导言
细胞成像技术是揭示细胞结构与功能的重要工具,在生命科学研究和药物开发中具有广泛应用。
为了推广这一先进技术,Bio-protocol 推出了《细胞成像实验方案合集》。该合集精选了2021至2023年间Bio-protocol期刊发布的一系列高实用性的细胞成像实验方案。每篇方案都提供了详细的逐步实验流程,列明所需试剂和设备,并配有图文说明,部分方案还附有实验操作视频。
本期小Bio将为大家简要介绍合集中的所有文章,读者还可以通过在线的“Q&A”模块直接向作者提问。精选集文章索引
● Preparation of Whole-mount Mouse Islets on Vascular Extracellular Matrix for Live Islet Cell Microscopy
在血管细胞外基质上制备整体小鼠胰,用于活体胰岛细胞显微镜观察
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4868
作者:Kung-Hsien Ho、Guoqiang Gu、Irina Kaverina
● Correlative Conventional and Super-resolution Photoactivated Localization Microscopy (PALM) Imaging to Characterize Chromatin Structure and Dynamics in Live Mammalian Cells
相关常规和超分辨率光激活定位显微镜 (PALM) 成像来表征活哺乳动物细胞的染色质结构和动力学
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4850
作者:Dushyant Mehra、Elias M. Puchner
● Protein Level Quantification Across Fluorescence-based Platforms
跨荧光平台的蛋白质水平定量
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4834
作者:Hector Romero、Annika Schmidt、M. Cristina Cardoso
● Intravital Imaging of Intestinal Intraepithelial Lymphocytes
肠上皮内淋巴细胞的活体成像
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4720
作者:Sara McArdle、Goo-Young Seo、Mitchell Kronenberg、Zbigniew Mikulski
● Optogenetic Induction of Pyroptosis, Necroptosis, and Apoptosis in Mammalian Cell Lines
光遗传学诱导哺乳动物细胞株的细胞焦亡、细胞坏死性凋亡和细胞凋亡
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4762
作者:Kateryna Shkarina、Petr Broz
● Visualizing Loss of Plasma Membrane Lipid Asymmetry Using Annexin V Staining
使用Annexin V染色可视化质膜脂质不对称性的丧失
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4754
作者:Julia F. Baum、Huriye D. Uzun、Thomas Günther Pomorski
● Quantifying Single and Dual Channel Live Imaging Data: Kymograph Analysis of Organelle Motility in Neurons
量化单通道和双通道实时成像数据: 神经元中细胞器运动的Kymograph分析
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4675
作者:Laura Digilio、Lloyd P. McMahon、Alois Duston、Chan Choo Yap、Bettina Winckler
● Dual-Color Live Imaging of Adult Muscle Stem Cells in the Embryonic Tissues of Drosophila melanogaster
果蝇胚胎组织成体肌肉干细胞的双色实时成像
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4605
作者:Monika Zmojdzian、Binoj Dhanarajan、Krzysztof Jagla、Rajaguru Aradhya
● Measuring Intracellular H2O2 in Intact Human Cells Using the Genetically Encoded Fluorescent Sensor HyPer7
使用基因编码荧光传感器 HyPer7 测量完整人体细胞中的双氧水水平
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4538
作者:Lianne J. H. C. Jacobs、Michaela N. Hoehne、Jan Riemer
● Visualization, Quantification, and Modeling of Endogenous RNA Polymerase II Phosphorylation at a Single-copy Gene in Living Cells
活细胞中单拷贝基因内源性 RNA 聚合酶 II 磷酸化的可视化、量化和建模
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4482
作者:Linda S. Forero-Quintero、William Raymond、Brian Munsky、Timothy J. Stasevich
● Patterned Substrate of Mobile and Immobile Ligands to Probe EphA2 Receptor Clustering
用于探测 EphA2 受体聚类的移动和固定配体的图案化底物
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4434
作者:Zhongwen Chen、Kabir H. Biswas、Jay T. Groves
● CRISPR/Cas9 Gene Editing of HeLa Cells to Tag Proteins with mNeonGreen
mNeonGreen对 HeLa 细胞进行 CRISPR/Cas9 基因编辑以标记蛋白质
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4415
作者:Sachin Surve、Alexander Sorkin
● Single Molecule Tracking Nanoscopy Extended to Two Colors with MTT2col for the Analysis of Cell-Cell Interactions in Leukemia
使用 MTT2col 将单分子跟踪纳米显微镜扩展到两种颜色,用于分析白血病中的细胞-细胞相互作用
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4390
作者:Loriane Maillot、Magali Irla、Arnauld Sergé
● Activation of Mitochondrial Ca2+ Oscillation and Mitophagy Induction by Femtosecond Laser Photostimulation
飞秒激光光刺激激活线粒体 Ca2+ 振荡和线粒体自噬诱导
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4369
作者:Xiaoying Tian、Hao He
● High-speed Atomic Force Microscopy Observation of Internal Structure Movements in Living Mycoplasma
活体支原体内部结构运动的高速原子力显微镜观察
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4344
作者:Kohei Kobayashi、Noriyuki Kodera、Makoto Miyata
● Laser Microirradiation and Real-time Recruitment Assays Using an Engineered Biosensor
利用工程生物传感器的激光微照射和实时招募分析
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4337
作者:Carolina dos Santos Passos、Robert E. Cohen、Tingting Yao
● Spherical Invasion Assay: A Novel Method to Measure Invasion of Cancer Cells
球形侵袭测定:一种测量癌细胞侵袭的新方法
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4320
作者:Stephen D. Richbart、Justin C. Merritt、Emily G. Moles、Kathleen C. Brown、Adeoluwa A. Adeluola、Paul T. Finch、Joshua A. Hess、Maria T. Tirona、Sarah L. Miles、Monica A. Valentovic、Piyali Dasgupta
● An Alternative Technique for Monitoring the Live Interaction of Monocytes and Tumor Cells with Nanoparticles in the Mouse Lung
一种监测小鼠肺中单核细胞和肿瘤细胞与纳米颗粒实时相互作用的替代技术
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4293
作者:Fernanda Ramos-Gomes、Nathalia Ferreira、Frauke Alves、M. Andrea Markus
● A Multi-color Bicistronic Biosensor to Compare the Translation Dynamics of Different Open Reading Frames at Single-molecule Resolution in Live Cells
一种多色双顺反子生物传感器比较活细胞中不同开放阅读框在单分子分辨率下的翻译动力学
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4096
作者:Amanda L. Koch、Tatsuya Morisaki、Timothy J. Stasevich
● Monitoring Changes in the Oxidizing Milieu in the Endoplasmic Reticulum of Mammalian Cells Using HyPerER
利用HyPerER监测哺乳动物细胞内质网氧化环境的变化
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4076
作者:Julia Birk、Beata Lizak、Christian Appenzeller-Herzog、Alex Odermatt
● Building a Total Internal Reflection Microscope (TIRF) with Active Stabilization (Feedback SMLM)
建立一个主动稳定的全内反射显微镜(TIRF)
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4074
作者:Simao Coelho、Jongho Baek、J. Justin Gooding、Katharina Gaus
● Retention Using Selective Hooks (RUSH) Cargo Sorting Assay for Live-cell Vesicle Tracking in the Secretory Pathway Using HeLa Cells
用RUSH蛋白分选法追踪HeLa细胞分泌通路中的活细胞囊泡
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3958
作者:Mehrshad Pakdel、Natalia Pacheco-Fernandez、Julia von Blume
● Generation and Implementation of Reporter BHK-21 Cells for Live Imaging of Flavivirus Infection
黄病毒感染活体显像报告细胞BHK-21的制备与实施
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3942
作者:Jorge L. Arias-Arias、Rodrigo Mora-Rodríguez
● Carboxyfluorescein Dye Uptake to Measure Connexin-mediated Hemichannel Activity in Cultured Cells
用羧荧光素染料上染率测定培养细胞中连接蛋白介导的半通道活性
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3901
作者:Joe A. Potter、Gareth W. Price、Chelsy L. Cliff、Bethany M. Williams、Claire E. Hills、Paul E. Squires
● Imaging of Human Cancer Cells in 3D Collagen Matrices
人类癌细胞的3D胶原基质成像
链接:https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3889
作者:Karin Pfisterer、Brooke Lumicisi、Maddy Parsons
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关于Bio-protocol
Bio-protocol 于2011年在斯坦福大学创建,旨在提高科研的可重复性,以助力科学发现。它与 eLife、Science/AAAS等国际知名出版机构合作,致力于提升实验方案的透明度和共享。Bio-protocol是 Bio-protocol 旗下一份同行评审的国际学术期刊,专注于发表高质量的生命科学实验方案。至今,已发表来自全球两万多名科研工作者的近5000 篇文章。该期刊已被PubMed Central、Web of Science 等国际权威数据库收录,是全球为数不多的拥有影响因子的生物学实验方案期刊之一。Bio-101 是Bio-protocol旗下一个中文生命科学实验方案的共享平台,通过与上百个国内优秀科研团队的合作,已出版了多本同行评审、免费获取的中文实验方案电子书。