确定目标脂肪组织区域，以专业的手法进行采集，确保样本的代表性。小心操作，防止对组织造成任何损伤。 采集后立即妥善保存样本，避免其受到外界因素的干扰。
固定液的作用不可小觑，它能使脂肪组织的结构得以稳定。日常工作中我们推荐使用10%中性缓冲福尔马林固定，用其固定组织效果明显，对免疫组化、原位杂交、FISH、PCR、二代测序等检查效果优于其他混合固定液。 准确选择固定液，根据样本大小确定合适的用量，一般至少应为组织块总体积的 5-10倍，也可达15-20倍，确保固定效果达到最佳。
一台性能卓越的切片机是关键。检查刀片的锋利程度，确保能切出薄且均匀的切片。 准备好干净整洁的载玻片、盖玻片以及各种必需的试剂和工具。
将脂肪组织样本完全浸入固定液中，放置在适宜的环境下进行固定。严格把控固定时间，既不能过长也不能过短。大多数组织在 10% 中性缓冲福尔马林中应固定 6-24h。固定的时间与使用固定液的种类、组织块的厚薄、固定时的温度等有关，不同的固定液有不同的固定时间。
设置适合的脱水机搅拌速度，让固定液充分与组织接触。 组织块的大小厚度可根据组织类型而不同，但组织要得到良好的固定，原则上取材后组织块厚度不应超过4mm，3mm更为合适。取材大小建议不超过2cm×1.5cm×0.3cm。
按照顺序使用不同浓度的乙醇溶液进行脱水处理，70%乙醇→85%乙醇→95%乙醇→95%乙醇→100%乙醇→100%乙醇。精确控制每个浓度的停留时间，确保脱水效果均匀一致。 脱水过程中组织样本应充分的脱水和脱脂，组织内含有水，二甲苯不能渗透到组织里，更无法将脂肪溶解。这就解释了在日常工作中，由于乙醇在油脂中渗透速度比其它组织的渗透速度要慢的多，在有限的组织脱水时间里（需要在规定的时间内完成），往往会导致较厚的组织或含脂肪的组织脱水不彻底，组织内残留的水分，阻碍了二甲苯有效的渗透到组织内溶脂或替代乙醇的作用，造成组织浸蜡不充分，难以切片。
在二甲苯透明前，使用乙醇与二甲苯液处理60分钟可以使脱水变得彻底。当使用了无水乙醇和二甲苯混合液后，二甲苯可以将脱水干净的外表脂肪迅速溶解，从而促进无水乙醇的渗透，无水乙醇与二甲苯协同交替作用，达到一边脱水一边溶脂的功效，使脂肪或有脂肪包裹的组织得到充分的脱水与透明，保证石蜡有效的浸透，切片的完整性明显提高。
把脱水后的组织放入二甲苯中，透明的目的是让组织变得更加通透，为后续的浸蜡做好准备。 谨慎掌握透明时间，避免过度透明或透明不足。
将透明后的组织放入熔化的石蜡中，让石蜡充分渗透到组织内部。合理控制浸蜡的温度和时间，确保石蜡均匀分布。
将浸蜡后的组织放入包埋模具中，注入适量的石蜡，待其冷却凝固成组织蜡块。注意组织的摆放位置和方向，以便后续切片。 包埋时，对于脂肪组织，包埋时使用包埋锤按压脂肪组织，尽可能的把脂滴挤压出脂肪细胞，然后进行包埋。
运用切片机细心地将组织蜡块切成薄片。调整好切片的厚度和速度，力求切出高质量的切片。 保持手部稳定，避免在切片过程中出现抖动。 那么经过充分的固定、脱水、透明、浸蜡和包埋时均匀挤压，还是不能得到完整的切片时，我们该怎么办？为此我根据个人的经验录了一个小视频，与大家一起交流学习。
将切好的切片放入温水中使其展平，然后迅速捞起贴在载玻片上。注意防止产生气泡和褶皱。
根据诊断需求选择合适的染色方法。严格控制染色的时间和温度，确保染色效果清晰美观。
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设计：鹏飞
编辑：小约翰
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