首页时事民生政务教育文化科技财富体娱健康情感

旅行百科职场楼市企业乐活学术汽车时尚创业美食幽默美体文摘

【衡道丨干货】病理技术——胸腹水取样及制片要点

学术 2024-12-26 19:00 广东

浆膜腔积液包括胸腔积液、腹腔积液和心包积液，其形成的原因很多，包括低蛋白血症、充血性心力衰竭、病毒感染、结核、肝硬化及恶性肿瘤等，不同原因导致的浆膜腔积液颜色、性状及细胞含量也各有不同。

图1：左1为血性标本，左2为清亮细胞含量少的样本，右1为细胞含量多的样本；

浆膜腔积液送检的主要目的是判断良恶性，查找有无癌细胞。临床上胸腔积液及腹腔积液多见，简称胸腹水，精准取样及好的制片染色是准确诊断的前提，一份样本需要用四种制片染色方法，包括传统手工涂片HE染色、液基细胞学制片HE染色、手工涂片MGG染色及细胞沉渣包埋蜡块4种。

现将胸腹水样本的每一步制作要点总结如下。

一、手工涂片HE染色方法

1、当天收到的胸腹水标本放在4度冰箱过夜，首先可防止细胞退变，再者细胞沉降于底部有利于收集更多细胞成分；

图2：底部沉淀物（白膜层，黄色箭头）

2、用吸管轻柔、缓慢旋转吸取细胞较多的底部沉淀物50ml，分次移入50ml离心管，平衡后以1600g/min 离心 10 min；

图3：吸取底部沉淀物50ml，分次移入离心管

3、吸管吸弃上清液至分层处；

图4：轻柔、旋转多点吸取白膜层（黄色箭头），避免过深、过浅或用力多度

4、用吸管轻柔、多点吸取分层处的白膜层（白膜层细胞含量最多，若有肿瘤细胞也主要集中在白膜层）样本约0.5ml，滴至玻片上，用拉片法动作轻柔且均匀的涂片2 张，一张在潮干的情况下轻置于 95%乙醇与冰乙酸混合液中固定后续做HE染色，另一张自然干燥后续做瑞氏-吉姆萨特殊染色（MGG染色）。

5、自动染色机染色：HE染色程序，乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白，但核蛋白沉淀后能溶于水，所以经95%乙醇固定的涂片，染色前不必经过水洗。

注意事项：

①离心后上清液尽可能吸干净避免细胞稀释，涂片后易引起掉片和收缩；

②细胞含量少的样本一次离心无法涂片，需多次离心收集更多细胞成分；

③血液多的样本离心后注意吸取白膜层，避免吸管过深吸取过多红细胞。

二、液基制片方法及HE染色

1、剩余样本加细胞保存液10ml，平衡后以1600g/min 再次离心10min，为制作液基片做准备；

2、弃去上清液，根据细胞量加入1-5ml缓冲液混匀（血性样本只混匀白膜层，因目标细胞主要集中在白膜层），静置沉降10min后倒掉上清液，用缓冲液；

3、将黏附载玻片置于制片仓中（需要加过滤网），用吸管将白膜及缓冲液混匀物移入制片仓中，静置10-15min，倒掉上清液后取出黏附片用缓冲液冲洗掉表面未附着细胞成分，将黏附片置于95%酒精中固定5-10min；

4、自动染色机染色：HE染色程序（黏附片着色快，HE染色时间较涂片染色时间更短，若涂片及液基片同时染色则后者染色过深，不易诊断）

三、MGG制片及染色方法：

MGG制片方法同手工涂片，染色前需完全干燥后再进行染色，该方法的优势是单片单独染色，可避免交叉污染，因HE染液在缸中重复使用，偶而可见癌细胞污染，同时染MGG染色可排除是否为污染。

四、细胞蜡块制作

1、将做完液基的离心管再次加入液体，平衡后以1600g/min 离心 10 min；

2、弃去上清，加入95%酒精5-10ML，平衡后以1600g/min 离心 10 min；

3、弃去上清，将50ML离心管倒置，静置2-3小时，如为血性标本，不可倒置，立放静置即可；再用包埋纸将凝固细胞包埋，放置福尔马林液中，上脱水机按组织标本走流程即可。

4、细胞蜡块包埋时，用切片刀将细胞组织纵切，90度翻转包埋，镜下可以看到包埋细胞全层。

五、总结几种技术制片方法的优缺点：

1. 传统手工涂片：

成本低、操作简单，但操作不当时容易产生人工假象和细胞形态的破坏，且存在杂质干扰、检测的细胞数量不足等。

2. 液基细胞学制片：

能及时保存和固定标本，最大限度去除粘液、杂质，细胞数量丰富，能大大提高阳性检出率，是目前较为推荐的检测方法。

3.手工涂片MGG染色：

单独滴染，排除污染可能。

4. 细胞蜡块制片：

当肿瘤细胞丰富时，可制成细胞蜡块，进一步进行免疫细胞染色及分子病理检测等。

本文转载自大兴病理，作者卞亚伟

转载仅作观点分享，版权归最初的原作者所有

部分图片来源于网络，如有侵犯版权，请及时联系小衡

扫码添加微信，发送“病理技术”

邀您加入病理技术交流群

衡道精选

设计：鹏飞

编辑：小约翰

本公众号发布所有原创内容，版权均属衡道医学病理诊断中心及相关版权方所有，内容仅供学术交流，如有侵权请联系删除。未经授权的转载是侵权行为，版权方保留追究法律责任的权利。投稿、转载或版权疑议，请联系：tougao@histo.cn；商务合作请联系：info@histo.cn。

衡道病理官网：www.histo.cn

喜欢就奖励小衡一个“看一看”和“👍”吧~

精准诊断呵护生命 — 衡道病理旗下的官方医学新媒体。提供一站式病理医学学习交流平台，传播精彩课程、分享精彩案例、促进人文交流、推动行业发展。

最新文章

【衡道丨病例】病理诊断——子宫腺肉瘤

【衡道丨干货】病理技术——胸腹水取样及制片要点

【衡道丨病例】后肾腺瘤（Metanephric Adenoma）如何诊断？

【衡道丨课程】“病理规培考试串讲课程”更新——肺疾病~（可试看）

【衡道丨科普】“病理诊断小知识”科普系列视频第十三期：上皮样

【衡道丨推荐】病理学中级351考试书上线

【衡道丨病例】病理诊断——钙化性腱膜纤维瘤

【衡道丨科普】一文读懂《乳腺癌病理报告》

【衡道丨病例】轻松学病理——牙源性钙化上皮瘤

【衡道丨直播】T-MN骨髓病例分享

【衡道丨干货】病理基础——浆膜腔脱落细胞学

【衡道丨札记】我TCT的真实阅片经历——从无核到有核

【衡道丨文献】肺神经内分泌肿瘤分类更新及研究进展

【衡道丨推荐】病理初/中级考试，题型介绍

【衡道丨病例】病理诊断——肾脏后肾腺瘤

【衡道丨科普】一种罕见的肿瘤类型——胸腺肿瘤

【衡道丨病例】病理诊断——乳腺转移性子宫内膜间质肉瘤1例

【衡道丨课程】“病理规培考试串讲课程”更新——皮肤、食管和胃肠道、肝胆胰~（可试看）

【衡道丨干货】2024版CSCO神经内分泌肿瘤指南更新

【衡道丨直播】18F-FDG PET/CT在淋巴瘤诊治中的应用

【衡道丨直播】12月16日8:30 王朝夫教授谈：软组织/骨小细胞肿瘤疑难病例病理诊断经验分享（文末附病例判读）

【衡道丨病例】结肠颗粒细胞瘤

【衡道丨病例】前列腺腺泡腺癌（Prostatic acinar adenocarcinoma）如何诊断？

【衡道丨推荐】近期8本病理新书，欢迎选购~

【衡道丨课程】朱雄增教授「淋巴造血组织中易误诊为淋巴瘤的反应性病变体系化课程」重磅推出！第一讲上线

【衡道丨课程】“病理规培考试串讲课程”更新~（可试看）

【衡道丨干货】病理基础——胃印戒细胞癌

【衡道丨推荐】病理初/中级考试报名，今天截止~

【衡道丨文献】放疗后子宫内膜浆液样改变VS.浆液性子宫内膜上皮内癌

【衡道丨直播】弥漫大B细胞淋巴瘤分子分型和临床治疗进展

【衡道丨病例】病理诊断——罕见膀胱纤维上皮性息肉1例

【衡道丨科普】一句话记住一种病——胚胎性癌

【衡道丨病例】“动态”中的乳腺导管内乳头状肿瘤的病理学特征观察（下）

【衡道丨推荐】病理初/中级考试报名，12/9截止~

【衡道丨科普】胃黏膜：肠化→萎缩性胃炎→低级别上皮内瘤变，看这篇就够了！

【衡道丨课程】“病理规培考试串讲课程”更新~（可试看）

【衡道丨会议】12月病理相关学术会议汇总

【衡道丨科普】一文读懂《阴道镜下活检病理报告》

【衡道丨科普】消化管组织学

【衡道丨直播】一例头颈颌面部少见肿瘤的临床病理讨论及文献分享

【衡道丨病例】病理诊断——乳腺硬化性腺病

【衡道丨推荐】病理初/中级考试报名，12/9截止~

【衡道丨病例】朗格汉斯细胞肉瘤（Langerhans cell sarcoma,LCS）如何诊断？

【衡道丨课程】“病理规培考试串讲课程”——软组织系统更新完毕~

【衡道丨病例】病理诊断——肾上腺穿刺活检诊断血管内大B细胞淋巴瘤1例

【衡道丨会议】11月29日～12月1日，衡道医学与您相约2024年江西省医学会病理学分会第四十九次学术年会

【衡道丨病例】病理诊断——冰冻诊断为印戒细胞癌的输卵管腺瘤样瘤

【衡道丨推荐】重磅新书推荐：实用免疫组化病理诊断（第2版），欢迎选购~

【衡道丨病例】病理诊断——由肝穿刺病例带来的诊断思考

【衡道丨直播】鼻咽癌分期进展、影像解剖与放射治疗

分类

原创标签

时事社会财经军事教育体育科技汽车科学房产搞笑综艺明星音乐动漫游戏时尚健康旅游美食生活摄影宠物职场育儿情感小说曲艺文化历史三农文学娱乐电影视频图片新闻宗教电视剧纪录片广告创意壁纸头像心灵鸡汤星座命理教育培训艺术文化金融财经健康医疗美妆时尚餐饮美食母婴育儿社会新闻工业农业时事政治星座占卜幽默笑话独立短篇连载作品文化历史科技互联网

发布位置

广东北京山东江苏河南浙江山西福建河北上海四川陕西湖南安徽湖北内蒙古江西云南广西甘肃辽宁黑龙江贵州新疆重庆吉林天津海南青海宁夏西藏香港澳门台湾美国加拿大澳大利亚日本新加坡英国西班牙新西兰韩国泰国法国德国意大利缅甸菲律宾马来西亚越南荷兰柬埔寨俄罗斯巴西智利卢森堡芬兰瑞典比利时瑞士土耳其斐济挪威朝鲜尼日利亚阿根廷匈牙利爱尔兰印度老挝葡萄牙乌克兰印度尼西亚哈萨克斯坦塔吉克斯坦希腊南非蒙古奥地利肯尼亚加纳丹麦津巴布韦埃及坦桑尼亚捷克阿联酋安哥拉