导言
小bio汇总了过去一年Bio-protocol期刊发表的“蛋白检测”相关实验方案。这些方案由全球科学家分享，方案内容详实、逐步清晰、容易复现，希望能为您的研究提供帮助与启发。
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蛋白质检测的体外实验方法
● SUrface SEnsing of Translation (SUnSET), a Method Based on Western Blot Assessing Protein Synthesis Rates in vitro
翻译表面检测 (SUnSET)，一种基于蛋白质印迹的体外蛋白质合成率评估方法
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4933
作者：Marie Piecyk、Joëlle Fauvre、Cédric Duret、Cédric Chaveroux、Carole Ferraro-Peyret
文章亮点：本文介绍了一种无需放射性同位素的SUnSET方法，通过检测嘌呤霉素标记的多肽链，以简单且安全的方式评估蛋白质合成速率。
● Analysis of Cleavage Activity of Dengue Virus Protease by Co-transfections
通过共转染分析登革热病毒蛋白酶的切割活性
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4946
作者：Lekha Gandhi、Musturi Venkataramana
文章亮点：本文提出了一种无需纯化蛋白的外源条件下，通过共转染和Western Blot技术快速筛选登革热病毒NS3蛋白酶底物并评估抗蛋白酶分子的实用方法。
● Apolipoprotein B Secretion Assay from Primary Hepatocytes
初级肝细胞中载脂蛋白B分泌测定
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4982
作者：Yawei Wang、Xin Li、Runze Huang、Xiao-Wei Chen、Xiao Wang
文章亮点：本文提供了一种简单的原代小鼠肝细胞培养和APOB-脂蛋白分泌检测方法，通过免疫印迹技术实现对脂蛋白分泌过程的灵敏、特异和半定量分析，为研究脂质代谢与心血管疾病机制提供了重要工具。
● Metabolic RNA Labeling and Translating Ribosome Affinity Purification for Measurement of Nascent RNA Translation
过代谢RNA标记和翻译核糖体亲和纯化测量新生RNA的翻译
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5091
作者：Hirotatsu Imai、Akio Yamashita
文章亮点：本文建立了一种体外共培养体系，用于研究MSC对巨噬细胞活化和极化的调控机制，揭示其免疫调节潜力和在细胞治疗中的应用前景。
● Simple Analysis of Gel Images With IOCBIO Gel Software
使用IOCBIO Gel软件简单分析胶图像
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5053
作者：Lucia Jaska、Rikke Birkedal、Martin Laasmaa、Marko Vendelin
文章亮点：本文介绍了IOCBIO Gel软件，这是一款免费开源的凝胶图像分析工具，通过记录分析步骤和支持多样化电泳图像，显著提升结果的可重复性和数据管理效率。
● Detecting Native Protein–Protein Interactions by APEX2 Proximity Labeling in Drosophila Tissues
利用APEX2邻位标记技术检测果蝇组织中的天然蛋白质相互作用
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5090
作者：Jhen-Wei Wu、Chueh-Wen Wang、Wei Yang Hong、Anna C. C. Jang、Yu-Chiuan Chang
文章亮点：本文亮点在于利用CRISPR/Cas9技术将APEX2融合到内源性蛋白中，并通过优化的邻位标记技术（包括Triton X-100预处理），实现了果蝇卵巢组织中内源性蛋白-蛋白相互作用的识别和互作组网络的解析。
亚细胞结构和分子定位研究
● Mouse-derived Synaptosomes Trypsin Cleavage Assay to Characterize Synaptic Protein Sub-localization
基于小鼠突触体的胰蛋白酶切割实验解析突触蛋白亚细胞定位
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5164
作者：Jasmeet Kaur Shergill、Domenico Azarnia Tehran
文章亮点：本文提供了一种结合小鼠突触体纯化和限制性胰酶消化的方法，通过蛋白酶敏感性区分突触前和突触后蛋白，为研究突触蛋白的亚细胞定位及其在神经生理和病理中的作用提供了可靠的工具。
● Isolation of Viral Biofilms From HTLV-1 Chronically Infected T Cells and Integrity Analysis
从慢性感染HTLV-1的T细胞中分离病毒生物膜及其完整性分析
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5152
作者：Coline Arone、Hélène Dutartre、Delphine Muriaux
文章亮点：本文优化了一种无需化学或机械分离和超速离心的HTLV-1病毒生物膜分离方法，通过蛋白质组学和超分辨显微镜分析，保留生物膜结构完整性，为研究其分子组成和病毒传播机制提供了可靠的工具。
● Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles Derived from Ex Vivo Culture of Visceral Adipose Tissue
从离体培养的内脏脂肪组织中分离和鉴定细胞外囊泡
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5011
作者：Ankita Arora、Vinit Sharma、Rajesh Gupta、Anjali Aggarwal
文章亮点：本文开发了一种基于差速离心的可靠方法，从全组织（如脂肪组织）中分离和表征细胞外囊泡，提供对组织微环境在正常及病理条件下作用的深入理解，并克服了细胞培养和体液来源囊泡的局限性。
分子动态过程和标记实验
● Endothelin-1-Induced Persistent Ischemia in a Chicken Embryo Model
内皮素-1诱导的鸡胚持续性缺血模型
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5061
作者：Neha Kumari、Ravi Prakash、Abu J. Siddiqui、Arshi Waseem、Mohsin A. Khan、Syed S. Raza
文章亮点：本文采用内皮素-1在3日龄鸡胚中诱导持久缺血模型，通过多普勒血流成像和分子生物学验证，为研究缺血相关病理、氧化应激、炎症反应、细胞死亡以及药物筛选提供了一种创新的平台。
● Transient Expression Assay and Microscopic Observation in Kumquat Fruit
金桔果实瞬时表达测定与显微观察
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4968
作者：Jinli Gong、Xuepeng Sun
文章亮点：本文建立了一种以金橘果实为模型的农杆菌介导瞬时转化方法，结合荧光蛋白标记与活细胞成像技术，快速研究果实中基因功能、亚细胞定位及细胞动态行为。
● Immunofluorescence for Detection of TOR Kinase Activity In Situ in Photosynthetic Organisms
利用免疫荧光法原位检测光合生物中TOR激酶活性
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5140
作者：Ana P. Lando、María A. De Marco、Andrea C. Cumino、Giselle M. A. Martínez-Noël
文章亮点：本文亮点在于开发了首个针对光合生物（拟南芥和衣藻）检测TOR激酶活性的方法，通过免疫荧光定位技术实现了S6K磷酸化的原位检测，弥补了植物和藻类组织/细胞特异性TOR信号研究的技术空白。
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