大型学术专著《狂犬病(RABIES)》第9章的译文(11)
前记: 目前国际上关于狂犬病研究最权威最全面的大型学术专著是《狂犬病的科学基础和管控（RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT）》，简称《狂犬病(RABIES)》。该书最新版（第４版）已于2020年５月面世。该书共有22章，其中第9章是《狂犬病的发病机理（Pathogenesis）》。现将此章的内容全文翻译成中文供参考。
第9章 狂犬病的发病机理（Pathogenesis）(11)
7. 狂犬病毒神经毒力的动物模型
(Animal models of RABV neurovirulence)
病毒的神经毒力（neurovirulence）可定义为病毒引起神经系统疾病（尤其是中枢神经系统疾病）的能力。在神经毒力的实验模型中，通常通过在某个宿主中比较用亲缘关系相近病毒（例如不同RABV毒株，或亲本RABV与某个变异株）进行感染的情况来进行研究（Jackson, 1991a）。病毒从外周位点向中枢神经系统传播的能力，即神经侵袭性（neuroinvasiveness），是病毒经自然感染途径进入人体后体现神经毒力的重要组成部分。在用实验评估神经毒力时，接种途径通常非常重要。通常采用脑内接种以方便操作，并且在不同的模型中还使用了多种外周部位（包括足垫、肌内、腹腔和眼内接种）。宿主的物种、年龄和免疫状态也被证明是影响神经毒力的重要因素（Flamand et al.， 1984）。在体外用抗糖蛋白中和抗体从RABV的实验室毒株CVS和ERA中筛选出单克隆抗体耐受（Monoclonal antibody-resistant ，MAR）的病毒变异株(Dietzschold et al., 1983; Seif, Coulon, Rollin, & Flamand, 1985)。涉及抗原位点III的突变位于CVS和ERA毒株糖蛋白的氨基酸残基330至338之间。在333位点有单个氨基酸变化， 失去精氨酸 (Dietzschold et al., 1983; Seif et al., 1985)或赖氨酸 (Tuffereau et al., 1989)的变异株在脑内接种小鼠后表现出减弱的致病性，而其他位点的氨基酸变化的变异株仍具有神经致病性。在小鼠和大鼠模型中，比较无致病性的变异株与其亲本病毒，并采用不同的接种途径，这种方法对于理解RABV神经致病性的生物学基础非常有用。两种MAR变异株RV194-2 (Dietzschold et al., 1983)和Av01 (Coulon, Rollin, Aubert, & Flamand, 1982) 在CVS糖蛋白的333位点处将精氨酸替换为谷氨酰胺。
无毒RABV变异株在不同的模型中已被证明能够感染邻近注射部位的非神经组织，其亲本株CVS则不能。例如，Av01株在被注入大鼠的前眼房（anterior chamber）后，感染了晶状体的前部上皮细胞（anterior epithelium） (Kucera, Dolivo, Coulon, & Flamand, 1985)。同样，将RV194-2接种到小鼠和大鼠的舌头后，产生了涉及上皮组织、腺体细胞和肌肉的局部感染 (Torres-Anjel, Montano-Hirose, Cazabon, Oakman, & Wiktor, 1984)。在这些模型中，变异株病毒显示出比高度神经侵袭性的亲本CVS株病毒更广泛的细胞亲和力。
在小鼠中进行了两项独立的研究，结果显示AvO1或RV194-2经外周注射后不会影响神经侵袭性(Coulon et al., 1989; Jackson, 1991b)。通过将RABV注入大鼠的前眼房（anterior chamber）来开发了一种研究病毒向脑部传播途径的极佳模型 (Kucera et al., 1985)。从眼部到大脑之间可能存在六条潜在的病毒传播的神经通道。RABV可通过免疫荧光染色在组织中定位。接种CVS后，病毒抗原最早是在第24小时在同侧睫状神经节（ipsilateral ciliary ganglion）中被检测到，随后在动眼神经（oculomotor nerve）（副交感通路）的埃丁格-韦斯法尔核（Edinger-Westphal nucleus）中被检测到。在48小时，病毒也传播到三叉神经（感觉传入通路）的身体同侧神经节，也可传播和投射到视网膜的前外侧的神经元中。，Av01在三叉神经通路中增殖，而不在副交感或视网膜前外侧纤维中传播。三叉神经节的神经元在48小时内也被感染，表明其传播速度相似。因此，无毒AvO1在这一模型中通过比其致病性亲本病毒更受限制的途径传播到脑部。
脑内接种是一种粗略的技术，其中接种物会扩散到整个脑脊液（CSF）空间，包括脑室系统和蛛网膜下腔（Mims, 1960）。立体定位仪可以将接种物精确地注射到脑内的某个位置。令人惊讶的是，在将Av01毒株注射到成年小鼠的新纹状体（neostriatum）或小脑后，发现它具有神经毒性（Yang & Jackson, 1992），尽管与CVS立体定位注射后相比，Av01感染的神经元数量较少，且死亡发生时间较晚（Jackson, 1994）。将Av01注射到纹状体后，病毒在脑内广泛传播，神经元中出现凋亡的形态学变化（A.C. Jackson，未发表的观察结果），同时也有炎症细胞的浸润。抗RABV的血清中和抗体产生较晚，且水平低于脑内接种后。Av01在立体定向脑接种后可能具有神经毒性，因为这一途径既产生病毒直接进入中枢神经系统的位点，又产生低水平的免疫刺激。
由于CVS的离心传播是受到限制的，比较CVS和来自中枢神经系统的变种的传播，不如比较向中枢神经系统的传播和中枢神经系统内部的传播有用。在kuucera等人（1985）在大鼠中使用眼内接种的模型中，CVS从辅助视觉系统的细胞核传播到双眼视网膜的神经节（ganglionic）细胞，而Av01在该模型中没有显示出离心扩散的证据。
(未完待续）
参考文献：
Alan C. Jackson., Pathogenesis, in: RABIES: SCIENTIFIC BASIS OF THE DISEASE AND ITS MANAGEMENT, 4th edition,
https://shop.elsevier.com/books/rabies/fooks/978-0-12-818705-0
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