妊娠对于女性而言是一个重要且具有挑战的过程。据统计，中国每年有上千万女性经历妊娠。然而，并非所有孕妇都能正常度过十月怀胎并产下健康婴儿，很多孕妇在妊娠过程中患各种疾病，如：妊娠期高血压、子痫前期、妊娠期糖尿病等。这些疾病会引起孕妇多种组织器官的功能障碍，最终导致不良妊娠结局，严重时甚至导致孕妇或胎儿死亡。据全球分析估计，每 10 万名活产婴儿中，约有 216 名母亲和 1800 名新生儿死于妊娠相关疾病。因此，了解正常妊娠过程孕妇多种组织器官经历的改变是揭示妊娠期疾病发生机制，及从根源上提升母婴健康水平的重要前提。
为孕育子宫中的胚胎/胎儿，孕妇体内多种组织器官都会发生适应性改变，例如：孕妇会经历心脏重塑、肝脏增大等，然而，孕妇多组织器官在分子层面的具体改变以及组织器官之间的互作如何维持妊娠（妊娠适应）仍不清楚。
由于伦理限制，我们不可能使用孕妇的组织器官来研究这一重要科学问题。非人灵长类猴在生理、生殖特征和妊娠周期方面与人类高度相似，是研究灵长类母体多组织器官妊娠适应的最理想动物模型。代谢组直接与表型相关联，可反映机体的生理或病理状态，代谢组学是研究灵长类母体多组织器官妊娠适应的强有力技术手段。
2024 年 2 月 1 日，北京干细胞与再生医学研究院/中国科学院动物研究所黄仕强团队、王红梅团队、李伟团队和重庆医科大学附属妇女儿童医院漆洪波团队在 Cell 期刊在线发表了题为“A multi-tissue metabolome atlas of primate pregnancy”的文章。该研究构建了食蟹猴 23 种组织器官共 273 个样本在非妊娠期以及妊娠不同时期的代谢组图谱，揭示了食蟹猴妊娠期多种组织器官代谢网络的动态演变、代谢通路适应和关键的适应性代谢物。
DOI:https://doi.org/10.1016/j.cell.2023.11.043
为系统了解灵长类妊娠期间母体多种组织器官的代谢适应，研究团队利用液相色谱-质谱（Liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS）技术分析了非妊娠期（Non-pregnancy, NP）、妊娠早期（Early-pregnancy, EP）、妊娠中期（Mid-pregnancy, MP）和妊娠晚期（Late-pregnancy, LP）食蟹猴 23 种组织器官共 273 个样本的非靶向代谢组，发现每种组织器官代谢组在非妊娠期和妊娠不同时期拥有独特的变化模式。
本研究分组和样本收集设计图
为探究灵长类妊娠期间多种组织器官之间代谢组相关性变化，研究团队分别对非妊娠期、妊娠早期、中期和晚期的 23 种组织器官代谢组数据进行了相关性分析。结果发现不同时期多种组织器官之间代谢组相关性呈现动态演变，且与非妊娠状态相比，23 种组织器官之间的代谢组相关性随妊娠进展而降低，到妊娠晚期尤为显著。接下来，研究团队利用代谢集富集分析（Metabolite set enrichment analysis, MSEA）鉴定了 8 个在妊娠期多种组织器官都发生显著改变的核心代谢通路，包括类固醇生成、谷氨酸代谢、酪氨酸代谢、嘌呤代谢、卟啉代谢、胆汁酸生物合成、嘧啶代谢和花生四烯酸代谢。
进一步利用差异倍数（Fold change，FC）分析发现与 EP 相比，每种组织器官在 MP 和 LP 时都有超过 3000 种以上的差异代谢物（FC≥1.5）被检测到，而 23 种组织器官共享的差异代谢物有 91 种。以上结果表明妊娠期间灵长类母体经历了巨大的代谢扰乱和挑战，多种组织器官都发生了代谢重编程。
研究团队进一步研究了关键差异代谢物在组织器官的细胞生长或分化中的潜在功能。鉴于皮质酮对应激状态的重要性以及妊娠期其水平在胎盘里持续上调，研究团队利用人类胎盘滋养层细胞模型探究了皮质酮对胎盘细胞分化和功能的潜在影响。结果发现皮质酮能够诱导人胎盘滋养层干细胞（Human trophoblast stem cells, hTSCs）向绒毛外滋养层细胞（Extravillous trophoblasts, EVTs）分化和促进合体滋养层（Syncytiotrophoblasts, STBs）分泌人绒毛膜促性腺激素（Human chorionic gonadotropin, hCG），表明妊娠期胎盘中持续上调的皮质酮可能对胎盘生长、发育和功能有重要调控作用。
鉴于棕榈酰肉碱在免疫调节中的作用及其在妊娠早中期胰腺、肝脏、心脏和骨骼肌中水平增加，研究团队通过诱导人类胚胎干细胞（Human embryonic stem cells, hESCs）分化获得的胰腺祖细胞（Pancreatic progenitor cells, PPCs）、肝脏祖细胞（Liver progenitor cells, LPCs）、心肌细胞（Cardiomyocytes, CMs）和肌肉细胞（Myocyte cells, MCs）模型探究了棕榈酰肉碱对上述细胞命运决定的作用。结果发现棕榈酰肉碱促进上述细胞的分化或成熟，表明妊娠期间母体胰腺、肝脏、心脏和腓肠肌中棕榈酰肉碱水平的增加可能在调节组织器官的细胞分化、成熟与再生方面发挥重要功能。以上发现为深入探究差异代谢物对人类妊娠期间母体重要组织器官的适应性变化及其调控机制提供了重要实验证据。
为验证食蟹猴代谢组数据对人类的潜在可译性，研究团队将妊娠食蟹猴血液代谢组数据与公开的人类孕妇血液代谢组数据进行了比较，结果发现妊娠期间人类孕妇血液上调或下调的大多数代谢物在妊娠食蟹猴血液数据里呈现类似的变化趋势。研究团队进一步收集了正常妊娠和子痫前期孕妇血液样品，通过 LC-MS 定量检测了其血清皮质酮水平，发现与正常妊娠孕妇相比，子痫前期患者血清皮质酮水平显著降低。研究团队利用皮质酮抑制剂处理人类胎盘滋养层细胞，发现皮质酮抑制剂显著增加了 hTSCs、EVTs 和 STBs 中 TNF-α 和 IL-8 的表达，表明妊娠期皮质酮缺乏可能引起子痫前期患者胎盘出现滋养层炎症反应。以上发现初步证实了本研究所获得的食蟹猴代谢组数据具有重要的临床应用价值。
综上所述，本研究以食蟹猴非妊娠期和妊娠早期、中期、晚期 23 种组织器官为研究对象，利用代谢组学技术揭示了灵长类妊娠期间多种组织器官的代谢网络动态演变，及共享的关键差异代谢通路和代谢物。进一步利用人类胎盘滋养层细胞、胰腺祖细胞、肝脏祖细胞、心肌细胞和肌肉细胞验证了差异代谢物的潜在重要功能，并在人类正常妊娠孕妇与子痫前期患者血液中初步验证了食蟹猴代谢组数据的临床潜在应用价值，为更好地了解灵长类母体如何适应妊娠带来的代谢挑战奠定了重要基础。
本研究整体思路概括图
北京干细胞与再生医学研究院/中国科学院动物研究所黄仕强研究员、王红梅研究员、李伟研究员和重庆医科大学附属妇女儿童医院漆洪波教授为本文共同通讯作者。中国科学院动物研究所博士后余带男、助理研究员万海峰、重庆医科大学附属第一医院童超研究员、中国科学院动物研究所博士研究生广璐、博士后陈岗、博士研究生苏佳丽为本文共同第一作者。
编辑： 刘智清
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