动物饲料
动物饲料由于可能是PRRSV的载体,最近成为研究的主题。研究了几种不同的动物饲料成分,如表2所示。在室温(25-27℃)保存的苜蓿接种30 min后病毒分离阳性。每个饲料样品(5 g/样品)接种PRRSV SD 1-7-4、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和塞内卡病毒A (SVA)三种病毒的混合物100µL。环境平均温度范围在4到10°C之间,平均相对湿度从26%到91%。在传统豆粕和干酒糟(DDGS)中,通过猪生物测定法在37天后检测到PRRSV的活毒,但在细胞培养中没有分离到病毒。
为了进一步验证饲料成分作为污染物的假设,开展了一个示范项目,在30 g饲料样品(有机和传统豆粕、赖氨酸、胆碱和维生素A)中加入2 mL这三种病毒。这些样品被储存在一辆商用卡车内的一个集装箱里,在美国各地运输了21天。结果显示,通过qRT-PCR检测,PRRSV病毒RNA具有高降解性。然而,猪的生物测定结果表明,该病毒在有机豆粕和传统豆粕中均可存活。
最近,研究了PRRSV (P129毒株)在不同温度(4℃、23℃和37℃)下在豆粕(SBM)、干酒糟(DDGS)和全价饲料(CF)中的生存能力。一般来说,通过在MARC-145细胞中分离病毒评估的病毒活力与温度有关,在较低温度下分离出病毒的频率更高。对于每种基质,无论温度如何,病毒在SBM中的存活时间都比在DDGS和CF中的存活时间长。
为了寻找防止病毒通过动物饲料传播的方法,试验了延长饲料储存时间对病毒存活的影响。同样,用上述三种病毒的2 mL混合物接种30 g不同饲料原料样品。这些样品在两种不同的环境条件下储存30天:在控制环境温度的室内储存和暴露于明尼苏达州冬季的室外储存。平均室内环境条件为20.1℃,35% RH,室外环境条件为−8.8℃,77% RH。在贮藏期结束时,采用qRT-PCR检测室内和室外贮藏条件下所有原料中所有病毒的RNA。只有在室外冬季条件下保存的样本含有活病毒,这是通过猪的生物测定来检测的。
在23.9℃(平均相对湿度为62.4%)、15.5℃(平均相对湿度为63.4%)和10℃(平均相对湿度为27.5%)条件下,在1吨饲料中加入10 mL被PRRSV污染的冰块,并在环境可控的拖车中储存30天,通过猪生物测定在23.9℃和15.5℃条件下没有检测到活病毒。然而,在10℃时,在生物测定中从猪的口腔液样品中检测到PRRSV RNA。
饲料成分 | 毒株 | 温度 | 湿度 | 存在时间 |
苜蓿草 | Isolate 92 (10356; NVSL) | 25-27℃ | NR | 30分钟VI |
传统豆粕 | 1-7-4 | 4-10℃ | 26-91% | 37天SBA |
平均9.3℃;从-17℃~28℃ | 平均35.7%;从10.4~75.3% | 21天RNA和SBA | ||
平均20.1℃;从19.8℃~20.4℃ | 平均35%;从34~37% | 30天RNA | ||
平均-8.8℃;从-4℃~14.7℃ | 平均77%;从62~88% | 30天RNA和SBA | ||
平均9.4℃;从3.2℃~17℃ | 平均66%;从38~66% | 23天RNA和SBA | ||
1-4-4 L1C | 23.9℃ | 平均62.4% | 未检测到 | |
15.5℃ | 平均63.4% | 未检测到 | ||
10℃ | 平均27.5% | 30天SBA | ||
有机豆粕 | 1-7-4 | 平均9.3℃;从-17℃~28℃ | 平均35.7%;从10.4~75.3% | 21天RNA和SBA |
平均20.1℃;从19.8℃~20.4℃ | 平均35%;从34~37% | 30天RNA | ||
平均-8.8℃;从-4℃~14.7℃ | 平均77%;从62~88% | 30天RNA和SBA | ||
平均9.4℃;从3.2℃~17℃ | 平均66%;从38~66% | 23天RNA和SBA | ||
维生素A | 1-7-4 | 平均9.3℃;从-17℃~28℃ | 平均35.7%;从10.4~75.3% | 21天RNA和SBA |
平均20.1℃;从19.8℃~20.4℃ | 平均35%;从34~37% | 30天RNA | ||
平均-8.8℃;从-4℃~14.7℃ | 平均77%;从62~88% | 30天RNA和SBA | ||
氯化胆碱 | 1-7-4 | 平均20.1℃;从19.8℃~20.4℃ | 平均35%;从34~37% | 30天RNA |
平均-8.8℃;从-4℃~14.7℃ | 平均77%;从62~88% | 30天RNA和SBA | ||
赖氨酸 | 1-7-4 | 平均20.1℃;从19.8℃~20.4℃ | 平均35%;从34~37% | 30天RNA |
平均-8.8℃;从-4℃~14.7℃ | 平均77%;从62~88% | 30天RNA和SBA | ||
全价饲料 | 1-7-4 | 平均9.4℃;从3.2℃~17℃ | 平均66%;从38~66% | 未检测到 |
表2 PRRSV在不同饲料成分中的存活时间
NA: PCR检测到病毒遗传物质。VI:在细胞培养中检测到活病毒。SBA:猪生物测定法检测到活病毒。
未完待续......
文章来源:
翻译:王圣伟;编辑:王瑞爱