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有机合成中经常会遇到微量样品的分离，通常情况下，对于少于100毫克的样品的纯化，有以下几种纯化方法：1、直接高效液相制备色谱(Prep-HPLC)纯化；2、制备薄层色谱(Prep-TLC, 俗称爬大板，【新手如何爬大板？制备薄层色谱纯化操作流程】)；3、微量样品重结晶（如何重结晶？大量样品和少量样品一样操作吗？）；4、微量柱层析法。微量柱层析法，相对于上述方法，更加经济绿色，而且操作方便，通常十几分钟就可以完成，相对于爬大板，不用浸泡硅胶，避免产生一些不必要的杂质。对于一些极性不是很大的产物，如果产物没有紫外吸收，可以优先考虑此方法。但是没有柱子怎么柱层析呢？实验室中唾手可得的玻璃滴管就可以用于微量柱层析。具体的操作可以参考往期文章【柱层析技术详解】，操作流程类似。![]()
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塞入少量棉花，用木棒压实，不要太紧，只需要防止硅胶漏下就可以。![]()
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装入硅胶，在桌面上轻轻地敲一敲，将硅胶压实，上方留4-5cm，用于上样和加洗脱剂。![]()
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和过大柱子类似，先用滴管在滴管柱上方加入小极性溶剂，通过不断加入溶剂，可以靠重力让柱子润湿。如果嫌慢，直接用乳胶头加压，但是一定要注意，挤压后千万不要松开，压完后拔下乳胶头再松开，否则会把硅胶和溶剂吸起来。当溶剂开始滴下时，完成润柱，但是一定要保持上方的溶剂不要干。
与平时过大柱子类似，也分为湿法上样和干法上样，具体选哪种要根据样品的性质决定，如果产物极性较大而且溶解度好，可以考虑湿法上样。但是小编建议用干法，因为本来柱子就短，湿法上样会影响部分柱效，会导致分离效果不佳。
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根据TLC, 选择合适的溶剂配比【柱层析技术详解】, 不断加入溶剂洗脱，利用乳胶头加压，溶剂液面保持在硅胶上方，不要压干。还是要注意挤压乳胶头后不要松开，拔下再松开。由于柱子很小可以方便的根据分离难度，调节溶剂梯度。
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及时更换容器，接收不同洗脱液，由于量很少小编建议用试管接收比较好，通过TLC或者LCMS确定所需产物。科罗拉多大学博尔德分校化学和生物化学系，有机化学实验课。
能爬大板的样品一般是有紫外吸收的化合物，这样可以准确判断产物的准确位置并取得较好的纯化效果。没有紫外吸收的化合物也可以爬大板，但是得到产物的纯度全靠运气了！建议使用微量柱层析纯化【25mg的样品如何柱层析？】。无紫外吸收的样品可以参照以下方法盲刮，我们将制备板的一侧进行部分显色，活用玻璃刀将TLC板分割下小部分，通过部分的显色情况，来反推整块板的显色情况，所以相对的对板的展开效果的要求比较高，如果爬的色带不规则，那很难得到纯的产物。
其实不用切割下来，也可以显色，利用滴管在板边缘涂显色剂，然后显色，效果也可以。
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