导言
小bio选择了10篇过去一年Bio-protocol期刊发表的有代表性的“细胞培养”相关实验方案。这些方案由全球科学家分享，方案内容详实、易于操作、容易复现，希望能为您的研究提供帮助与启发。
● Immunofluorescent Staining Assay of 3D Cell Culture of Colonoids Isolated from Mice Colon
来自小鼠结肠的结肠体在3D细胞培养中的免疫荧光染色分析
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4950
作者：Trisha Mehrotra、Xiaodi Shi、Didier Merlin
文章亮点：本文描述了一种免疫荧光染色方法，利用3D肠上皮类器官模型模拟肠道生理病理环境，精准展示蛋白表达及亚细胞定位，为炎症性肠病的转化研究提供新工具。
● Development and Characterization of Primary Brain Cultures from Japanese Quail Embryos
日本鹌鹑胚胎原代脑细胞培养的开发与特性分析
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5071
作者：Shaden Zoabi、Achinoam Blau、Shai Berlin
文章亮点：本文开发了一种独特的日本鹌鹑胚胎前脑细胞培养方法，可在体外存活30天，用于高通量筛选病毒载体、神经元电生理特性研究及单细胞mRNA测序。
● A Full Good Manufacturing Practice–Compliant Protocol for Corneal Stromal Stem Cell Cultivation
符合GMP标准的角膜基质干细胞培养全流程
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5074
作者：Mithun Santra、Yen-Michael S. Hsu、Shaheen Khadem、Sydney Radencic、Martha L. Funderburgh、Onkar B. Sawant、Deepinder K. Dhaliwal、Vishal Jhanji、Gary H.F. Yam
文章亮点：开发了一种符合GMP标准的人类角膜基质干细胞（CSSCs）分离与扩增方法，为角膜疤痕修复和临床级细胞移植治疗奠定了基础。
● Construction and Application of a Static Magnetic Field Exposure Apparatus for Biological Research in Aqueous Model Systems and Cell Culture
用于生物研究的水模型系统和细胞培养静态磁场暴露装置的构建与应用
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5077
作者：Jana Vučković、Hakki Gurhan、Belen Gutierrez、Jose Guerra、Luke J. Kinsey、Iris Nava、Ashley Fitzpatrick、Frank S. Barnes、Kelly Ai-Sun Tseng、Wendy S. Beane
文章亮点：提供了一个详细的静磁场暴露装置（MagShield）的设计、构建和操作方法，为研究磁场对生物系统的影响提供了标准化和可重复的方案。
● Phosphoproteomic Analysis and Organotypic Cultures for the Study of Signaling Pathways
用于信号通路研究的磷酸化蛋白质组分析和器官型培养
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4941
作者：Zilu Ye、Hans H. Wandall、Sally Dabelsteen
文章亮点：本文结合CRISPR-Cas9基因编辑、3D类器官皮肤模型与定量蛋白质组学和磷酸化蛋白组学，深入解析了人类组织中TGF-β信号通路，为疾病研究和药物开发提供了新方法。
● Method for Large-scale Production of hIPSC Spheroids
大规模生产hIPSC球体的方法
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4965
作者：Lucas Lemarié、Edwin-Joffrey Courtial、Jérôme Sohier
文章亮点：开发了一种基于3D打印硅胶模具的高效、低成本方法，可在标准6孔板中快速生成大量人诱导多能干细胞（hIPSCs）球体，适用于常规实验室使用。
● An In Vitro Model of Murine Osteoclast-Mediated Bone Resorption
小鼠破骨细胞介导的骨吸收体外模型
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5100
作者：Xiaoyue Sun、Zijun Wang、Yi Tang、Stephen J. Weiss、Lingxin Zhu
文章亮点：提供了一种基于牛皮质骨切片的高效体外模型，可定量评估破骨细胞在不同调控条件下的骨吸收活性，为研究骨骼代谢疾病机制及治疗靶点提供了可靠方法。
● Generation and Maintenance of Patient-Derived Endometrial Cancer Organoids
患者来源的子宫内膜癌类器官的构建与维持
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5093
作者：Mali Barbi、Divya Gowthaman、Arielle Katcher、Megan Gorman、Brian Yueh、Aaron Nizam、Charlie Chung、Erdogan Oguzhan Akyildiz、Marina Frimer、Gary L. Goldberg、Semir Beyaz
文章亮点：开发了一种经过优化的患者来源子宫内膜癌（EC）和正常子宫内膜类器官培养方法，能精准再现不同亚型的组织和分子特征，为研究EC进展及个性化治疗策略提供了临床相关的平台。
● Culture and Characterization of Differentiated Airway Organoids from Fetal Mouse Lung Proximal Progenitors
来源于胎鼠肺近端前体细胞的分化气道类器官的培养与表征
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5129
作者：Zhonghui Zhang、Chengxu Tao、Qiuling Li
文章亮点：提供了一种从小鼠胚胎近端上皮祖细胞生成含终末分化纤毛细胞和基底干细胞的3D气道类器官的详细方法，为研究肺发育、气道细胞命运决定及相关呼吸疾病提供了重要工具。
● Generation of Multicellular 3D Liver Organoids From Induced Pluripotent Stem Cells as a Tool for Modelling Liver Diseases
利用诱导多能干细胞生成多细胞三维肝类器官作为肝病模型的工具
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5042
作者：Setjie W. Maepa、Mohlopheni J. Marakalala、Hlumani Ndlovu
文章亮点：介绍了一种从诱导多能干细胞生成含肝细胞、星状细胞和Kupffer细胞的多细胞3D肝类器官的方法，为研究肝病模型、毒理学测试和再生医学提供了功能强大的工具。
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