【经典文章】微生物基因组研究:新种鉴定、进化分型和比较分析

学术   科学   2024-07-08 08:29   上海  
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hello,大家好,今天给大家介绍,基因组测序在微生物领域的应用,干货满满!

1.判断物种是什么?即新种/未知种鉴定,相似性判断
2.探讨基因组中有没有目标序列或基因?
3.判断样本是否有研究的潜力,如是否具有感兴趣的基因或通路。
4.多样本宏观分析,如系统进化分析、分型、溯源分析等。
5.可在基因层面对多个样本进行比较分析,进行样本间结构的比较。
科研文献:
1.判断物种是什么?即新种/未知种鉴定,相似性判断
Isolationof a novel species in the genus Cupriavidus froma patient with sepsis using whole genome sequencing
DOI:10.1371/journal.pone.0232850
主要结论:使用IlluminaMiSeq平台进行WGS,并使用TrueBac TM搜索基因组序列数据库ID-Genome系统(未发现平均核苷酸同一性值高于95.0%的菌株,这是进行物种水平鉴定的起点。系统发育分析表明,该细菌是一种新的Cupriavidus菌种,形成了与Gilriaii菌的亚簇








IntegratedComparative Genomic Analysis and Phenotypic Profiling of Pseudomonasaeruginosa Isolates From Crude Oil
  DOI:10.3389/fmicb.2020.00519
背景介绍该文章之前的报告表明,基于16SrRNA分析,只有IMP67和IMP68是铜绿假单胞菌。研究表明,基于16SrRNA的系统发育树在属内水平上缺乏分辨率。使用十个管家基因进一步分析这三个菌株的系统发育位置。基于54个代表性假单胞菌属菌株的多位点序列分析,使用最大似然(ML)方法绘制系统发育树,包括51个具有完整基因组序列的染色和这三个新测序的菌株(IMP66,IMP67和IMP68),菌株IMP66,IMP67和IMP68都聚集在铜绿假单胞菌组内,并且都被鉴定为铜绿假单胞菌菌株
主要结果:通过使用PacBio和Illumina杂交方法,从原油中分离出了三种假单胞菌菌株(分别命名为IMP66,IMP67和IMP68)用于全基因组测序。系统发育分析表明,这3个菌株均为铜绿假单胞菌。




2.探讨基因组中有没有目标序列或基因?
StatisticalOptimisation of Phenol Degradation and Pathway Identification throughWhole Genome Sequencing of the Cold-Adapted AntarcticBacterium, Rhodococcus sp. Strain AQ5-07
 DOI:10.3390/ijms21249363
主要结论:使用IlluminaHiseq平台通过全基因组测序(WGS)获得菌株AQ5-07的组装的基因组草图序列(6.75Mbp)。基因组分析确定了包含catAcatBcatCcatRpheRpheA2pheA1的完整基因簇。基因组包含了苯酚和邻苯二酚降解所需的完整酶系统,同时表明苯酚降解是通过β-酮己二酸途径发生的.。




3.判断样本是否有研究的潜力,如是否具有感兴趣的基因或通路。
ComparativePathogenomics of Aeromonas veronii from Pigs in SouthAfrica: Dominance of the Novel ST657 Clone
DOI:10.3390/microorganisms8122008
主要结论:在IlluminaMiSeq平台上通过全基因组测序探索了从南非夸祖鲁-纳塔尔省的猪中回收的碳青霉烯抗性气单胞菌(Aeromonasveronii)分离株的致病组学。此外,这些分离株携带几种毒力因子(粘附因子,毒素和免疫逃避),以不同的排列和组合,导致感染能力的差异。系统发育基因组学和元数据分析揭示了对水环境和水生动物的偏好,使得Aeromonasveronii成为潜在的一种健康指示细菌。




Genome-WideIdentification and Functional Characterization of β-Agarasesin Vibrioastriarenae StrainHN897
DOI:10.3389/fmicb.2020.01404
主要结果:从中国南方沿海海水中分离出的弧菌菌株HN897被证明具有琼脂糖分解作用,能够分解d-半乳糖。在这里,我们使用Illumina和PacBio测序来组装菌株HN897的整个基因组序列,该菌株由两个环状染色体(Vas1和Vas2)组成。在所有类型的碳水化合物活性酶类别中,糖苷水解酶(GH)是HN897基因组中最常见的。其中包括八个被确定为假定的β-琼脂糖的GH,它们以相等的比例属于GH16和GH50家族。同源性分析表明,GH16和GH50基因串联排列在两个与基因重复一致的不同染色体上。基因敲除和互补研究以及表型分析证实,GH16_16亚家族基因Vas1_1339表现出该菌株的琼脂分解表型。总的来说,这些发现解释了菌株HN897的琼脂分解,但也提供了宝贵的资源,以更详细地了解菌株HN897的进化和生理能力。





4.多样本宏观分析,如系统进化分析、分型、溯源分析等。
Phylogeneticallyinformative mutations in genes implicated in antibiotic resistancein Mycobacterium tuberculosis complex
DOI:10.1186/s13073-020-00726-5
主要结果:使用llumina技术(MiSeq,NextSeq500,HiSeq2500)对样本进行测序。为了准确地解释基因型药物敏感试验(drugsusceptibility testing,DST)的全基因组测序数据,需要全面了解结核分枝杆菌复合物(Mycobacteriumtuberculosis complex,MTBC)中与抗生素耐药相关的基因的遗传变异的关系。该作者对405个MTBC菌株进行了21种抗结核药物耐药性的92个基因的SNP检测,如下图所示分为了7个进化分支,确定基因型与表型之间的关系




5、可在基因层面对多个样本进行比较分析,进行样本间结构的比较。
Clinicallyrelevant mutations in core metabolic genes confer antibioticresistance
作者:AllisonJ. Lopatkin等期刊:Science 时间:2019.2.15影响因子:41.845
DOI:10.1126/science.aba0862
主要结果:使用IlluminaHiSeq 2500 进行基因组测序。为了评估这些代谢突变是否产生耐药性,根据其患病率和临床意义,选择了与代谢相关的基因(sucA,gltD,ushA,icd,ycgG和yidA)和经典抗性(ompF,acrD和gyrA)的代表性子集。代谢突变使MIC增加到至少一种抗生素,而且在许多情况下超过一种抗生素,在所有情况下,代谢突变体至少对抗生素的一种耐药,与相应的MIC一致水平,这表明,代谢突变可能影响表达水平和/或催化活性,而不是蛋白质结构或功能,尽管这种机制效应并不明显。总的来说,这些结果表明,这些临床相关的代谢变异确实具有耐药性。





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