抵御噬菌体感染的霍乱弧菌IV型限制系统

文摘   2024-10-10 08:02   瑞士  

原文献信息:Gomez JB, and Waters CM. A Vibrio cholerae Type IV restriction system targets glucosylated 5-hydroxymethylcytosine to protect against phage infection. J. Bacteriol. 2024; 206, e00143-00124.

摘要:

霍乱弧菌(Vibrio cholerae)在水体环境和感染人类宿主过程中,面临着噬菌体(即细菌病毒)的持续捕食威胁。为了应对这种捕食,霍乱弧菌进化并获得了多种噬菌体防御系统。尽管已发现了若干新颖的防御机制,我们推测霍乱弧菌中可能还存在更多未被识别的系统,特别是考虑到目前已分离的噬菌体多样性较低。通过构建霍乱弧菌的基因组文库,我们鉴定出了一个位于Vibrio pathogenicity island-2(VPI-2)上的IV型限制系统(Type IV restriction system)。该系统由16-kB长的区域中的两个基因组成,我们将其命名为TgvA和TgvB(Type I-embedded gmrSD-like system of VPI-2)。研究表明,TgvA和TgvB都参与了对T2、T4和T6噬菌体的防御,它们通过靶向葡糖基化的5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)来识别并限制噬菌体。失去葡糖基修饰的T2或T4噬菌体虽能抵御TgvAB系统的防御,但它们也因此面临显著的进化权衡,变得易受其他识别未糖基化5hmC的IV型限制系统的攻击。此外,我们发现嵌合TgvAB基因的I型限制-修饰系统(Type I restriction–modification system)能对抗T3、secΦ18、secΦ27和λ噬菌体,这表明该区域可能是一个噬菌体防御岛。本研究揭示了霍乱弧菌中的一种新型IV型限制系统,拓展了我们对霍乱弧菌进化与生态的理解,同时强调了限制系统与噬菌体基因组修饰之间的进化博弈。

具体结果:

实验筛选、基因组分析和关键基因识别:通过在大肠杆菌中筛选霍乱弧菌基因文库,发现一个名为pJBG007的质粒,能够有效抵御T2噬菌体感染。pJBG007包含霍乱毒力岛2号(VPI-2)中的16,765碱基对片段,编码I型限制-修饰系统和新型Zorya噬菌体防御系统。进一步通过转座子突变实验,发现两个关键基因vc1766和vc1767,命名为tgvA和tgvB,是IV型限制系统的重要组成部分。
防御机制:tgvA和tgvB通过靶向噬菌体DNA的特定修饰(葡糖基化的5-羟甲基胞嘧啶,5hmC)提供防御。基因敲除实验证实,tgvA和tgvB对于抵御T2和其他噬菌体至关重要。此外,tgvA和tgvB必须同时表达才能提供对T-even噬菌体(如T2、T4、T6)的完全防御,但其他基因可能需要参与对其他噬菌体的防御。
hsdMSR I型限制-修饰系统也提供对T3、secΦ18、secΦ27和λ噬菌体的保护。
T2和T4噬菌体对TgvAB的逃逸机制:T2噬菌体通过其α-葡糖基转移酶(agt)基因的突变逃逸TgvAB防御,这些突变影响5hmC的葡糖基化,导致TgvAB失效。T4通过删除α-和β-葡糖基转移酶(agt和bgt)基因逃逸TgvAB的识别。恢复这些基因的功能可以部分恢复TgvAB的敏感性。
McrA和McrBC系统的作用:尽管噬菌体可以通过失去5hmC葡糖基化来逃逸TgvAB的防御,但这些未葡糖基化的噬菌体变得易受其他IV型限制系统(如McrA和McrBC)的攻击,展示了进化的代价。
该研究揭示了霍乱弧菌中未被充分研究的噬菌体防御岛及其与特定噬菌体的相互作用机制,特别是通过tgvAB基因及其对DNA修饰的依赖性。

文中图表:

   

   

   

微生物生态 iMcro
欢迎关注呀,这里有最新的科研动态。交流、讨论or其它合作请联系小编chujinchujinchujin
 最新文章