本期视频讲解了WB抗体孵育洗涤的一般流程TIPS:
封闭后可直接进行抗体孵育,洗涤与否均可。
建议一抗过夜孵育,且使用TBST或TBS作为洗涤缓冲液。
碱性磷酸酶标记的二抗应避免使用含磷酸盐的缓冲液,以免抑制酶活性。
洗涤次数视背景而定,通常3次,必要时可增加。
[视频版本]
往期文章
实验解析|掌握小分子蛋白WB的技巧与秘诀
关于WB,你不得不注意的小细节(一)
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封闭后可直接进行抗体孵育,洗涤与否均可。
建议一抗过夜孵育,且使用TBST或TBS作为洗涤缓冲液。
碱性磷酸酶标记的二抗应避免使用含磷酸盐的缓冲液,以免抑制酶活性。
洗涤次数视背景而定,通常3次,必要时可增加。
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