穿刺针穿刺活检术包括抽吸活检（FNAB）和取芯活检（CNB），抽吸活检术使用粗针抽吸取材，对于骨髓源性肿瘤、转移癌或者细胞成分丰富的肿瘤活检。抽吸可以确定病变是实质性、脓性还是血性，抽吸物可以通过血涂片镜检观察细菌，也可进行细胞学检查。取芯活检术是从套管针内深入肿瘤取材，能得到较大块实质组织进行活检，可做病理学检查，以确病变的性质及组织的类型。
临床医生进行骨髓穿刺取样的主要指征就是全血细胞计数持续出现异常。常见的异常包括中性粒细胞减少症、不良和非再生性贫血、血小板减少症、血小板增多症、循环原始细胞和具有非典型形态的成熟细胞。需要特别注意的是，白血病可能是隐匿的，尽管几乎没有循环原始细胞，但仍有明显的骨髓浸润。因此，对于怀疑有骨髓恶性肿瘤的患病动物应进行骨髓穿刺取样做诊断检测。不论是否进行骨髓穿刺取样检查，但是都强烈建议进行全血细胞计数和外周血血涂片检查。全面的诊断检查对于排除骨髓外病变的原因至关重要。
适应症 ：
当患病动物的病史和检测结果支持此级别的诊断检查时，很少存在不可以进行骨髓取样的情况。当采样部位存在感染或者肿瘤时，需要谨慎。原发性凝血病（例如，血小板减少症、血小板病变）不是进行骨髓穿刺或活检的禁忌症。然而，临床医生应采取一切预防措施，以避免出现医源性损伤。继发性凝血疾病最好在骨髓样本采集前得到有效处理。
①活检针 有几种可重复使用或者一次性的骨髓穿刺抽吸针及取芯活检针可供选择（如下图）。可重复使用的针，通常由医用钢制成，还可以重新磨锐。一次性穿刺针有一个钢套管、一个塑料管心针手柄和注射器接口。在猫科医学中常用的骨髓抽吸针是伊利诺斯胸骨/髂骨型（图一），奥斯古德针和罗森塔尔针（图二）。
图1 (a)伊利诺斯胸骨/髂骨型穿刺抽吸针。 （b）单个组件（逆时针从左起）：针、帽、管心针和可调深度保护器
猫最适合使用 13~19 G 针头，主要取决于采样部位和患病动物的体型。伊利诺斯胸骨/髂骨型抽吸针具有可调节深度保护装置，可以精确控制穿刺深度。一个锋利的针很容易穿透骨头，并且旋盖可将其牢牢固定到位。这些针都可以和鲁尔滑和鲁尔锁注射器兼容。奥斯古德针极细且规格小，这使得它们对猫特别有用。罗森塔尔针头可重复使用，并且具有大线轴型母鲁尔帽和尖锐的套管。合适的管芯针也有匹配的斜面点。
图2 (a) 罗森塔尔穿刺抽吸针（b） 单个组件：管芯针（左）和针（右）
图3(a) 贾姆西迪活检针 （b）单个组件（左起） ：针、帽、尖端保护套、管芯针和骨髓排出针。
预定的采样位置需要剃毛和无菌消毒。不论在什么情况下，作者更倾向于在剃毛前先做镇静。由于完整的骨内膜神经支配，患病动物在做骨髓抽吸时会感觉到不舒适。全身麻醉和局部麻醉并不能消除这种不适感。然而，建议进行超前多模式镇痛，使用 1~2% 利多卡因进行局部麻醉，可提供对皮肤、皮下组织和骨膜的短暂镇痛。虽然有些患病动物需要全身麻醉，但大多数患病动物只需要深度镇静。应以患病动物为中心而选择制定方案。建议做气管插管，既可以保护和确保气道通畅。术后48~72小时需要做疼痛管理，这样更适宜。
采样点通常6~15cm，需要做好术前准备。临床兽医应该带无菌手套，无菌创巾，这样有利于保持操作区域处于无菌状态。使用11号或者15号手术刀片在预定采样部位的皮肤上做一切口。 活检针应通过移除管心针，并用少量 5–10% EDTA 预充溶液冲洗。然后将管芯针放回取芯活检针中。收集注射器中应留有大约 0.05~0.2 ml 的预充液。
（通过无菌方式做骨髓采样的先决条件。①环境：骨髓取样可以不用在无菌手术室进行。通常需要在洁净房间中进行，并同时戴上无菌手套。兽医可以不需要穿手术衣、手术帽子、口罩和无菌鞋套，除非患病动物动物患有严重的中性粒细胞减少症。②耗材清单：活检针、无菌手套、无菌创巾、无菌皮下针和脊髓针<用于胸骨或者肋软骨连接处取样>、11或者15号无菌刀片、5%~10%EDTA预充液、EDTA管、镇静剂、吸水纸、1~2%利多卡因、3ml无菌注射器、20~22无菌皮下注射针、12ml无菌注射器、显微镜载玻片、显微镜、福尔马林和合适的容器（用于取芯活检）
四、穿刺定位
图4 （a/b）穿刺点定位在大结节和肱骨头之间的扁平区域
胸骨：胸骨相对较柔软，很容易被活检针穿透。胸骨取样多用于狗，猫也可以用。患病动物可以采取腹背位、侧卧位，头轻轻伸展，颈部背屈。穿刺针应轻轻插入胸骨柄或第二胸骨。进针的方向根据临床医生的喜好而定。记住：骨髓核心样本不能从此处取样。 肋软骨连接处： 与胸骨类似，肋软骨处也较柔软，容易进针。同样此部位采样主要用于犬，猫也可以用。患病动物侧卧，活检针沿肋骨长轴向背内侧插入连接处。
扁骨—肋骨和颅骨的造血功能非常活跃。但是比较可惜的是从这些部位穿刺采样并不现实。在猫上，常用的解剖替代部位是肱骨近端大结节处（图四）、髂脊（图五和图六）、股骨转子窝（图七）。偶尔可以从胸骨和肋软骨连接处抽吸骨髓。采样位置最终要取决于几个因素：包括患病动物的体型、临床医生的偏好和基于证据的研究统计数据。无论解剖位置如何，获取骨髓抽吸物的一般流程都是相同的。将穿刺针刺入预切口，顺时针和逆时针用力缓慢旋转抽吸针推进至骨膜。作者建议将抽吸针近端牢牢贴在手掌或者第一指掌关节处，以稳定抽吸针。此外，用拇指、食指和中指的指尖尽可能远地握住抽吸针，这样可以获得最大的稳定性和控制力。当抽吸针正确地放置在骨髓腔内时，由于其位置安全，不需要再握住它。一旦抽吸针正确的放置在所需的解剖位置上，临床医生应移除管心针并连接含有 0.05–0.2ml 预充溶液的收集注射器。然后，可以通过对收集注射器的柱塞施加一至三次短时间负压抽吸，以排出骨髓颗粒，再将柱塞保持在最大吸入量以吸入骨髓。不建议对注射器柱塞施加过多的负压，因为这会加热注射器筒并促进凝血。骨髓颗粒吸出后，并立即排出到含有预充溶液的培养皿中。
采集的骨髓体积不应超过0.4-0.5ml。如果初始没有收集到骨髓，需要更换针筒，并将针向前推进，重复抽吸。抽吸针不应该在管芯针不到位的情况下而插入。如果三次都没有采集到样本，建议换一个点做穿刺。或者，如果针嵌入太深，应逐渐退出，同时轻轻旋转针并保持收集注射器柱塞呈负压状态。
抽吸的内容物轻轻排出到培养皿中，以寻找骨髓针状颗粒。它们通常呈颗粒状或微小的闪闪发光的斑点。脂肪球的存在验证了样本来自骨髓。采集后应立即涂片镜检。（每次在做骨髓穿刺检测时，强烈建议同事做全血细胞计数和外周血涂片）
取芯活检针向前穿过预定的切口，位于近端皮质，类似于骨髓抽吸。正如前面所述，正确地插入针，但并不需要保持在合适的位置。针固定好后，取出管芯针，尽可能的顺时针和逆时针旋转活检针进入组织。取出套管，旋转1~2mm，再做微调，重新推进。此操作过程重复两到三次，以便将组织样本完全隔离在套管内。一旦活检针完全拔出，应使用活检探针以逆行方式挤出标本。
（核心的样本的整体外观：皮质骨为白色，骨髓是红色。红系增生可能会产生深红色外观。当骨髓有髓样或者淋巴样白血病浸润时，通常呈白色。发育不良的骨髓呈白色或者粉红色）
至少0.5cm长的未碎的岩心样本被认为是最适合组织病理学评估的样本质量。当骨髓抽吸无效时，骨髓核可以卷到显微镜载玻片上以进行细胞学制备。骨髓核心样本应先放入10%福尔马林中固定，然后再送往兽医检测实验室，由委员会认证的兽医临床病理学家进行评估。
骨髓涂片的制备：使用微毛细管或小移液管，将抽吸样品中的几个骨髓针状物转移到载玻片上。多余的血液需要用吸水纸擦掉。然后第二张载玻片使用压片法轻轻地进行制备涂片。作者建议至少制备8张涂片用于评估。其中一张涂片染色，用于确定取样的充分性。足够的样本应该还有几个骨髓针状体，并且骨髓成分应充分分散在载玻片上，以便对单个细胞进行详细评估。颗粒内的脂肪含量随着年龄不同而有所变化，老年患病动物比幼年患病动物要多。制备的剩余载玻片不需要染色，提交给由委员会认证的兽医临床病理学家进行判读评估。
七、样本的类型和采样位置的选择
作者建议常规获取的骨髓样本既要做细胞学检查又要做病理组织学检查，因为每种样本都会提供独特的信息。细胞学检查提供了骨髓细胞的极好的形态学细节（下图10），组织病理学样本的检查可以很好地评估组织间质变化，包括骨髓纤维化、炎症和肿瘤。
理想情况下，一个部位来获取核芯活检和另一个部位以获得细胞学样本。然而，如果仅使用一个部位采集样本，则应在骨髓抽吸后再收集骨髓核心活检，以防止抽吸样本被血液稀释。注意骨髓取芯活检不能从胸骨和肋软骨连接处采集。
Defarges 等人对14只健康猫的胸骨骨髓抽吸术进行了评估，结果表明：虽然该技术安全且易于实施，但是与从髂骨收集的样品相比，样品的质量较低。在同一组的另一项研究中，对 10 只健康猫进行了骨髓核心活检，采样部位是左肱骨头，使用 13G的Jamshidi 型针从左髂嵴采集样本，并使用 15G的EZ-io 骨内输注系统采集样本。15G和13G样品之间没有显著差异。然而，经评估，15G针采集肱骨活检样本比 13 G针的髂骨活检样本更容易获得。作者还研究了用15G针从患有血液系统疾病的猫的肱骨头中采集的骨髓活检样本。他们发现该操作程序具有良好的耐受性，并且结果有助于促进造血系统疾病的诊断。
八、总结
骨髓检查是检查猫各种血液病的必要程序。获取高质量的病理检查样本是十分重要的，同样，选择使用正确的临床技术对于获得准确的诊断和预后信息至关重要。从骨髓抽吸和活组织检查中获得的信息也使得临床兽医能够合乎逻辑且恰当地为患病动物提供医疗干预措施。
（潜在并发症：骨髓取样的相关并发症是罕见的。偶尔会在取样部位发生轻度至中度的切口周围红或形成血肿；甚至对有血小板减少症的猫，过度出血也是不常见的。取样部位可能出现炎症和感染，包括骨髓炎，但很少发生。如果活检针在粗隆窝的位置不正确，可能会损伤坐骨神经；同样，局部麻醉剂浸润粗隆窝后可能出现一过性坐骨神经麻痹；对于幼年患病动物，其肱骨和股骨的骨骺板可能会受损；从胸骨和肋软骨交界处采集骨髓有发生气胸的危险；后者也可能与肋间血管撕裂有关。虽然非常罕见，但核心活检针可能会断裂，在组织中留下针的组成部分。骨折的风险通常较低，但如果活检针不适合患者的大小或疾病损害了皮质完整性，则可能发生骨折。）
