BLT1在老龄小鼠脂肪组织免疫细胞内调节炎症的作用

文摘 2024-09-06 21:19 陕西

《免疫与衰老》(Immunity & Ageing)（JCR:Q1，IF：5.2）是一本开放获取、同行评审的在线期刊，它从免疫学角度研究衰老各个方面的手稿。该刊已被国际权威数据库SCIE收录，该刊致力于发表经过严格同行评审的高质量原创文章，反映GERIATRICS & GERONTOLOGY-IMMUNOLOGY领域的新进展、新技术、新成果，促进该领域科研交流和科研成果转化。

导读

衰老是一个复杂的生物学过程，以肥胖和免疫衰老为特征。免疫衰老包括免疫功能的下降和慢性低级别炎症的增加，称为炎症。脂肪组织的扩张，特别是内脏脂肪组织(VAT)的扩张，与促炎巨噬细胞的增加有关，促炎巨噬细胞在调节免疫反应和产生炎症细胞因子中起重要作用。白三烯B4受体1 (BLT1)是肥胖诱导炎症的调节因子。它的配体LTB4作为免疫细胞的化学引诱剂并诱导炎症。研究表明，在年轻生物脂多糖(LPS)内毒素血症挑战期间，BLT1对细胞因子的产生至关重要。然而，BLT1在老年生物体中的表达模式和功能尚不清楚。

在本研究中，我们研究了衰老雄性和雌性小鼠VAT内免疫细胞亚群中BLT1的表达。此外，我们研究了拮抗BLT1信号如何改变老年小鼠对LPS的炎症反应。我们的研究结果表明，老年小鼠表现出肥胖和炎症的增加，其特征是B细胞和T细胞的频率升高，以及VAT中的促炎巨噬细胞。BLT1在VAT巨噬细胞中表达最高。LPS和LTB4处理导致年轻和老年骨髓源性巨噬细胞(BMDMs)的BLT1增加。然而，LTB4治疗导致老年BMDMs的IL - 6扩增，而不是年轻BMDMs。用BLT1拮抗剂U75302治疗老年小鼠，然后用脂多糖诱导的内毒素血症导致抗炎巨噬细胞增加，磷酸化的NF - κ b减少，IL - 6降低。

结果

老年雄性和雌性小鼠内脏脂肪增加，免疫细胞组成改变

为了检验幼龄和老年小鼠的生理差异，研究测量了幼龄(3-8月龄)和老年(20-24月龄)小鼠的体重和VAT质量。老年雌性小鼠的体重和VAT质量均有所增加(图a)。老年雄性小鼠的体重与年轻小鼠相当，但VAT质量显著增加(图b)。

由于免疫细胞是调节VAT稳态的关键组成部分，我们研究了年轻和老年小鼠的免疫细胞亚群。我们使用多参数流式细胞术研究了雌性小鼠VAT免疫细胞亚群(包括B细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞和中性粒细胞)的频率和细胞计数。图c显示了识别每种细胞类型的门控策略。随着年龄的增长，B细胞和CD3+ T细胞占CD45+细胞的比例(图d)和每克组织细胞的比例(图e)均有所增加。

相比之下，嗜酸性粒细胞在CD45+细胞中的比例下降(图d)。我们还使用CD11c检测了年轻和老年小鼠的炎性巨噬细胞表型。我们使用平均荧光强度(MFI)检测巨噬细胞上CD11c的表达水平(图f)。结果显示老龄雌性小鼠VAT中巨噬细胞CD11c表达(MFI)增加(图f)。我们还量化了年轻和老年雄性小鼠脂肪组织免疫细胞亚群的频率(图g)和每克组织的细胞数(图h)。与雌性小鼠的结果一致，老龄雄性小鼠的VAT中B细胞和T细胞的比例和细胞密度均有所增加(图g-h)。

我们还检测到嗜酸性粒细胞和巨噬细胞的频率降低(图f)。老龄雄性小鼠VAT巨噬细胞的CD11c MFI无差异(图i)。综上所述，老年雄性和雌性小鼠的VAT在免疫细胞亚群上表现出相似的变化，包括B细胞和T细胞的增加，但巨噬细胞和嗜酸性粒细胞的频率降低。雌性小鼠显示CD11c MFI显著增加，CD11c MFI是促炎巨噬细胞的标志物。

BLT1在VAT巨噬细胞中高表达

据报道，BLT1在中性粒细胞、巨噬细胞和嗜酸性粒细胞中高表达。BLT1在脂肪组织的B2细胞上表达。为了检测年轻和老年小鼠中哪个免疫细胞亚群表达BLT1，我们比较了BLT1在B细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞和VAT中性粒细胞上的MFI。用于BLT1检测的抗体(anti-BLT1，克隆7A8)经BLT1过表达细胞和表达BLT1的小鼠外周血白细胞。重要的是，该抗体不会与BLT2或其他gpcr发生交叉反应。

该门控策略使用同型控制对指定免疫细胞亚群中的BLT1+细胞进行门控(图a)。所有检测BLT1+细胞的实验都使用相同的门控策略。我们还检查了腹膜渗出细胞(PECs)和脾脏组织随年龄变化特征明显。结果显示，与其他组织相比，年轻小鼠VAT巨噬细胞中BLT1 MFI最高(图b-c)。在VAT中，B细胞和T细胞上的BLT1 MFI与同型对照相当，表明BLT1在这些细胞类型上不表达(图c)。接下来，我们在年轻和老年雌性小鼠中定量BLT1+细胞。然而，我们没有观察到年轻和年老小鼠VAT中BLT1+巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的频率和细胞/g组织有任何差异(图d)。我们对雄性小鼠的VAT进行了类似的分析。老龄小鼠BLT1+巨噬细胞/g组织增加(图e)。综上所述，本实验表明，与其他组织和免疫细胞相比，BLT1在VAT巨噬细胞中高表达。

LTB4扩增老年BMDMs的IL-6

骨髓源性巨噬细胞(BMDM)的分化是研究巨噬细胞生物学的一个成熟的体外系统。为了解决炎症是否会在相当程度上影响年轻和老年巨噬细胞中的BLT1表达，我们通过在M-CSF中分化7天，从年轻和老年小鼠的骨髓中产生BMDMs(图a)。我们对未经处理或LPS (1 mg/ml)处理4 h)，用流式细胞术检测BLT1 MFI和CD86作为炎症表型的标志物。据报道，CD11c和CD86都是M1型巨噬细胞上高表达的标记物，均可用于识别促炎巨噬细胞。

在年轻和老年BMDMs中，LPS处理增加了BLT1 MFI和BLT1+细胞的频率(图b-c)。为了更仔细地检查促炎表型，我们评估了CD86在整个巨噬细胞群体和BLT1+巨噬细胞亚群中的表达。在检查巨噬细胞总数时，用LPS处理的年轻BMDMs中CD86 MFI增加，但在老年BMDMs中没有增加(图d)。

然而，当通过BLT1+巨噬细胞门控时，我们发现CD86 MFI在老年BLT1+ BMDMs中显著增加，而在年轻时则没有(图e)。由于在LPS刺激下，年轻BMDMs和老年BMDMs的BLT1表达值相当，我们想知道受体活性的增加是否支持老年BMDMs的炎症表型。我们用LTB4治疗BMDMs，并检测BLT1+细胞群。LTB4刺激(100nM;6h)增加BLT1+ BMDMs的频率幼龄和老年小鼠(图f)。进一步检测下游细胞因子的基因表达表明，与年轻相比，LTB4治疗的老年BMDMs中ll6显著升高。这与老年巨噬细胞的炎性表型是一致的，老年巨噬细胞对刺激更敏感，导致IL-6等细胞因子增加。

老年小鼠的M2极化BLT1+ BMDM中CD206减少

接下来，我们检查了BLT1是否优先表达在年轻或年老BMDM产生的M1或M2极化巨噬细胞上。用LPS和ifn - γ将BMDMs极化为M1巨噬细胞，用IL-4将M2巨噬细胞极化24小时(图a)。在M1极化后，年轻和年老BMDMs的CD11c表达没有差异(图b)。与年轻的BMDM相比，M2极化的老年BMDM表达的CD206 MFI水平较低(图c)。与年轻的BLT1+ M2巨噬细胞相比，衰老的BLT1+ M2极化巨噬细胞CD206表达减少(图d)。这些数据表明，衰老的BLT1+ M2巨噬细胞CD206表达减少，这可能与M2表型减少相一致。

BLT1拮抗剂改变VAT巨噬细胞的比例，降低pNFκB和IL - 6

BLT1拮抗剂U75302结合BLT1阻断下游信号传导，防止LPS诱导幼年小鼠的炎症。由于老年人对内毒素血症的易感性增加，我们想知道用U75302治疗抑制LTB4-BLT1轴是否会降低老年小鼠内毒素血症的严重程度。为了验证这一点，年龄较大的雄性小鼠(24个月大)在3 mg/kg LPS处理6小时之前1小时IP注射1 mg/kg U75302(图a)。注射BLT1拮抗剂不影响LPS诱导的低温(图b)。我们还检测了CD11c+和CD206+巨噬细胞亚群，以确定巨噬细胞是表现出促炎表型还是抗炎表型。我们使用频率和MFI测量了CD11c与CD206的比率。该分析显示，拮抗剂组中CD11c/CD206巨噬细胞的比例显著降低(图c, d)。NF-κB是BLT1下游的主要转录因子，其激活可导致细胞因子的产生。我们发现衰老小鼠在脂多糖后VAT中磷酸化NF-κB增加，而用BLT1拮抗剂治疗则降低了磷酸化NF-κB(图e)。我们还量化了受NF-κB活性调控的细胞因子。与对照组相比，LPS处理的老龄小鼠IL-6基因表达显著增加。我们还发现，LPS加BLT1拮抗剂处理的老年小鼠VAT中的IL-6显著降低(图f)。虽然LPS处理有IL-1β和TNF-α增加的趋势，但与BLT1拮抗剂没有差异(图f)。这些结果表明，BLT1拮抗剂通过改变促炎CD11c+巨噬细胞和抗炎CD206+巨噬细胞的比例，降低NF-κB的磷酸化，从而降低IL-6的表达，从而减轻炎症。

结论

LTB4-BLT1通路是产生促炎细胞因子的强诱导剂，表明BLT1是治疗感染和慢性炎症性疾病的潜在靶点。这项研究为BLT1表达的年龄特异性变化及其对VAT内巨噬细胞亚群的影响提供了有价值的见解。使用BLT1拮抗剂减轻巨噬细胞炎症为进一步探索BLT1作为治疗年龄相关疾病的潜在治疗靶点开辟了道路。综上所述，BLT1通过调节促炎和抗炎巨噬细胞促进老年小鼠VAT内的炎症。

http://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzkxMjI2MjkyNw==&mid=2247487435&idx=1&sn=9e799426d85ee6efc7344b0d6dabb316

葡萄营养世界

专注葡萄与葡萄酒营养科学动态，提高葡萄酒品质与产业发展。

最新文章

生物转化葡萄渣富含酚类提取物在结直肠癌中的抗氧化和抗增殖潜力

葡萄渣水提取物调节SW-480细胞和离体小鼠结肠的炎症和免疫反应

棕色脂肪来源的细胞外囊泡可通过NPM3诱导白色脂肪褐变并有效对抗肥胖

牛磺酸去氧胆酸以HSP90为靶点，促进蛋白质稳态，延长健康寿命

从喀麦隆传统加工牛奶和棕榈酒中分离的益生菌发酵乳酸乳杆菌和乳酸肠球菌对小鼠慢性收缩性损伤所致神经性疼痛的改善作用

Hedgehog介导的肠道味觉神经元轴控制果蝇的甜味感知

葡萄酒多酚与葡萄糖/乳清蛋白的胃肠道共消影响其生物可利用性和对结肠微生物群的影响

类黄酮原花青素C1具有衰老治疗活性，延长小鼠寿命

BLT1在老龄小鼠脂肪组织免疫细胞内调节炎症的作用

使用富含多酚的天然提取物靶向年龄或化疗诱导的衰老，可延长小鼠的寿命和健康寿命

三种葡萄渣，具有独特的可提取：不可提取多酚比例，可不同地减少喂食高脂肪高果糖饮食的大鼠的肥胖及其并发症

黄精生、酒蒸对D-半乳糖衰老小鼠氧化应激和肠道菌群的影响及抗衰老机制研究

无籽黑葡萄多酚在体外和体内通过靶向凋亡、肿瘤干细胞和增殖抑制肝细胞癌

Spexin通过促进JAK2-STAT3途径介导的白色脂肪褐变来改善肥胖相关的代谢紊乱

苹果多糖通过微生物群-肠-脑轴改善年龄匹配的认知障碍和肠道衰老

咖啡酸与阿拉伯木聚糖或β-葡聚糖结合，通过调节肠道微生物群和代谢物来减轻小鼠饮食诱导的肥胖

山核桃中的多酚通过改善肠道微生物群和抑制三甲胺 N-氧化物的产生来减少小鼠动脉粥样硬化的发生

揭示葡萄籽原花青素保健作用背后的副激素机制

白藜芦醇对年轻人和老年人脂肪源性祖细胞体外生物钟基因表达的影响

橙皮素激活CISD2以减缓老年人角质形成细胞的衰老，并使小鼠自然老化的皮肤恢复活力

短期适量饮用冰酒对C57BL/6J小鼠肝脏糖脂代谢的影响

尿石素 A 通过 mTOR /AKT/ERK1/2 途径诱导口腔鳞状细胞癌细胞凋亡和自噬串扰

肠道微生物代谢产物尿素B通过重塑微生物群和PD-L1/HLA-B来预防结直肠癌的发生

胍基乙酸能够改善高脂饮食诱导的肥胖中年小鼠肝脂肪变性和炎症，促进白色脂肪组织褐变

虎杖皂苷通过SASP下调延细胞衰老，并通过激活sir-2.1/自噬延长秀丽隐杆线虫的健康寿命

西拉葡萄多酚提取物保护人体骨骼肌细胞免受过量棕榈酸诱导的氧化和代谢应激:皮/种子成熟阶段的影响

ROS 诱导的核糖体损伤是 ZAKa 介导的肥胖和衰老代谢下降的基础

分类

时事

民生

政务

教育

文化

科技

财富

体娱

健康

情感

旅行

百科

职场

楼市

企业

乐活

学术

汽车

时尚

创业

美食

幽默

美体

文摘

原创标签

时事社会财经军事教育体育科技汽车科学房产搞笑综艺明星音乐动漫游戏时尚健康旅游美食生活摄影宠物职场育儿情感小说曲艺文化历史三农文学娱乐电影视频图片新闻宗教电视剧纪录片广告创意壁纸头像心灵鸡汤星座命理教育培训艺术文化金融财经健康医疗美妆时尚餐饮美食母婴育儿社会新闻工业农业时事政治星座占卜幽默笑话独立短篇连载作品文化历史科技互联网

发布位置

广东北京山东江苏河南浙江山西福建河北上海四川陕西湖南安徽湖北内蒙古江西云南广西甘肃辽宁黑龙江贵州新疆重庆吉林天津海南青海宁夏西藏香港澳门台湾美国加拿大澳大利亚日本新加坡英国西班牙新西兰韩国泰国法国德国意大利缅甸菲律宾马来西亚越南荷兰柬埔寨俄罗斯巴西智利卢森堡芬兰瑞典比利时瑞士土耳其斐济挪威朝鲜尼日利亚阿根廷匈牙利爱尔兰印度老挝葡萄牙乌克兰印度尼西亚哈萨克斯坦塔吉克斯坦希腊南非蒙古奥地利肯尼亚加纳丹麦津巴布韦埃及坦桑尼亚捷克阿联酋安哥拉