1、直接抽样法（直接法）：直接法建立参考区间是目前推荐的首选方法，通过建立纳入、排除标准，采用人群直接抽样方 法，选取合格的参考个体，进行标本检测以建立参考区间。
2、间接抽样法（间接法）：间接法建立参考区间指利用医疗机构既有的检验数据经过适宜的数据收集、数据清洗及选择正 确的统计方法而建立参考区间的方法。
1、参考个体选择
1.1来源 ：宜用于参考值检测的个体应涵盖各年龄组，不应集中在某一年龄段，按随机抽样方法选择参考个体，以保证参考人群代表性。
1.2排除标准：筛选参考个体时，应排除如疾病史、生活史等对结果有影响的因素；
1.3分组：根据所筛选参考个体的特征进行分组，最常用的方式是按性别或年龄分组。
2、参考标本分析前因素
2.1分析前准备内容：包括参考个体的状态、标本采集方式、标本的离心、处理与保存等方面。
2.2参考个体数量：以非参数方法估计参考区间，至少需要120例（剔除离群值后）。
2.3标本采集：应区分是动脉血、静脉血还是毛细血管血等。
3、参考值数据的检测和统计分析
3.1检测系统的要求
a)对使用的检测系统的精密度、正确度、线性范围进行验证和评估；
b)实验室应开展室内质控，且结果在控；
c)实验室应参加室间质评，成绩合格；
d)采用配套系统时，校准品应有明确溯源；采用非配套系统时，应进行有效比对。
3.2统计分析
a)剔除离群值：若剔除离群值，则应补充参考个体，保证检测结果数量不少于120个。
b)参考区间分组：临床应用项目若认为亚组（如性别、年龄等）有临床意义，则需分组且每个亚组的样本量至少为120例。
c)估算参考区间：采用非参数法估计，即将数据从小到大排列，计算第2.5位百分位数和第97.5位百分位数的值，就是参考区间的下限和上限。
4、参考区间验证（小样本）
实验室在应用参考区间前，应从本地参考人群中筛选少量参考个体，进行验证。
4.1 验证方法 ：筛选合格的参考个体，每个分组至少20例（性别、年龄分布应均衡），按照本实验室操作程序检测标本。
4.2 结果判定：在参考区间之外的验证数据不超过10％为通过验证；若超过10％的，则另选至少20例合格参考个体，重新验证。若超过5个以上数据或另选20例合格参考个体中有超过3个数据仍位于参考区间外，则验证未通过。
4.3 如验证通过，则可引用该参考区间。
参考区间变更后，实验室应与临床科室保持密切联系，追踪变更后临床应用效果，及时发现、解决参考区间使用过程中遇到的问题。
文稿：朱松林
编辑：郑 凡
审核：聂 滨
