白色念珠菌荧光标记技术:使用iFAST实现精确的蛋白质定位与成像

学术   科学   2024-10-12 07:30   北京  

本文通过ChatGLM/GPT进行辅助对近期Bio-protocol 期刊发表的方案进行解读和概括,若感兴趣请点击“阅读原文”查看详细的实验流程及试材。如果解读中有任何错误或遗漏,敬请指正

2024年10月5日,Bio-protocol 期刊在线发表了比利时植物与微生物研究所(Institute of Botany and Microbiology)Patrick Van Dijck团队题为“Genetic Tagging and Imaging of Proteins with iFAST in Candida albicans”的方法文章。

https://doi.org/10.21769/BioProtoc.5082
关键词白色念珠菌 iFAST 荧光激活和吸收移位标签 可逆荧光 蛋白质标签 多色 荧光显微镜

白色念珠菌(Candida albicans)是一种能造成伺机性感染的酵母菌,常见于人类消化道与泌尿生殖道的菌群,约有四成至六成健康成人的口腔与消化道中都有白色念珠菌,平时与人体行片利共生,但可在人体免疫缺陷时过度生长而造成念珠菌症

白色念珠菌(Candida albicans)是一种重要的人类真菌病原体,广泛存在于人体的多种生态位中。作为一种条件致病菌,白色念珠菌在免疫系统受损的情况下可引起严重的感染,与高死亡率相关。尽管其重要性,这种真菌在分子和荧光工具方面的研究相对较少。白色念珠菌与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)密切相关,但其具有独特的密码子使用问题,主要是CUG密码子的异常翻译。这导致需要对其蛋白进行密码子优化以实现有效表达。尽管有密码子优化的尝试,但现有技术并非普遍适用。近年来,一些研究开始专注于为白色念珠菌优化荧光蛋白(FPs),以促进其在细胞生物学研究中的应用。特别是,iFAST系统的引入为在缺氧环境下实现可逆荧光标记提供了新的可能性,为研究这种复杂真菌提供了更灵活的工具


  • 文章介绍了使用改进的荧光激活和吸收位移标签(iFAST)在白色念珠菌中的遗传整合和蛋白质标记方法,这是一种创新的荧光标记技术。

  • 使用iFAST标记,能够在细胞内精确成像和定位目标蛋白质,有助于深入理解蛋白质在白色念珠菌中的功能和动态。

  • iFAST系统的一个重要特性是其荧光可逆性,使得研究者可以在实验中灵活调控荧光信号,适应不同的实验条件。

  • 病原体研究
    iFAST系统可以用于研究白色念珠菌等病原体在宿主体内的行为,例如感染过程、病原体扩散和与宿主细胞的相互作用,有助于更好地理解其致病机制。
  • 药物开发
    ‍通过标记关键的病原体蛋白质,iFAST技术可以用来筛选和评估抗真菌药物的效果,尤其是在低氧或无氧环境下的药物活性。
  • 基因表达和调控研究
    iFAST技术可用于观察和分析白色念珠菌中特定基因的表达和调控,尤其是在生理和病理状态下的基因表达变化。


这个方法的可重复性已经被本文作比利时植物与微生物研究所(Institute of Botany and Microbiology)Patrick Van Dijck团队验证过,相关实验数据与结果发表在Microbiology (Reading),DOI:10.1099/mic.0.001451

温馨提示:积极引用本文不仅是对作者创新技术和科研共享的最佳肯定,也是确保实验可复现性的重要方式。

Devos, J., Van Dijck, P. and Van Genechten, W. (2024). Genetic Tagging and Imaging of Proteins with iFAST in Candida albicans. Bio-protocol 14(19): e5082. DOI: 10.21769/BioProtoc.5082.

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