研究背景
论文信息简介
正文介绍
基于CRISPR的基因敲除筛选发现 htrA是沙门氏菌介导的生物毒性的关键调控因子
AIS菌株与遗传优化的QS系统结合实现肿瘤特异性蛋白质表达
工程菌株AISI-pLuxI-htrA通过QS介导的HTRA表达恢复了免疫原性
理论上，这种菌株可以恢复肿瘤特异性免疫原性(图3A，B)。组成型表达htrA的AISI-pJ23100-htrA菌株用作阳性对照。蛋白质印迹分析证实HTRA水平随着应变密度的增加而增加(图3C)。HTRA拯救菌株的生物膜含量与VNP-NC菌株的生物膜含量没有显著差异(图3D)。AISI-pLuxI-htrA菌株的外多糖层厚度和EPS含量大于AISI-NC菌株，并且与VNP-NC菌株没有显著差异(图3E，F)。
这些结果表明基于QS系统的HTRA再表达将AISI株的EPS恢复到接近VNP株的水平。此外，在酸性和氧化条件下，AISI-pJ23100-htrA菌株的生长曲线与VNP-NC菌株相似。AISI-pLuxI-htrA菌株的生长也类似于VNP-NC菌株的生长，因为在封闭培养环境中，随着时间的推移，自动诱导剂累积会诱导菌株活化。最后，AISI-pLuxI-htrA菌株恢复了接近VNP-NC菌株的细胞内活力。与AISI-NC菌株相比，AISI-pLuxI-htrA菌株更显著地促进了M0型巨噬细胞分化为M1型巨噬细胞和重塑的M2型巨噬细胞(图3G，H)。前者的有效激活作用可能源于细菌EPS通过巨噬细胞上的经典TLR4-NFkB信号轴的刺激。此外，与AISI-NC菌株相比，该菌株增强了嗜中性粒细胞的NETs和活性氧的产生(图3G)。总之，这些结果表明HTRA修复逆转了AISI菌株的应激抗性、免疫细胞活化能力和直接肿瘤细胞杀伤能力。
AISI菌株基于QS系统的肿瘤特异性HTRA再表达确保了生物安全性和转移至远端肿瘤的能力
