为响应广大植物外泌体科研工作者的需求,恩泽康泰上线了植物外泌体分离服务。
由于植物的特殊性,不同植物、不同部位、不同状态等均会影响前处理料液体积、外泌体分离方法选择以及分离得率以及纯度。因此恩泽康泰的植物外泌体分离服务将采取预实验和正式实验2阶段进行,通过预实验分离少量样本确定最佳分离方法以及大概的植物原材料和前处理的最终料液体积比,正式实验阶段据此进行扩大分离。这样能避免一顿操作猛如虎,最后啥囊泡也没拿到,如果预实验不行可及时止损。
植物外泌体分离服务项目流程图
恩博已经尝试用2种不同方法分离了西红柿、生姜和人参外泌体:
当然,如果您自己动手能力比较强,也可以尝试自行分离,只需要按照我们前面所述的操作方法进行前处理(榨汁、过滤纱布、依次过膜)得到榨汁液,而后采购我们的Exosupur®外泌体分离纯化试剂盒或者自行进行超离操作。
a.植物筛选策略1:从一系列可食用植物中,根据低致敏性(www.mayoclinic.org)、低零售成本(USDA)、已发表的研究没有已知的药物相互作用、高产量(particles)和高靶细胞摄取率,其中后2项指标作者直接进行了外泌体分离和测试。
b.植物筛选策略2:为了确定治疗自身免疫性皮肤病的潜在PLEV,首先研究文献和中药处方,从可食用植物中确定了10种有前景的组织来分离PLEV;接下来测试这10种PLEV对炎性HacaT(人类永生化角质形成细胞)细胞增殖的影响(这会导致银屑病和特应性皮炎的发展),只有生姜和西柚衍生的纳米囊泡抑制了炎性HaCaT细胞增殖,以及其炎症因子表达;然后比较2种PLEV的抗氧化能力,西柚衍生的纳米囊泡GEVs的抗氧化作用优于生姜衍生的纳米囊泡。综合表明,GEVs是治疗自身免疫性皮肤病的最佳候选者。
c.植物筛选策略3:选择了5种已知有效治疗炎症的中药,包括苦参、党参、黄芪、穿心莲和柴胡;提取植物外泌体,探索5种PELNP的口服稳定性,体外用胃液(SGF)、肠液(SIF)和结肠液(SCF)处理PELNP,监测了它们的平均直径,苦参衍生的类纳米囊泡外泌体(SFELNV)具有更好的稳定性。此外,研究了Caco-2细胞模型测试5种PELNPs的细胞摄取率,SFELNVs摄取效率最高。因此,确定SFELNV作为UC治疗的递送系统。
植物外泌体靶向改造策略参考案例
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可见,植物外泌体也可以通过脂锚孵育的方式进行靶向修饰。
植物外泌体小分子药物装载策略参考案例
前面介绍的案例中涉及到电穿孔负载小分子药物到西柚外泌体,或苦参外泌体的案例,或共孵育方式将小分子药物负载到西柚外泌体,此处不再详细介绍。
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公司成立以来累计获得多轮数亿元融资,现已建成超 3000 平米的外泌体 GMP 生产车间,并与国内外上千家医院、科研院校及生物企业建立合作,合作发表论文200+篇,处理不同类型的样本4万+例,申报国内外发明专利30+件,获有“国家级专精特新小巨人企业”、“博士后科研工作站”、“国家高新技术企业”、“中关村金种子企业”、北京市知识产权试点单位”等荣誉。
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