一、背景介绍
肩袖疾病的研究目标一般包含两个层面：一是宏观层面，如生物力学建模、优化手术技术、评估新器械或设备等，这一类研究要求动物模型在结构和功能上与人高度相近，所以大动物模型，特别是非人灵长类动物模型，通常更为适合；二是微观层面，如腱骨愈合的生物学特征、潜在的信号通路以及疾病的遗传学机制，经验证的小动物模型通常能满足此类研究的需求。本次讲解大鼠肩袖损伤模型的构建方法。
大鼠模型适用于肩袖病理改变的研究。Soslowsky开发的大鼠模型具有与人相似的喙肩弓和过头运动，特别适合于研究反复运动或撞击引起的冈上肌腱损伤机制。大鼠模型还被广泛应用于探讨影响肩袖腱骨愈合的因素，如细胞、足印区准备、生长因子和激素。【1】
二、急性肩袖损伤模型
（1）造模前准备
材料准备：手术刀、眼科剪、缝合线、弯针、备皮刀、麻醉剂、大鼠固定架、纱布、生理盐水、镊子、消毒酒精、抗生素。
大鼠准备：在实验室适应性喂养1周。
（2）麻醉
大鼠吸入1%-5%异氟醚氧全身麻醉，待其角膜反射消失后视为麻醉成功。然后，取俯卧位固定于手术台上，术区备皮，消毒，铺无菌洞巾。
（3）分离三角肌，切除肌腱组织
在肩关节做长约0.3cm的纵行皮肤切口。钝性分离三角肌，显露冈上肌肌腱在大结节上的止点。于大结节止点处，锐性切断冈上肌肌腱，并切除0.5cm×0.5cm的肌腱组织造成全层肩袖损伤模型。
IS, infraspinatus tendon;冈下肌腱
S, supraspinatus tendon;冈上肌腱
这里需要仔细讲一下如何寻找到大鼠的肩袖，在操作过程中，找到大鼠的肘关节，拇指和食指捏住肘关节以上的区域，使得大鼠作被动的肩内收、外展，上举动作，用大拇指去感受肩关节内收、外展、上举动作时发生的肱骨头的运动轨迹。确定肱骨头位置后，必要时可以用马克笔标记以下。大致位置在靠近耳下，脖颈处。（可作预实验，在废鼠身上先找到冈上肌腱的位置）
（4）缝合
检查无活动性出血，清点器械无误后，予以生理盐水和络合碘交替冲洗伤口，然后逐层缝合伤口，最后伤口进行消毒包扎。
（在缝合的过程中，需要注意的时，先缝合肌肉层，再缝合皮肤，对应缝合，不可错位缝合或囫囵缝合，这与术后存活率紧密相关。并且注意无菌操作，以防大鼠创口的感染，影响下一步实验）
（5）造模后处理
观察大鼠自然苏醒，常规进食。始终置于鼠笼笼中限制活动，患肢不制动，造模后前3d，肌肉注射青霉素4×105U预防感染。
通过观察发现，由于疼痛回避，术后大鼠患肢与地面接触较少，患肢负重小，且在各方向上活动范围较小，基本可以达到制动的效果，同时也显著降低了大鼠的术后死亡率。
三、慢性肩袖损伤模型
在急性肩袖损伤模型造模后1周后行肩袖重建术，操作如下：
1、在同一时间无菌条件下，将实验动物进行全身麻醉后，待其角膜反射及捏掐反应消失后视为麻醉成功，然后以俯卧位固定于手术台上，术区消毒、铺无菌孔巾。
2、沿着原切口方向打开伤口，找到原来标记的冈上肌，充分显露出冈上肌肌腱，用2号爱惜邦缝线以改良的Mason-Allen缝合法对肌腱远心端进行编织。对腱骨结合处进行去骨膜和骨创面新鲜化处理，用安有0.8mm克氏针的电钻在肱骨大结节处钻两条平行的骨道，将冈上肌远心端编织好的两根线分别穿过骨道 并打结固定。
3、检查固定牢靠、组织无活动性出血、器械清点无误后，逐层缝合伤口，最后伤口消毒包扎。术后连续3天青霉素钠40万U肌注射预防感染，手术切口7天内每天换药，而后隔天换药直至伤口愈合。为减少制作动物模型过程所造成的人为误差，造模由同一名术者、同一固定方式、统一缝合方式完成。
两种动物模型适用于进行肩袖疾病的研究，证明大鼠是建立肩袖损伤动物模型的优先选择。临床上常见的为慢性肩袖损伤，因此在造模的时候为了符合临床疾病的规律，需要制备相应的动物模型，使得观察数据更加精准、牢靠，为临床应用奠定坚实基础。
本文作者是"大棚玫瑰"同学，在获得授权后，实验老司机将本文发表于公众号。
文稿：大棚玫瑰
校对：煲仔饭
素材：Canva
参考资料：
【1】刘萍,朱威宏,刘骞.动物模型在肩袖损伤研究中的应用[J].中南大学学报(医学版),2021,46(04):426-431.
【2】Partial-Width Injuries of the Rat Rotator Cuff Heal with Fibrosis
Elisabeth A. Lemmon, Ryan C. Locke, Adrianna K. Szostek, Megan L. Killian
bioRxiv 268920; doi: https://doi.org/10.1101/268920
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