Western blot 电泳液可以「重复用」吗?和新的电泳液比有什么区别?咱也不争论,文献数据来说话!

学术   2024-08-25 07:40   吉林  
近期,看了一些博主写了关于Western blot转膜条件的经验(《为什么WB实验中,目的蛋白会出现“多条带”或“条带大小与预期不符”》),非常值得借鉴。但是我想纠正一些说法,例如:转膜液现配现用,用完就倒掉,最多用超过3次左右,本人是不赞同的
首先,本人在校时自己配制的电泳转膜液就用了超过3次,该有结果的还是有结果,没有结果的还是没有结果;其次别人的研究论文文献都有相关的验证转膜液Transfer Buffer,摘要结论得出至少可以使用5次以上,但在文献中作者甚至使用到7次以上

图片来源:《Transfer Buffer Containing Methanol Can Be Reused Multiple Times in Protein Electrotransfer》截图

因此,转膜液不需要现配现用,4℃保存可以反复使用至少5次以上,对WB的结果不起决定性作用。现配现用,用完就倒掉会造成严重的环境污染值得一提的是,重复使用电泳液时,应确保电泳液中无杂质、无污染,并且其成分和性质在多次使用后仍保持稳定。

与新的电泳液相比,重复使用的电泳液可能存在以下区别
(1) 成分变化: 随着使用次数的增加,电泳液中的某些成分可能会逐渐消耗或发生变化,如缓冲剂、离子强度等。这些变化可能会影响电泳过程中蛋白质的迁移率和分离效果。
(2) 污染风险: 重复使用电泳液时,如果操作不当或电泳槽清洗不彻底,可能会引入杂质或污染物,如蛋白质残留、微生物污染等。这些污染物会干扰电泳过程,影响实验结果的准确性。
(3) 稳定性降低: 长时间使用或储存的电泳液,其稳定性可能会逐渐降低。例如,某些成分可能会发生氧化、水解等反应,导致电泳液的性能下降。

图片来源:GenStar官网

因此,在实验中应密切关注电泳液的使用情况,及时更换新的电泳液,以确保实验结果的准确性和可靠性。同时,在使用和储存电泳液时,应注意保持其清洁、无污染,并遵循正确的操作规程和储存条件,同时也随着商品化试剂的成熟,更多小伙伴更倾向于使用成品的商品化电泳液。

参考文献:

[1] Pettegrew CJ, Jayini R, Islam MR. Transfer buffer containing methanol can be reused multiple times in protein electrotransfer. J Biomol Tech. 2009 Apr;20(2):93-5. PMID: 19503619; PMCID: PMC2685604.



撰文 | NIRO

编辑 | 小冰

来源 | 原创

关于我们

NIRO科研喵(NIRO Research Meow)是一个专注于生命科学领域的自媒体平台。我们致力于为科研工作者提供全方位的支持和帮助,助力您的学习和科研!作为科研喵公众号的核心服务之一,我们提供各种科研服务,包括科研试剂、实验设计、数据分析、文章润色和翻译等。我们拥有一支经验丰富的专业团队,具备广泛的学科背景和深厚的科研经验,可以为科研工作者提供专业的指导和解决方案。

设置星标,不错过精彩推文!


点个在看你最好看

生命科学技术摘集
生命科学技术摘集【生科摘集】整理生命科学实验室常用实验技术等protocol,基本都是本实验室使用过或者正在使用的方法,全文均可复制。同时欢迎广大生命科学战友+V小编(BioChenTech)进行投稿,共建生命科学技术的工具公众号。
 最新文章