探索血常规检测的“秘密”

健康   2024-10-11 18:00   广东  

真空采血管中的血液标本是进行各种检测的基础。但是,如果血液标本储存不当,会直接影响血液标本的质量以及检测结果的准确性,从而对临床诊断和治疗产生不利影响。因此对于真空采血管标本的处理方式非常重要。其中,标本放置时间和温度是影响标本质量和检验结果的重要因素







血常规管



EDTA.K2管(血常规管)的附加剂为EDTA盐,即乙二胺四乙酸(EDTA,分子量292)及其二钾盐,是临床使用最为广泛的血液抗凝剂之一,国际血液学标准化委员会(ICSH)[1]1993年建议将EDTA.K2作为血常规检验的抗凝剂EDTA是一种氨基多羧基酸,可以有效地螯合血液标本中的钙离子(Ca2+),螯合物将钙反应位点移去,阻滞和终止内源性或外源性凝血过程,从而防止血液标本凝固。
血常规管主要用于临床血液一般检验项目,如血细胞分析(白细胞计数、红细胞计数、血小板计数等)、血细胞形态学检查、血液流变学检查及骨髓细胞学检验等。
临床血常规检验中,血液标本易受温度、放置时间等因素的影响而致检验结果出现偏差,进而影响疾病的诊断和治疗。因此,控制分析前影响因素,对于提高血常规检测质量及对疾病的诊治至关重要。








标准建议



血细胞分析(血常规)是临床应用最为广泛的一大类血液检验项目的统称,随着全自动血液细胞分析仪(血液分析仪)的普及,目前血细胞分析可检测血红蛋白(Hb)和红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)及白细胞分类计数、血小板计数(PLT)、网织红细胞计数(RET)相关的30多项指标。
国际血液学标准化委员会(ICSH)关于血细胞分析的检测指南[1,2]中建议,血细胞分析标本的采集应使用 EDTA 抗凝剂,EDTA.K2 抗凝血液是自动细胞计数的首选标本。血液样本应在采集后的4~8小时内处理,用荧光流式细胞仪计数与红细胞相关的特异性标记血小板,建议EDTA抗凝静脉血标本应在抽血后4小时内进行测量;抗凝血样本应在采集后4小时内制备血涂片,时间过长可引起中性粒细胞和单核细胞的形态学改变[3]
《临床血液与体液检验基本技术标准》(WS/T 806-2022)[4]同样也提到,血细胞分析标本的采集应使用 EDTA 抗凝剂,对于 EDTA 依赖性假性血小板减少症患者的标本采集实验室应制定相应程序。血细胞分析的临床标本宜在采集后 8 h 内完成检测。《全国临床检验操作规程》[5]建议在进行血小板计数时,应在标本采集后1小时内完成检测。








文献研究



血液标本的存储时间和温度的不同会对检测结果造成影响,为保证检测结果的准确性,应在采血后及时送检。国内外已有较多文献研究报道血液标本放置时间较长可导致血细胞形态发生变化,且放置时间与血液细胞形态变化呈正相关,与临床实验室检测结果的准确性呈负相关[6,7,8]
研究显示 [9]室温(25℃),超过4小时后,红细胞压积(MCV)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)会因血液标本存储时间的增加而升高,可能是因血细胞处于高渗状态导致渗透压增加;在血液与低渗稀释液混合后红细胞水分会流失,导致平均红细胞体积(MCV)增加,而红细胞体积增高后,红细胞平均血红蛋白浓度也会随之增加。室温放置24小时对血小板影响最大,血小板具有不稳定性,容易受保存时间和保存温度的影响,可能是血小板本身具有凝聚特征,形成较大的颗粒,在灵敏的自动化血液分析仪中只能鉴别出细胞大小,忽略了细胞的性质,导致血小板在不同保存时间和温度下差异较大。
因此,应确保临床采集的全血标本及时送检,尽可能在3小时内完成检验,并注意全程避免接触可使标本温度升高的热源。同时对于未能及时送检的标本应及时放置于4℃ 环境下保存,并在24小时内尽快检测。

一项发表于2020年的研究[10]对不同存放温度下的血样品进行了评估。研究发现,在室温下存放4小时后,白细胞计数和血红蛋白浓度均有显著下降,而在4℃冷藏条件下存放24小时,这些参数相对稳定。同样地,根据国际血液学标准化委员会的建议和后续审查,CBC 和 WBC 计数自动分类计数在4℃下稳定至少 24 h,甚至到 72 h,有显著差异可能与自动血细胞分析仪的类型有关[11]。Gunawardena等[12]采用Sysmex XS-500i(Sysmax)血细胞分析仪测量发现,在CBC 参数中,白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、平均细胞血红蛋白 (MCH)、中性粒细胞和淋巴细胞在所有三个温度(4℃、10℃、23℃)下都稳定长达 48 h,除了血小板计数(PLT)应在采集后 6 h内进行。

因此,建议所有处理大量血液学标本的实验室提前确定好不同检测指标对于样本保存时间和温度的影响,同时应考虑仪器检测条件的影响,以将误差降至最低。









总结



血常规的结果作为许多疾病的参考指标,获得精确的血常规检测结果有助于医生对疾病的诊断。全血标本质量是血常规检测的关键,临床检验标本保存时间和温度会对全血标本检测产生明显影响,应确保临床采集的全血标本及时送检,尽可能在室温2小时内完成检验,并注意全程避免接触可使标本温度升高的热源。对于未能及时送检的标本应及时放置于4℃ 环境下保存,并在24h内尽快检测。对于保存时间需延长的标本,检测结果应充分考虑时间和温度因素的影响,从而为相关疾病早期筛查、诊断和治疗提供真实可靠的依据。



参考文献

[1] ICSH guidelines for the evaluation of blood cell analysers including those used for differential leucocyte and reticulocyte counting[J]. International Journal of Laboratory Hematology, 2014.

[2] Counting I C F S. Platelet counting by the RBC/platelet ratio method. A reference method.[J]. American Journal of Clinical Pathology, 2001(3):460-464.

[3] Palmer L,Briggs C, Mcfadden S, et al. ICSH recommendations for the standardization of nomenclature and grading of peripheral blood cell morphological features[J]. International Journal of Laboratory Hematology, 2015,37(3):287-303.

[4] 中华人民共和国国家卫生健康委员会.临床血液与体液检验基本技术标准.WS/T 806-2022.

[5] 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会医政医管局.全国临床检验操作规程(第四版).北京:人民卫生出版社,2015.

[6] 李雪杰,法琼. 血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的应用研究[J]. 现代医学与健康研究,2019,3(1):104-105.

[7] Kayadibi H, Acar IA, Cam S. Stability of complete blood count parameters depends on the storage temperature,storage time,transport position and selected stability criterion. Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation 2020: 1–9.

[8] Cadamuro J, Lippi G, von Meyer A, et al. European survey on preanalytical sample handling - Part 1: How do European laboratories monitor the preanalytical phase? On behalf of the European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine (EFLM) Working Group for the Preanalytical Phase (WG-PRE). Biochem Med (Zagreb).2019;29(2):020704.

[9] 孔超. 全血标本保存时间的温度对血常规检测结果的影响[J]. 中国农村卫生,2021,13(22):30,32.

[10] Chakraborty, S., Mohammed, R., Vaswani, M., & Prasad, R. (2020). "A comparative study of blood sample storage for complete blood count parameters using two commercially available hematology analyzers". Indian Journal of Pathology and Microbiology, 63(3), 405-410.

[11] Unalli OS, Ozarda Y. Stability of hematological analytes during 48 hours storage at three temperatures using Cell-Dyn hematology analyzer. J Med Biochem. 2021 Jun 5;40(3):252-260.

[12] Gunawardena D, Jayaweera S, Madhubhashini G, Lokumarakkala DD, Senanayake SJ. Reliability of Parameters of Complete Blood Count With Different Storage Conditions. J Clin Lab Anal. 2017;31(2): e22042. 

关于血常规管标本检测的小知识,你都学会了吗?

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医学拾萃 | 2021年2月刊:采血管的适用检测项目与不适用症——EDTA抗凝管

EDTA.K2管和EDTA.K3管的区别



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