CCK8（Cell Counting Kit-8）是日本同仁化学（DOJINDO）研发的细胞增殖检测试剂盒，其主要有效成分为四唑盐WST-8，化学名为2- (2-甲氧基-4-硝苯基) -3- (4-硝苯 基) -5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐，在活细胞中WST-8能被线粒体内的脱氢酶还原为水溶性的橙黄色甲臜染料，使用酶标仪测量450nm处的吸光度即可间接反映活细胞的数量。
CCK8实验主要应用于：细胞增殖速率比较、材料毒性评价、新药筛选、肿瘤药敏试验等。
细胞增殖实验广泛应用的另一种方法为MTT法，MTT法的原理与CCK8法类似，区别在于生成的甲臜水溶性差，需要另外的洗涤和加入有机溶剂溶解的过程，带来一定实验误差，但其价格比CCK8便宜。
1.通常使用96孔板进行CCK8细胞增殖实验，将细胞消化重悬为细胞悬液，根据文献或前期实验确定的种板浓度，对细胞悬液进行稀释后每孔加入100μL细胞悬液，设置培养基组每孔加入100μL完全培养基，每组设置3-6复孔，周围一圈孔原则上不应作为样品孔，每孔加入100μL的PBS。
2.将96孔板放入细胞培养箱，继续培养12-24h至细胞贴壁良好，吸出原培养基，实验组加入含不同浓度药物的培养基，空白组加入完全培养基，继续培养一定时间（24h、48h、72h），若仅检测细胞增殖速率则不需进行该步骤。
3. 直接加入10μL的CCK8溶液，或使用完全培养基配置含10%的CCK8溶液的培养基，将原培养基更换为含CCK8的培养基，继续培养约1-4h至出现明显橙黄色。
4.使用酶标仪测定450nm处的吸光度，记录数据。
各组的复孔数据剔除明显异常值后取平均值，按以下公式计算细胞存活率或细胞抑制率：
细胞存活率=[(As-Ab)/(Ac-Ab)]×100%；
细胞抑制率=[(Ac-As)/(Ac-Ab)]×100%；
As:实验组吸光度（含细胞、培养基、CCK-8溶液和药物溶液）；
Ac:对照组吸光度（含细胞、培养基、CCK-8溶液，不含药物）；
Ab:培养基吸光度（含培养基、CCK-8溶液，不含细胞、药物）。
