本期视频讲解了WB实验中出现条带连在一起的可能原因及其解决方案。
条带连在一起可能是由于以下几种原因造成的：
装置：浓缩胶与分离胶之间有缝隙，使各孔蛋白串在了一起；拔梳子操作不当，加样孔底部被破坏。
样本：蛋白上样量过高/上样体积比较大；样本离子浓度比较高，把蛋白往两边扩散。
电泳：上样与电泳之间的时间间隔太长，样本扩散；电泳的电压太高，发热比较严重导致胶溶扩散。
免疫/检测：抗体浓度比较大，曝光信号太强，导致信号有溢出；曝光时间太长。
针对这些问题，可以采取相应的解决措施：
确保凝胶湿润保存，避免胶被破坏；
拔梳子时不要左右摇动，平稳缓慢，垂直向上拔出；
降低上样量；
在电泳之前先低电压跑一段时间，把盐离子先跑出来；
尽量缩短时间间隔；
降低电压，或者冰水浴电泳；
降低抗体的浓度；
可以适当缩短曝光时间。
[视频版本]
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手把手教学｜Western Blot全流程实验步骤及常见问题详解
实验解析｜如何解决Western Blot中的高背景?
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