头里甚至挤碎石英管；如果样品管过细或者有裂纹，很容易造成样品管在探头内破碎，污染探头。因此在使用样品管前，首先要在平面上滚动，确定平直；然后对灯光仔细检查有无裂纹；插入转子时要注意是否过紧过松。探头故障是我们遇到最多的问题，损坏探头可能造成数百到数万欧元的维修费用，建议谱仪管理员确保所有的送样人员了解这些细节，并检查样品管质量。

从所测原子核的种类分，有：碳氢探头、碳氢磷氟四核探头、多核探头。还可以分为正向探头（测碳谱的灵敏度高）、反向探头（测氢谱的灵敏度高）、普通探头（每测四次完成一个循环得一个结果）和梯度场探头（不需要相循环，测一次得一个结果）

首先查看各个气压表示数，检查压缩空气是否正常。如果压缩气没问题，很可能是样品卡在探头里了。可以将探头的固定螺丝拧开，下沉约5厘米，然后装回，（或者说把探头拆下再装回去）再吹一次。一般可以吹出。

Q7.lockdisp窗口中锁线的意义是什么？

时间轴折叠的氘信号强度谱

Q8.测试核磁共振需要多少样品量？

因为测试时溶剂中的氢也会出峰，溶剂的量远远大于样品的量，溶剂峰会掩盖样品峰，所以用氘取代溶剂中的氢，氘的共振峰频率和氢差别很大，氢谱中不会出现氘的峰，减少了溶剂的干扰。在谱图中出现的溶剂峰是氘的取代不完全的残留氢的峰。欢迎关注化学科讯。另外，在测试时需要用氘峰进行锁场。

由于氘代溶剂的品种不是很多，要根据样品的极性选择极性相似的溶剂，氘代溶剂的极性从小到大是这样排列的：苯、氯仿、乙腈、丙酮、二甲亚砜、吡啶、甲醇、水。还要注意溶剂峰的化学位移，最好不要遮挡样品峰。

Q10.测试样品是否必须家TMS？

Q11.怎样做重水交换？

Q12.用哪些氘代溶剂测出的氢谱上看不到活泼氢的峰？

溶剂峰的裂分是由于氘对氢的耦合，根据2n+1规律，两个氘对一个氢耦合裂分成五重峰。

Q15.位移试剂有什么用途？

为了使磁场稳定，测试样品时要进行锁场；如果不锁场也可以测试样品，但因为磁场稳定性差，测出的谱图分辨率较低。

Q17.设置参数时，观察偏置表示什么意思？

Q18.为什么同一碳上的两个质子会有不同的化学位移？

氢谱中各种基团的化学位移变化很大，不容易记忆，但只要牢记住几个典型基团的化学位移就可以解决很多问题。如：甲基0.8～1.2ppm，连苯环的甲基2ppm附近，乙酰基上的甲基2ppm附近，甲氧基和氮甲基3～4ppm，双键5～7ppm，苯环7～8ppm，醛基8～10ppm，不接氧的亚甲基1～2ppm，接氧的亚甲基3～4ppm。

Q20.偶合常数可以给出哪些结构信息？

Q21.NOE效应与去偶作用有什么不同？

Q22.质子偏共振去偶可以用来确定碳的类型，为什么现在常用DEPT谱，而不同质子偏共振去偶谱？

质子偏共振去偶区分伯、仲、叔、季碳的方法是根据裂分成四重、三重、二重和单峰，如果峰离得近会产生重叠，不容易解析，而DEPT区分伯、仲、叔、季碳的方法是根据峰向上或向下，峰不会重叠，并且质子偏共振去偶的灵敏度比DEPT法的灵敏度低得多，所以现在常用DEPT谱区分碳的类型。

Q23.门控去偶和反门控去偶法有什么不同？

Q24.DEPT谱有几种表示方法？

DEPT谱有两种表示方法：一种是DEPT135°谱，伯碳向上，仲碳向下，叔碳向上，季碳消失，DEPT90°谱只有叔碳峰，DEPT45°谱季碳消失；另一种是把上面的谱编辑后，一个谱只有伯碳峰，另一个谱只有仲碳峰，还有只出叔碳峰或只出季碳峰。

有：1H-1H相关COSY谱、1H-1H相关NOESY谱、13C-1H相关COSY谱、远程13C-1H相关谱、同核J分解谱、相敏COSY、与NOESY谱类似的ROESY谱（NOESY谱解决大分子效果好，ROESY谱解决中等分子效果较好）、TOCSY谱（自旋系统里所有的氢之间都出相关峰）以及HSQC谱（异核单量子相干）等。

三维谱是一个立体图，它的相关峰是立体中间的点，用平面切开这个立体所得的平面图就是二维图。

Q27.解析合成化合物的谱、植物中提取化合物的谱和未知化合物的谱，思路有什么不同？

合成化合物的结果是已知的，只要用谱和结构对照就可以知道化合物和预定的结构是否一致。对于植物中提取化合物的谱，首先应看是哪一类化合物，然后用已知的文献数据对照，看是否为已知物，如果文献中没有这个数据则继续测DEPT谱和二维谱，推出结构。对于一个全未知的化合物，除测核磁共振外，还要结合质谱、红外、紫外和元素分析，一步步推测结构。