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在上一期我们了解了培养基的一些基本原则及注意事项，那下一步就是细胞培养，有小伙伴总是不太会铺细胞板，今天我们就来看看铺出漂亮的细胞板有哪些技巧，看似简单，其实也不是那么好做的。关键是要铺得均匀铺得平整，要是中间密周围稀，或者周围密中间秃顶，那想得到很好的实验结果就很难了！
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1
收集细胞要混匀
消化后的细胞一定要充分混匀，要把聚在一起的细胞团充分地吹打开，最好是单个的状态， 但同时又不能损伤细胞，
离心转速一般 1000 rpm/min 即可。
离心力太大细胞容易抱团！
悬浮离心后的细胞团时，一般先加 2mL 液体，然后使用移液枪吸取 1mL 轻轻吹打细胞。切记不要把所有液体都加进去！
2
接种细胞须小心
铺 6 孔板，12 孔板或 24 孔板，先在每个孔里加入 1mL 的培养基，晃动使之铺匀整个孔底， 然后加入 1 mL 的细胞悬液。
从孔的左边靠近底部慢慢加入，这样细胞悬液会平铺在整个孔底，细胞分散较均匀，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。
放在显微镜的载物台上面。因为显微镜的载物台是水平校正过的，比什么桌面、超净台什么的要平多了。
在载物台上放置 20-30 分钟，细胞不差这一会温度和二氧化碳的，等细胞贴壁了， 轻轻移入到孵箱中
铺 96 孔板，每孔是加 100 ul细胞悬液，加完一半后，将剩余的的细胞悬液再次吹打混匀，继续加完剩余的部分，全部加完之后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度，敲三次即可，太大力或次数太多会导致细胞集中成堆。
3
轻轻敲打勿抱团
细胞悬液加完后，将细胞培养板抬高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。如果 有抱团的话，用手指从底部轻轻敲打，使之分散。
4
十字交叉要水平
上述步骤完成之后将细胞板放入培养箱，然后画“十字”，也就是细胞培养板贴着培养箱搁板，前后左右各晃动10次，即“十” 字形。
祝大家科研顺利！
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