本文通过ChatGLM/GPT进行辅助对近期Bio-protocol 期刊发表的方案进行解读和概括,若感兴趣请点击“阅读原文”查看详细的实验流程及试材。如果解读中有任何错误或遗漏,敬请指正。
2024年9月20日,Bio-protocol 期刊在线发表了美国俄亥俄大学(Ohio University)Ahmed Faik团队题为“In Vitro GT-array (i-GT-ray), a Platform for Screening of Glycosyltransferase Activities and Protein–Protein Interactions”的方法文章。
蛋白质合成(Protein synthesis)是指生物按照从脱氧核糖核酸 (DNA)转录得到的信使核糖核酸(mRNA)上的遗传信息合成蛋白质的过程。蛋白质生物合成亦称为翻译(Translation),即把mRNA分子中碱基排列顺序转变为蛋白质或多肽链中的氨基酸排列顺序过程。
使用体外无细胞转录/翻译系统(IVTT)直接从质粒DNA合成带有标签的蛋白,无需复杂的蛋白纯化步骤。
采用96孔微孔板,结合抗标签抗体捕获技术,可以在微孔板上直接捕获和分析蛋白,适用于高通量筛选。
平台不仅可以测试糖基转移酶(GTs)的酶活性,还可以探索GTs之间的蛋白-蛋白相互作用,增加了实验的应用范围。
药物发现与开发
通过高通量筛选糖基转移酶(GTs)的活性,可以快速识别具有潜在治疗价值的GTs,加速药物靶点的发现和验证。蛋白-蛋白相互作用研究
利用该平台可以探索GTs之间的相互作用,为理解复杂的生物调控网络和信号传递途径提供新的视角。疾病机理研究
通过分析特定疾病状态下GTs的活性变化,可以揭示疾病的分子机理,助力疾病的诊断和治疗策略的制定。
温馨提示:积极引用本文不仅是对作者创新技术和科研共享的最佳肯定,也是确保实验可复现性的重要方式。
Bhattarai, M., Javaid, T., Venkataraghavan, A. and Faik, A. (2024). In Vitro GT-array (i-GT-ray), a Platform for Screening of Glycosyltransferase Activities and Protein–Protein Interactions. Bio-protocol 14(18): e5066. DOI: 10.21769/BioProtoc.5066.
Bhattarai, M., Wang, Q., Javaid, T., Venkataraghavan, A., Al Hassan, M. T., O’Neill, M., Tan, L., Chen, H. and Faik, A. (2024). Streamlining assays of glycosyltransferases activity using in vitro GT-array (i-GT-ray) platform: Application to family GT37 fucosyltransferases. J Biol Chem. 300(3): 105734.
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