1、磁珠该怎么保存和运输？
a.2-8℃冷藏保存
通常冷藏柜或冰箱内温度并不均匀，尤其夏天更明显；部分冰箱开启自动除霜功能，冰箱壁和箱体中部的温度也会有显著差异。
磁珠试剂瓶放置于冰箱2-8℃保存时，要注意试剂瓶不能贴壁，避免冰箱启用除霜功能时造成悬液结冰失效。磁珠试剂瓶宜置于冰箱中部，避免靠壁。
b.避免长时间室温放置
长时间常温放置也会影响磁珠的回收性能，因此磁珠用完后请及时放回4℃，特别是一些免疫蛋白或链霉亲和素修饰的磁珠。
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c.避光保存
一些磁珠需要避光保存，如修饰有荧光基团的磁珠。
d.避紫外线
室温平衡时应避免阳光直射，以防紫外线损伤；使用中也应避免紫外光照。
推荐冷链2-8℃运输。小包装产品用泡沫盒子加冰袋也能短时间运输，但冰袋和磁珠试剂瓶/管之间需用传热性能低的泡沫或塑料隔开，避免装磁珠的试剂瓶/管直接接触冰袋。
2、磁珠冷冻后会发生什么？
a.磁珠团聚易沉降
冷冻、干燥和离心都会引起磁珠团聚而无法再分散，导致磁珠性能失效。
b.结构破坏，性能失效
过低的温度(如-20℃)会破坏磁珠结构及表面修饰，影响磁珠抓取效率。
ⅰ.纯化磁珠DNA回收效率低，回收特异性下降，回收得到的DNA杂质多。
ⅱ.oligdt磁珠失去效能，不再特异性抓取mRNA，建库得到的文库为总RNA文库。
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ⅲ.链霉亲和素磁珠失去效能，杂交捕获洗脱得到的文库捕获效率及低，文库浓度偏高。
3、免疫磁珠在使用过程中出现聚集或挂壁情况的原因？
a.正常情况
免疫／链霉亲和素磁珠具有带负电荷的表面，磁珠在低pH的洗脱缓冲液中发生聚集属于正常现象，不影响磁珠的正常使用。
b.非正常情况
ⅰ.可能是由于β-巯基乙醇、DTT、pH差值大等因素，影响磁珠的均一性，使得磁珠粘稠，导致聚集成块或出现挂壁的现象。
ⅰ.在Binding buffer和Elution buffer中添加终浓度为0.1%(v/v)的非离子型去垢剂（如NP-40、Tween-20或Triton X-100）可有效防止磁珠聚集。
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ⅱ.经过低pH操作的磁珠可以用结合缓冲液洗涤至中性，然后用含有0.1%(v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振荡重悬磁珠。
ⅱ.磁珠pH值异常
磁珠的pH值可能会因为受到酸碱性物质的影响而发生变化，导致结块。在使用磁珠时，要注意保持合适的pH值。
ⅲ.离心过久
在洗涤步骤中，磁珠离心时间过久，可能导致磁珠颗粒间的结合力增强，形成结块。磁珠在磁场中放置太久也会使磁珠牢固的结合在一起。
图片来源：12孔磁力架（1.5/2.0ml）--性能参数，报价/价格，图片_生物器材网
4、如何解决磁珠易粘附管壁的现象？
粘性可能是由于磁珠之间或磁珠与管壁之间的静电相互作用造成的。通常，建议使用低吸附率的耗材进行磁珠操作。
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另外，建议在进行实验之前，用诸如Tween 20去污剂的非离子去污剂洗涤磁珠。这种处理可以降低磁珠的静电电势。
通常只需将Tween 20去污剂加入到磁珠中，最终浓度可达到0.1%，然后在不含去污剂的缓冲液中重悬并洗涤磁珠，就可以减少或消除这个问题。可能需要在Tween 20溶液中孵育，例如在室温下滚动孵育 5-10分钟。
在缓冲液中添加0.01%～0.1%(v/v)的非离子型去垢剂（如NP-40、Tween-20或TritonX-100）也可以有效降低磁珠对耗材的粘附。
5、磁珠可以吸附ssDNA和RNA吗？
不管双链DNA、单链DNA，还是RNA，都可以在溶液中解离出带负电的磷酸基团，因此都可以用磁珠进行纯化回收，但单链DNA和RNA都没办法进行片段大小筛选。
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参考资料
［1］磁珠的保存法，磁珠的保存条件。磁珠使用注意事项。- 知乎中科科优
［2］5min了解DNA磁珠的前世今生（含结果分析及FAQ解读）-翌圣生物
［3］磁珠在保存、运输及使用前的建议-博兰鹰
［4］磁珠常见问题及对策-化工仪器网-手机版
［5］磁珠回收DNA和片段筛选 - 知乎秉聿随记
［6］干货分享|磁珠常见问题与解决方案-翌圣生物
［7］Dynabeads磁珠核酸纯化支持——问题排查 | Thermo Fisher Scientific - CN
［8］磁珠法核酸提取过程中的6种常见误区-分析测试百科网
文章来源于分子庄园，作者木子庄主
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