一、实验名称：线虫高温实验
二、实验目的：探究XX对秀丽隐杆线虫热应激的影响
三、材料方法：
1、仪器耗材：
体视显微镜；生化培养箱；恒温培养摇床；立式压力蒸汽灭菌器；
XX：xx mg/mL；野生型 N2 （Bristol）秀丽隐杆线虫（C.elegans）。
2、实验方法：
（1） 固体培养基（nematode growth media，NGM）配制 ：称 4.0 g 琼脂、0.5 g 蛋白胨、0.6 g NaCl 加入 100 mL 蒸馏水溶解摇匀，再加入 1 mol/L MgSO4 溶液、1 mol/L CaCl2 溶液各 200 μL，pH6.0 磷酸氢钾缓冲液 3.25 mL， 摇匀后补足蒸馏水至 200 mL。121 ℃ 高压蒸汽灭菌 20 min，温度降至 60 ℃ 左右，加入 200 μL 5 mg/mL 胆固醇乙醇溶液，倒板备用。取 L4 期野生型 N2 线虫于涂布 OP50 的 NGM 培养基内，观察其产卵情况，开始产卵 4 h 后，将 L4 期成虫挑去，将卵培养至 L4 期成虫，该批成虫即为同期化成虫。
（2） 加药组与对照组NGM的配制：加药组 NGM 配制方法同1，加入XX后，配制成XX xx mg/mL的 NGM 培养基，对照组 NGM 的配制方法同 1，加入与XX等量的蒸馏水，配制成对照组 NGM 培养基。
（3） 将同期化的野生型 N2 线虫，随机挑取 30 条至加药组与对照组，20 ℃ 下培养 3 d，第 4 d 于 37 ℃ 下培养 2 h，再转入相应 NGM 中继续培养，此时记为第 0 d， 每天更换培养基同时观察并记录线虫死亡情况，线虫死亡及剔除标准：无运动迹象，用铂丝轻触后 10 s 无反应；线虫因爬出培养皿失踪或致死、虫卵在体内孵化成袋样虫的不计入数据。实验重复 3 次，整理数据并绘制曲线。
四、实验结果
将原始数据进行统计后，应用GraphPad Prism软件进行绘制曲线
五、结果分析
线虫在高温条件条件下，xx mg/mL 加药组与对照组相比，曲线右移，表明XX能增强线虫抗热应激的能力。
六、原始数据
"生命科学技术摘集" 添加小编
公众号 微信号
