本文通过ChatGLM/GPT进行辅助对近期Bio-protocol 期刊发表的方案进行解读和概括,若感兴趣请点击“阅读原文”查看详细的实验流程及试材。如果解读中有任何错误或遗漏,敬请指正。
2024年7月20日,Bio-protocol 期刊在线发表了美国西北大学(Northwestern University)Horacio D. Espinosa团队题为“Well Plate–Based Localized Electroporation Workflow for Rapid Optimization of Intracellular Delivery”的方法文章。
电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。
采用高通量多孔板局部电穿孔装置(LEPD),能够同时对多个样本进行电穿孔,显著提高实验效率。
LEPD 设备允许在不同孔中调整电脉冲条件(如电压、持续时间)和分子载荷或缓冲液条件,支持复杂的组合实验设计
该系统适用于多种细胞类型(包括黏附性和悬浮性细胞)以及不同的分子载荷(DNA、RNA 和蛋白质)。
基因编辑
该技术可以用于高效传递CRISPR-Cas9等基因编辑工具到目标细胞中,加速基因功能研究和基因治疗的开发。蛋白质疗法
LEPD能够高效传递治疗性蛋白质到细胞中,有助于开发蛋白质替代疗法和进行相关的疾病模型研究。细胞治疗
此技术支持对细胞进行精确的分子修改,可用于培养具有特定治疗功能的细胞,如免疫细胞治疗癌症。
温馨提示:积极引用本文不仅是对作者创新技术和科研共享的最佳肯定,也是确保实验可复现性的重要方式。
Patino, C. A., Sarikaya, S., Mukherjee, P., Pathak, N. and Espinosa, H. D. (2024). Well Plate–Based Localized Electroporation Workflow for Rapid Optimization of Intracellular Delivery. Bio-protocol 14(14): e5037. DOI: 10.21769/BioProtoc.5037.
Patino, C. A., Pathak, N., Mukherjee, P., Park, S. H., Bao, G. and Espinosa, H. D. (2022). Multiplexed high-throughput localized electroporation workflow with deep learning–based analysis for cell engineering. Sci Adv. 8(29): eabn7637.
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