国自然的前期“工作基础”部分，也是国自然项目判断延续性最重要的部分。
需要注意的是，该部分有两个关键点：
与本项目相关的研究工作积累
已取得的研究工作成绩
那么我们就今年审阅的几百份标书，总结出来的“工作基础”问题给大家陈述一下：
（一）预实验体量不足
这个问题最为突出，可想而知，本身作为临床医生，科研只是附带做做，哪有精力跟大家一起“卷”，所以最后形成的本子中的预实验，往往只有大量的“生信图”和少量的柱状图、WB结果。
而除了精力问题导致预实验不足以外，还有一个认知问题也很严重，就是申请人设计的国自然假说太简单导致，殊不知别人的本子不仅思路“卷”、预实验也“卷”，所以这就导致“瞎子摸象”的困局，始终摸不到国自然的“真象”，那么距离国自然中标也就十分遥远。
为什么预实验要足够多？①专家挑刺时，不会以证据链不足秒杀你；②预实验多可以弥补一下“文章不够好”的短板；③预实验多，证明你花了很多经费，那你并不是白嫖的态度来对待国自然，专家也能看到你的努力。
有些童鞋会问：会不会因为预实验多，专家觉得你都做完了而不予资助？
既然国自然本子包含多方面顾虑，存在各种心理维度的博弈，青椒哥在面对这个问题时，更愿意相信专家喜欢“预实验充足”的本子。
两害相权取其轻，永远是国自然本子的正解。
所以预实验应该包括3-4张组图：
① 第一张：证明你的细胞系和动物模型，成功；
② 第二张：生信分析、分子信号轴关键分子和临床问题的相关性，验证关键分子在临床样本、细胞系和动物模型中的表达趋势；
③ 第三张：过表达或者沉默干预后，观察细胞和动物模型的表型，检测一下XXX通路的激活情况；
④ 第四张：数据库预测以及分子对接分析；加一个分子互作的实验图，证明分子机制的假说成立。
（二）图注（legend）不详实、预实验图模糊不清
字面意思，就是图注缺失，或者描述过于粗糙，没有介绍单图的实验方法和分组情况。
而有些童鞋的预实验图非常模糊，图像像素极低，这又不利于专家审阅，不美观
（三）对照组缺失
对照组包括空白对照、阴性对照、阳性对照，但一般来讲，至少要有阴性对照，空白对照可以忽略。阳性对照大部分情况不是必须的，但是药物实验中阳性对照却是必须的。
而过表达和敲低这种实验，阴性对照组一定需要，切不可省略。一般用“空白质粒”“scrambles”“sh-NC”“si-NC”“Mock”作为阴性对照组。
（四）内参前后文不一致
全细胞WB内参一般有GAPDH、β-actin、β-tubulin等，但有时候因为代表作属于早几年发表的，所以和现在预实验之间的内参可能会存在差异，这种都可以理解，但最好是内参保持一致。但有时候同一批预实验中内参也有不一致的情况，还望前后保持一致。
（五）没有统计显著性标注
预实验按理来讲都是要做到技术性重复和生物学重复，因此每个实验务必形成一个统计学分析结果，并且附带显著性标注“***”“ns（不具有统计学意义）”等。
当然如果预实验太多，可以选择性进行统计分析。
（六）WB条带背景不均一或者分子量（kDa）没标注
有些WB看起来比较假，因为背景不均衡，不均一，像是不同实验条件下产生的，而且有时候单图的边缘有明显的的切割的痕迹。
另外一个经常出现的问题就是：WB结果不标注分子量。这不是一个特别规范的学术行为。
（七）分子机制的结果缺失
分子机制的证据链往往成本很高，毕竟CO-IP、pulldown、ChIP、荧光素酶报告实验等的成本不低，而且往往做了也不一定有阳性结果，所以很多本子并没有放分子机制的预实验结果图，这也是很多国自然本子的通病之一。解决方案就是用数据库预测、motif预测、各种炫酷的分子对接分析来弥补了。
（八）肿瘤本子预实验只有一株细胞系
强烈建议肿瘤类的本子，预实验中最好使用两株细胞系做功能实验，并且肿瘤类的本子一定含有体内实验。
（九）已取得工作成绩部分
已取得工作成绩部分要简明扼要，一般的格式是
一段话介绍一下自己的科研经历，可以提一下自己的大牛导师；
然后列出自己的代表作文章，并标注一下作者位次以及中科院分区；
挑2-3篇文章，把重要的实验结论（或者文章的机制图）放一张出来，简单描述一下
而有些童鞋，把各种实验图都抖出来，罗列出10-20张小图，光图片的序号都排到了10几，这样的阅读感受非常不好，专家读着累，打分不会太高。
2024年度国自然医学部50大科研热点中标数统计如下：
本团队从国自然、省市级课题申报、学术代表作规划、实验方案设计、科研技能教育培训等提升年轻科研者科研水平，真正掌握国自然课题设计的核心要点、精妙逻辑和标书撰写技巧，提高标书水平和质量，最终中标国自然。
往期精彩文章
