传统的乳腺癌诊断方法依赖于免疫组织化学（IHC），这种方法耗时且需要熟练的病理学家操作。
本研究中使用RPL13A作为内源性控制基因，通过使用多重RT-qPCR和touch down法来检测HER2、PGR、ESR和Ki67的基因表达，Touch down PCR设置如下：
图2显示了对四个乳腺癌靶基因表达水平的检测，包括（A）参考基的RPL13A在作为对照的所有样品中扩增；（B）ESR基因仅在样品L25和L26中表达，而在HER2 11和TN15中不表达；（C）PGR基因在样本HER2 11、L25和L26中表达，但在TN15中不表达；（D）HER2基因在样本中表达，而在L26和TN15中不表达；（E）Ki67基因表达在样本HER2 11、L25、L26和TN15中表达，这些样本是确定乳腺癌亚型的关键。血管生成基因表达，包括（F）HIF1A在样本HER2 11、L25和L26以及TN15中表达；（G）ANG标记在样本HER2 11、L26和TN15中表达；（H）VEGF标记物在样本HER2 11、L25和L26以及TN15中表达。
研究中通过qPCR法评估了代表四种乳腺癌亚型的61个样本中HER2、PGR、ESR和Ki67基因的基因表达谱，结果显示RT-qPCR方法与IHC具有高度的诊断相容性。
图3显示了RT-qPCR和IHC检测结果的对比（*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001，ns=不显著），显示分子检测法得到的Ct值与IHC法相比较具有较高的准确性。
与IHC相比的优势，RT-qPCR提供独立于主观解释的客观结果，速度更快，不需要专家细胞学家的参与。在临床应用潜力方面，RT-qPCR的分子检测法可以彻底改变乳腺癌的诊断和治疗，为改善患者护理提供快速可靠的参考数据参考，可以提高乳腺癌诊断的准确性、速度和成本效益， 可以作为识别乳腺癌亚型的强大诊断工具。
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| MDX130/131 | 可风干唾液直扩qPCR/RT-qPCR预混液 |
| MDX132/133 | 可冻干唾液直扩qPCR/RT-qPCR预混液 |
| MDX140/141 | 可风干粪便直扩qPCR/RT-qPCR预混液 |
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本文图片和内容均翻译自文章：https://doi.org/10.1016/j.bbrep.2023.101615
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