近年来研究发现，HIV存储库的是艾滋病不能功能性治愈的主要障碍！今天Admin将细数一下，如何进行高效的HIV存储库检测？现有的检测方法和新的研究主要有哪些？以为彻底治疗提供助力。
HIV存储库是指HIV病毒在体内的一种潜伏状态，HIV病毒DNA整合到宿主细胞的基因组中，形成HIV-1 DNA，使得病毒能够逃避宿主的免疫清除和抗病毒药物的作用，导致患者在停止治疗后出现病毒反弹的现象。既往检测HIV存储库的方法包括病毒生长试验（Viral Outgrowth Assay, VOA）、活化T细胞后检测HIV RNA试验、PCR测定法检测HIV DNA潜伏存储库、治疗中断和反弹时间作为测量潜伏存储库的大小、完整前病毒DNA检测（Intact Proviral DNA Assay, IPDA）以及中国学者新型HIV存储库标志物的发现研究等。
最新研究进展显示，自第一例HIV治愈者被报道以来，研究者对开发高度敏感的HIV和SIV存储库检测方法引起了广泛兴趣，特别是在测量和表征HIV病毒库的最先进检测方法的比较价值，以及在开发HIV感染治疗方法的过程中如何应用这些检测方法来准确检测病毒库的变化。
HIV检测方法学也在不断进步，包括HIV抗体检测、核酸检测、CD4+T淋巴细胞检测和耐药检测等。其中，HIV核酸检测可以用于HIV感染诊断、血液筛查、病程评估及抗病毒治疗效果监测，这些技术能够将HIV-1感染者分为新近感染与长期感染，提高HIV新近感染率测量的准确性。这些技术包括基于横断面样本的血清学检测与分子检测，其中血清学检测因其成本低、估算HIV新近感染率准确而被广泛使用。
在耐药性方面，随着抗逆转录病毒药物使用的不断增加，HIV耐药性水平也在上升。WHO鼓励各国监测耐药性，并建议进行艾滋病毒耐药性预备处理 。耐药检测对于指导临床用药方案、预防HIV耐药的产生与传播具有重要意义。
主要HIV存储库检测方法学对比：
1. 病毒生长试验（Viral Outgrowth Assay, VOA）：这是一种基于体外培养的方法，通过将静息CD4+T细胞稀释并激活，诱导HIV-1从潜伏感染细胞中释放，从而得出有复制能力的潜伏感染细胞数。但该方法价格昂贵、耗时较长，并且可能低估HIV存储库的大小。
2. 活化T细胞后检测HIV RNA试验：此方法在T细胞激活情况下，使用qPCR技术检测HIV-1生命周期不同形式的RNA，缩短了细胞培养时间。但可能因为一轮刺激不能激活所有T细胞产生HIV RNA，从而在一定程度上低估HIV存储库的大小。
3. PCR测定法检测HIV DNA潜伏储存库：基于PCR的方法，从qPCR检测HIV-1 DNA的数量，到数字PCR进行HIV绝对定量，以及Alu-PCR检测整合HIV-1 DNA的数量，评价HIV潜伏储存库的大小。但这种方法可能因为缺陷性病毒的扩增而被高估。
4. 完整前病毒DNA检测（Intact Proviral DNA Assay, IPDA）：此方法通过数字PCR检测特定的病毒区域，识别出具有复制能力的完整病毒与缺陷病毒，避免了前述方法的一些局限性，能更准确地反映HIV存储库的大小。
5. 多重PCR检测技术：这种方法可以在PCR高灵敏度的基础上特异地检测出完整的病毒库，有助于更准确地评估HIV存储库的大小。
6. TZA(TZM-bl based assay)：这是一种基于TZM-bl细胞对血液中的HIV存储库进行定量检测的实验方法。它通过共培养激活的静息CD4+T细胞与TZM-bl报告细胞，通过检测β-半乳糖苷酶的表达量来定量具有复制能力的HIV-1。
7. TILDA(tat/rev induced limiting dilution assay)：TILDA是一种基于PCR的实验方法，它可以估计产生Tat/rev多重剪接RNA的HIV-1感染CD4+ T细胞的数量。这种方法提高了检测的敏感性，能够从少量血液样本中准确定量检测临床相关病毒存储库的大小，但可能存在高估病毒存储库大小的风险。
8. 改良的病毒生长试验(Q2VOA和MS-VOA)：Q2VOA在QVOA的基础上对检测到病毒颗粒的培养孔内的上清液进行env区测序及中和实验，分析病毒的遗传和生物多样性。MS-VOA增加了对细胞的刺激次数，使CD4+ T细胞在经过多轮刺激后复制、释放出更多病毒颗粒，从而更加准确地估计储存库的大小。
既往HIV存储库研究：
AIDS研究 | HIV感染难以根除，HIV病毒库发挥决定作用的最新研究有哪些突破？
