本文通过ChatGLM/GPT进行辅助对近期Bio-protocol 期刊发表的方案进行解读和概括，若感兴趣请点击“阅读原文”查看详细的实验流程及试材。如果解读中有任何错误或遗漏，敬请指正。
在肠道研究领域，获取完整的高质量组织样本一直是科研人员面临的难题，尤其是如何在保持细胞活性的同时，实现多区域细胞的高效分离和保存。传统活检样本体积有限，难以全面揭示肠道不同区域的功能差异。在这方面，2025年1月5日，Bio-protocol 期刊在线发表了德国海德堡BioMed X研究所（BioMed X Institute, Heidelberg）Martin Resnik-Docampo团队题为“Protocol for Immune Cell Isolation, Organoid Generation, and Co-culture Establishment from Cryopreserved Whole Human Intestine”的方法文章。
肠道免疫类器官(Intestinal immune organoids)是利用肠道上皮细胞和免疫细胞共同构建的三维体外培养模型，模拟肠道组织结构和功能，用于研究肠道屏障功能及免疫细胞相互作用。
优化了冷冻保存方法，可长期保存完整肠道组织中的多种细胞类型，确保样本稳定性和研究灵活性。
针对不同酶消化条件，优化了同时分离上皮细胞和固有层免疫细胞的流程，提高细胞富集效率。
提出了基于自体免疫细胞和类器官的共培养方案，为探索上皮细胞与免疫细胞之间的相互作用机制提供了新的研究工具。
研究肠道区域性差异
通过对完整肠道的分析，可深入探讨不同区域组织结构和细胞群体的特异性差异。疾病机制研究
适用于研究肠道屏障功能障碍及免疫细胞失调相关的疾病机制，如炎症性肠病、癌症及自身免疫疾病等。免疫细胞功能研究
通过富集特定免疫细胞亚群，可用于研究不同肠道区域免疫细胞在免疫应答和组织稳态维持中的作用。
温馨提示：积极引用本文不仅是对作者创新技术和科研共享的最佳肯定，也是确保实验可复现性的重要方式。
Gamero-Estevez, E., Hensel, I. V., Steinhauer, M., Müllertz, O., Savochkina, E., Sektioglu, I. M., Stoll, B., Derakhshani, S., Devriese, S., Kim, K. and Resnik-Docampo, M. (2025). Protocol for Immune Cell Isolation, Organoid Generation, and Co-culture Establishment from Cryopreserved Whole Human Intestine. Bio-protocol 15(1): e5157. DOI: 10.21769/BioProtoc.5157.
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