日前Revvity公布其基于血液的分子检测EURORealTimeTM APOE检测已获得CE批准，该检测能够对APOE基因进行准确的基因分型，可用于帮助评估患者接受阿尔茨海默抗淀粉样蛋白β治疗时出现副作用的风险。
EURORealTime APOE PCR检测可同时检测三种最常见的APOE形式，即E2、E3和E4。E4基因携带者发生危及生命的脑水肿或微出血的风险最高，这是抗淀粉样蛋白β疗法的副作用。借助这项新检测，只需使用从单个血液样本中分离出的基因组DNA进行一次反应即可确定患者的APOE基因型。
阿尔茨海默（Alzheimer’s Disease, AD）是一种进行性神经退行性疾病，与年龄相关的痴呆症最常见的原因，它影响认得记忆和思维，并使患者越来越依赖他人，是全球目前主要的健康问题之一。病例数量正在迅速上升，预计在未来几十年将继续增长，造成巨大的社会和经济负担。
AD的主要病理特征是大脑中淀粉样蛋白β的聚集，它驱动了疾病过程的其余部分，例如淀粉样蛋白-β产生和清除之间不平衡导致的神经原纤维tau缠结。在过去的几年里，市场上出现了清除有毒淀粉样蛋白沉积物的新型疾病修饰药物。然而，在某些个体中，它们会引起与APOE基因型相关的严重副作用。
载脂蛋白E（Apo-E）是一种脂质转运蛋白，可将胆固醇和磷脂输送到全身。Apo-E通过与淀粉样蛋白β相互作用并调节其聚集和清除在AD中发挥作用。Apo-E还通过各种其他淀粉样蛋白β相关和独立的途径参与AD的发病机制：例如，通过调节大脑突触可塑性、葡萄糖代谢、神经元信号传导、氧化应激、神经炎症、线粒体功能和胆固醇运输。
有三种临床相关的APOE等位基因，分别表示为ε2、ε3和ε4。根据等位基因的不同，产生了三种不同的Apo-E蛋白亚型，其在112和158位的氨基酸不同。
E2在两个位置都含有半胱氨酸，E3分别含有半胱氨酸和精氨酸，E4在两个位都含有精氨酸。变异型ε3是三个等位基因中最常见的。ε3/ε3被认为是正常基因型，~63%的人群携带。ε4等位基因与AD发病风险增加有关。这种变异在杂合ε3/ε4型中的出现频率为21%，ε2/ε4型为2%，纯合ε4/ε4型为2%。另一方面，ε2等位基因对AD具有神经保护作用。11%的人群携带杂合型ε2/ε3，1%携带纯合型ε2/ε2。
ε4等位基因在AD患者中的发现频率是认知正常人群的三倍左右，分别为38%和14%。相比之下，ε2等位基因仅出现在3.9%的AD患者中，而认知正常人的这一比例为7%。
AD的早期诊断对于有效的治疗管理和患者支持非常重要。AD的诊断基于临床评估、正电子发射断层扫描（PET）等成像方法以及脑脊液（CSF）中生物标志物的分析。APOE基因分型本身在AD的诊断中并不起主要作用，因为其预测价值有限。CSF分析被认为是最敏感的诊断方法，可以在疾病发作前多年检测病理变化。最重要的CSF生物标志物是淀粉样β1-42比1-40比值、磷酸化tau和总tau。这些标记物可以通过例如ELISA 或CLIA进行测量。这些检测使用高度特异性的单克隆抗体来精确检测每种分析物。
治疗的新时代尽管阿尔茨海默病无法治愈，但在过去的几年里，疾病修饰疗法的引入可以延缓早期AD的疾病进展。这些基于单克隆抗体的治疗方法减少了大脑中的淀粉样β斑块，减缓了认知和功能的衰退。为了有效，抗淀粉样蛋白疗法必须在轻度认知障碍的前驱阶段实施。市场上的第一种药物aducanumab（Aduhelm）于2021年根据加速审批途径获得了美国食品药品监督管理局的批准。第二种药物lecanemab（Leqembi）于2023年获得传统批准，用于治疗经PET或CSF检测证实为淀粉样蛋白病理的AD早期患者。
淀粉样蛋白修饰疗法的副作用在某些情况下，抗淀粉样蛋白治疗可能会引起副作用，包括淀粉样蛋白相关成像异常（ARIA）伴水肿和/或渗出（ARIA-E）或出血性变化（ARIA-H）。这些被认为是抗体治疗引起的血管脆性增加和蛋白质液体和红细胞渗漏的表现。虽然ARIA主要是无症状的，但可能会引起其他症状，如头痛、意识模糊、视力变化、头晕、恶心、步态困难和癫痫发作。在少数情况下，副作用甚至是致命的。如果检测到ARIA，治疗通常会暂停，直到好转或完全停止。
ε4等位基因携带者患ARIA的风险更大，纯合子携带者被认为风险最高。ε4非携带者的ARIA发生率为5.4%，杂合子为10.9%，纯合子为32.6%。症状性ARIA的发生率分别为1.4%、1.7%和9.2%。
APOE基因分型的意义与AD相关的APOE基因变异的测定越来越多地被推荐作为抗淀粉样蛋白治疗前的筛查工具，以评估负面后果的风险。与其他基因型相比，ε4携带者患ARIA的风险增加的信息可以纳入患者管理决策中。在接受lecanemab治疗的患者中，治疗后监测主要针对检测ARIA，建议ε4携带者，特别是纯合子，提高对ARIA的警惕。
为了帮助防止服用抗淀粉样蛋白药物产生任何重大副作用，Revvity研发了APOE基因分型检测，以帮助确定一个人可能患有哪些 APOE 变异，从而可能预测他们是否会对这些类型的疗法产生负面反应。
EURORealTime APOE检测是基于PCR的基因分型多重检测可同时检测APOEε2、ε3和ε4等位基因，并推断出六种可能的基因型ε2/ε2、κ2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3、κ3/ε4和ε4/ε4。每个患者样本只需要一个反应。该测试是在从EDTA血液样本中分离出的gDNA上进行的。分析处理可以在已建立的仪器上自动化，结果使用EURORealTime分析软件进行评估、记录和存档。
EURORealTime APOE的精密度测试结果显示出100%的基因型准确率。分析灵敏度评估显示所有21个样本的基因型分配有效且正确，1ng/µl为推荐的最低gDNA检测浓度。根据 110/110个案例中与两种参考方法的一致性，分析准确度达到 100%。
通过比较APOE基因型分布，发现AD患者ɛ4等位基因携带者（即ɛ2/ɛ4、ɛ3/ɛ4 和ɛ4/ɛ4）的比例高于HBD患者（50.0% vs. 25.2%）。在这些人群中，ɛ4/ɛ4基因型的患病率为AD患者为25%，而HBD患者为2.8%。
AD 患者中APOE-ɛ4/ɛ4基因型的患病率很高，加之这些纯合携带者罹患 ARIA-E 的风险增加，证实了抗淀粉样蛋白治疗前进行APOE基因分型的重要性。
APOE基因分型的使用已成为支持患者管理的重要手段。对于治疗AD患者的临床医生来说，APOE基因分型不仅提高了临床试验的精确度，还可提供额外的患者信息，确保患者接受最适合其基因特征的药物，将使抗淀粉样蛋白治疗的方法更加个性化，这对于促进个性化治疗和改善阿尔茨海默病患者的治疗效果至关重要。
该试剂结合了抑制物耐受性和可冻干两个关键特点，是用于高通量和POC基因分型检测的理想选择。其优化的配方可实现卓越的集群分辨率和清晰的等位基因区分，即使对于具有挑战性的SNP靶标，或对血液、血清和血浆样本里有PCR抑制物存在的情况下也是如此。
• 超灵敏：可直接从血液样本中检测低至1拷贝靶标
• 抗抑性：对全血、血清、血浆和抗凝血剂中存在的PCR抑制物具有超强耐受性
• 特异性：紧密的荧光簇，可清晰地区分等位基因，非常适合困难的SNP
• 可冻干：可用于液体体系或冻干使用，是高通量或POC检测的理想选择
对10%人体全血的检测而得荧光簇更紧密，等位基因辨别能力更强
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内容来源：360dx， Revvity官网
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