01
检测前
注意事项
注意事项:
在双鼠单抗的夹心法中使用阻断剂去除HAMA干扰。
进行多个阻断剂性能对比时,在同一检测中进行平行测试。
为了获得最佳性能,建议在添加单抗之前先在样本中添加HAMA阻断剂,即先将阻断剂加入到样本稀释液中。如果你的检测不使用样本稀释液,可以将HAMA阻断剂添加到检测稀释液中,然后直接将检测稀释液和样本一起加到反应孔中进行反应。在测流免疫层析检测中,可以将HAMA阻断剂添加到样品垫、样本稀释液或预处理液里,或者直接添加到膜上作为阻断条。
为了量化不同阻断剂或不同阻断剂浓度之间的阻断率差异,最灵敏的方法是检测HAMA样品中未被阻断的HAMA活性(确保OD值在线性可读范围内)。如果未阻断HAMA/RF样本的OD值较高,可以稀释样本,来确保其OD值读数在1-2以内,来确保检测灵敏度。
在评估任一阻断剂(如:TRU Block) 之前,确保检测中使用的任何稀释液或缓冲液中不含任何其他阻断剂成分。
只选择含有已知HAMA、HA和RF干扰的人类血清或血浆样品进行评估。非人体样本(如动物或植物)、粪便、尿液或其他非血液样品不含HAMA,不适合用于HAMA阻断剂的性能评估。当测试阻断剂性能时,了解检测中的干扰是否是由样品中的HAMA、HA或RF引起是最重要的。检测干扰也可能是由非特异性结合或一些其他类型的干扰引起的,因此只有样品中存在已知有HAMA、HA和RF干扰的样品才可用于HAMA阻断剂的评估。
在每次检测中包括阳性对照(无阻断的 HAMA 样品)和阴性对照(仅缓冲液-无 HAMA 样品)。
02
阻断剂
使用方法
使用以下流程图帮助选择正确的阻断剂检测方法
01
Protocol A
* 阳性对照=HAMA样品(样品中不含阻断剂)
* 阴性对照=仅缓冲液(无样本/无阻断剂)
02
Protocol B
* 阳性对照=HAMA样品(样品中不含阻断剂)
* 阴性对照=仅缓冲液(无样本/无阻断剂)
03
如何比较阻断剂性能
1. 计算阻断百分比
2. 比较每种阻断剂可以阻断的HAMA/RF样品数量
03
迈迪安TRU Block阻断剂
迈迪安开发的TRU BlockTM的免疫检测阻断剂是一种全新的HA、HAMA和RF阻断剂。TRU Block含有一种专门的结合剂,可以直接对抗抗体干扰,能够与HA、HAMA和RF高亲和力结合。
一旦与干扰抗体结合, TRU Block会通过位阻进一步阻止HA与其它试验成分结合。TRU Block的性能优势包括覆盖范围更广,可以阻断所有类型的HA和RF的干扰广,并且可以在低浓度下使用,与小鼠IgG相比具有更好的阻断效果。
TRU Block的阻断性能分别通过间接法(图 1)和直接法(图2)双鼠单克隆ELISA检测中进行评估。TRU Block,小鼠IgG和另一种常见的HA阻断剂,分别添加到样本稀释缓冲液中,对比他们的阻断效果。结果表明,在基于ELISA的免疫检测中,TRU Block的阻断性能优于小鼠IgG和其他商用阻断剂。
TRU Block也已成功用于化学发光检测和侧向流免疫检测中,干燥后用于样品垫和检测抗体之间即可。
性能对比– TRU Block vs 竞品
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北京迈迪安生物科技有限公司是Meridian Bioscience在中国设立的全资子公司。Meridian BioScience (以下简称:迈迪安)是一家全球领先的生物诊断公司,总部设立在美国,距今已有47年的历史。迈迪安公司分为诊断和生命科学两个部分,在中国地区的主营业务是生命科学产品,包括各种分子和免疫诊断检测的关键原料,如抗原抗体、免疫阻断剂、PCR和LAMP反应的聚合酶和优化的预混液、核苷酸等,为人体、动物、农业、环境及食品安全等各种检测提供全面的解决方案。47年来,迈迪安已经成为全球各领域诊断企业的首选原料供应商!
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