背景资料
根据世界卫生组织部公布的全球十大致死病因中,心血管疾病常年居于首位。因此,降低心血管疾病的产生及风险干预是当前医学研究的重要课题之一。
而在心血管中的内皮细胞具有充当血液和周围组织之间的屏障、调节血管功能、控制血管舒张和收缩、抑制白细胞和血小板粘附防止血液凝固、释放血管活性物质等重要血管生物学功能。
利用内皮细胞开发诊断工具,进行早期检测内皮稳态紊乱或干预措施,在心血管疾病的治疗方面是一个重要的发展方向。
原代细胞是是指从机体取出后立即培养的细胞。通常把离体培养第1代至10代以内的细胞称为原代细胞,正常组织来源的原代细胞通常可以在体外培养条件下生长和分裂,但经过有限次的细胞传代后,就会停止增殖并死亡,限制了细胞培养技术的进一步应用。
利用细胞永生化技术,可以通过基因变化或者外界各种刺激因素,使细胞在体外培养的过程中,避免正常细胞的衰老死亡过程,从而实现长期传代培养、无限分裂增殖,进而提升原代细胞的利用次数和实用价值。
B 淋巴瘤莫洛尼鼠白细胞病毒(Mo-MLV)插入位点1(BMI-1)是一个转录抑制因子,在1991年被首次报道,隶属于PcG蛋白家族,在细胞增殖和多种肿瘤干细胞自我更新、分化调节中发挥重要作用。
在多项研究中发现,BMI-1与人类多种肿瘤的发生、发展密切相关,例如乳腺癌、胃癌、宫颈癌、膀胱癌、大肠癌等。
BMI-1通常在癌症中具有高表达的特性,而在正常组织细胞或良性病变组织中呈现低表达或不表达的特点,并且与患者预后不良呈一定的相关性,这一特性使得BMI-1成为癌症预后评测指标的数据参考,并且具有患者疾病早期诊断的临床医学意义。
ATCC特推出人永生化肺动脉内皮细胞。
新产品的诞生
人永生化肺动脉内皮细胞(HPAEC-BMI1)是利用 B 淋巴瘤莫洛尼鼠白细胞病毒(Mo-MLV)插入位点1(BMI-1)永生化的原代人类肺内皮细胞。
该细胞系可用于研究心血管疾病、肺动脉高压的发病机制,或发现和开发抗血管生成或促进血管生成的化合物。
产品信息
ATCC货号 | CRL-4065 |
生物体 | 人体 |
组织/疾病 来源 | 肺动脉,正常 |
产品描述 | HPAEC-BMI1是通过在原代肺动脉内皮细胞中稳定表达人BMI1基因而永生化的克隆细胞系。这些细胞保留了重要的内皮细胞特征和功能,如表达CD31/PECAM-1,摄取乙酰化低密度脂蛋白(AcLDL),并在基底膜基质上形成毛细血管样管。 |
产品应用 | 可用于心血管疾病研究、血管生成研究、药物筛选和毒理学测试。 |
实验数据
细胞微观形态
图1:HPAEC-BMI1的细胞形态。细胞在ATCC推荐的培养条件下培养。在显微镜下观察低(左)和高(右)密度的细胞形态,并用数码相机拍摄图像。倍增时间:约30小时
CD31表达
图2:HPAEC-BMI1细胞中CD31表达的流式细胞术分析。收获细胞并用PE小鼠抗人CD31抗体(红色直方图)或PE小鼠IgG1,κ同种型对照抗体(蓝色直方图)染色。在Beckman Coulter CytoFlex细胞仪上进行流式细胞术。
乙酰化低密度脂蛋白(AcLDL)的提取实验
图3:HPAEC-BMI1细胞对AcLDL的摄取。细胞在四孔室载玻片上培养,并与Alexa Fluor 488 AcLDL一起孵育4小时。之后,用培养基洗涤细胞,然后在培养基中,在GFP荧光和透射光下使用EVOS荧光显微镜观察和拍照。不含Alexa Fluor 488 AcLDL的培养基中的细胞用作空白对照
舒尼替尼对毛细血管样管形成的影响
图4:舒尼替尼抑制HPAEC-BMI1细胞毛细血管样管的形成。血管形成测定在24孔板中进行。将在含有0、0.5、1.0、2.0和5.0 μM舒尼替尼(Sigma,#PZ0012)的培养基中的细胞接种到基底膜基质上(细胞基底膜;ATCC ACS-3035™)。在37°C下孵育24小时后,使用EVOS荧光显微镜在透射光下观察并拍摄毛细管状管。
舒尼替尼对细胞迁移的影响
图5:舒尼替尼抑制HPAEC-BMI1细胞的迁移。细胞在12孔板中生长至完全融合,然后用无菌的1200μL移液管尖端将细胞层划伤。将含有0、0.5、1.0、2.0和5.0 μM舒尼替尼的培养基加入孔中。在透射光下使用EVOS荧光显微镜在0、17和24小时观察和拍摄孔间隙。
结合永生化技术及BMI-1蛋白特点,这些永生化细胞是人类内皮微血管细胞不断再生的来源,可以作为原代人肺内皮细胞的替代物用于许多研究。
该细胞产品具体可用于研究心血管疾病、肺动脉高压的发病机制,或发现和开发抗血管生成或促进血管生成的化合物,可进一步助力您的科学研究顺利进行!
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