在医学研究中,动物模型的建立往往是众多科研人员需要考虑的问题,动物模型的构建质量,关乎我们科研项目的开展是否顺利。高脂血症是代谢类疾病中最常见的一类,大多数由长期的高脂高热量的不规律饮食引起。
在饮食结构不断改变的今天,高脂血症对我国国民健康已造成严重的影响。据统计,我国约有9000万人患有高脂血症。因此,开展高脂血症的病理机制研究对于有效治疗、预防高脂血症及相关疾病十分重要[1]。本文着重介绍通过高脂饲料诱导构建高脂血症的方法。
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大鼠、小鼠、黄金地鼠、家兔、豚鼠等动物均可造模。若是用来筛选降脂药物,大、小鼠是首选,其具有动物价格低,抗病性强等优点;若是研究脂蛋白代谢,可以选择家兔、豚鼠等脂蛋白代谢与人类代谢相似的动物[2-4]。
表1 常用高血脂哺乳动物模型比较
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饲料配置:78.8%基础饲料,10%蛋黄粉,10%猪油,1%食用级胆固醇,0.2%猪胆盐(胆酸盐)。基础饲料可通过市售获得,也可自行配制,配制比例为:25%玉米粉、25%麦片、25%面粉、10%豆粉、7%鱼粉、4%骨粉、2%酵母粉、1%食盐、1%维生素。先将猪油微微加热,融化成液体,加入蛋黄粉、胆固醇、猪胆盐搅拌均匀,再加入配制好的基础饲料中翻拌均匀,期间加入少量蒸馏水,使得饲料成型。
▲饲料配置(版权图片,请勿转载)
造模方法(以小鼠为例):模型组使用高脂饲料进行喂养。每周小鼠进行取血,取血前禁食不禁水12h,将血样4℃离心10min,3000r/min,取上层血清进行TC、TG、HDL-C、LDL-C测定,使用统计学软件进行统计分析,若正常组与模型组对比,P<0.05或P<0.01,则造模成功。
造模周数比对:在2021~2023年中国知网发布的使用高脂饲料诱导建模的60篇文章中,大多数研究人员造模4-8周即可成功建模,其中,4周的占比高达了33.3%。
模型特点:该模型造模成本较低,造模时间短,采样方便,操作比较简单,可以明显升高TC、TG、LDL-C指标,降低HDL-C指标。
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啮齿类动物使用高脂饲料喂养后,容易出现“厌食”,导致指标出现回落现象,进而模型构建不成功。可采取以下措施:
1、在造模过程中,需要每周采血检测血脂四水平的变化情况,由于在给药期间同样使用高脂饲料进行喂养,但喂养时间越长,动物出现厌食的概率越大,当监测的血脂四水平已经达到造模成功标准,即可进行后续给药,不需要等到特定周数;
2、高脂饲料配制后含水量较大,需要注意饲料变质(尤其夏季),这也是动物厌食的原因之一,当天饲料当天配制;
3、可以将饲料分成颗粒,80℃进行烘烤至干硬,适合啮齿类“磨牙”的喜好,提高动物食欲,维持模型指标。