一、标准流程概述和目标
(一)收集并分析患病动物的骨髓样本可提供大量诊断和预后信息。
①诊断对治疗无效的血细胞减少症、全血细胞减少症或血细胞计数明显升高的原因
②通过镜检组织胞浆菌、利什曼原虫、胞质线虫等。
③检测隐匿性肿瘤
④不明原因的发热
⑤评估体内“铁"的 储备
(二)这些信息可用于指导兽医和客户采取适当的治疗方案
(一)操作前后应彻底洗手和消毒。
(二)使用适合环境的个人防护设备。
(三)骨髓取芯活检,大多数犬可12~13G Jamshidi骨髓活检针,小型犬可以用14G。
(四)电动剃毛刀
(五)手术刀片
(六)手术擦洗液(碘伏或氯己定)和酒精
(七)2% 利多卡因,1ml
(八)一次性5ml注射器
(九)无菌EDTA溶液
(十)培养皿
(十一)无菌外科手套
(十二)载玻片
(十三)10%福尔马林固定液
(十四)保存活检组织用的:包埋盒
(十五)无菌创巾
(一)术前准备
①动物禁食:所有患病动物在手术前均需禁食12至18小时。
②麻醉前不使用任何药物
③安装静脉留置针:静脉输液,等渗电解质溶液(LRS或0.9%NaCl),速率:维持剂量的两倍。
(二)穿刺点触诊定位
① 犬的髂背脊
②犬/猫股骨大转子内侧的转子窝
③犬/猫肱骨头的外侧
(三)穿刺点皮肤按照无菌消毒的标准操作流程
(四)局部麻醉
①犬:将1ml 2%利多卡因浸润针头插入部位的皮肤、皮下组织和骨膜。
②猫:将0.5ml 2% 利多卡因浸润针头插入部位的皮肤、皮下组织和骨膜。
(五)无菌操作准备骨髓穿刺针
①使用无菌注射器吸取1~2ml的EDTA抗凝剂
②从骨髓穿刺针上取下针芯并将其放置在无菌区
③将 1~1.5ml的EDTA溶液通过骨髓穿刺针冲洗到培养皿中,然后将针芯放回骨髓穿刺针中。
(六)在皮肤上做一个3mm左右的穿刺切口
(七)握住穿刺针,将穿刺针的背面压在手指和手掌的交界处
①将带有针芯的骨髓针穿过切口推进至骨膜水平
②继续顺时针和逆时针旋转,并施加恒定的压力,以推进抽吸针
③当穿透骨骼的皮质骨时,可以感觉到阻力明显减小
(八)取出针芯,并确保取出针芯后针头能够固定在位
(九)将装有EDTA溶液的注射器连接至抽吸针,并用力拉回柱塞以施加负压,从而抽吸骨髓液。为了避免骨髓样本被外周血稀释,应抽取少于 1ml 的骨髓。
(十)获得骨髓液后,将穿刺针留在原处,取下注射器并将骨髓内容物注入到含有EDTA的培养皿中。可以对样本进行大体检查,以查找骨髓颗粒(骨针),或者医助快速进行细胞学制备,以确认已获得骨髓。
(十一)成功采集样本后,旋转并轻轻牵引针头,取出穿刺针。
(十二)骨髓活检
①刺入骨皮质后,将针头再推进1-2cm。
②通过交替旋转和摇晃骨髓针来松动活检样本。
③拔出部分针头,将其重新定向到不同的角度,并将其推进到新的骨骼区域。
④再次,通过交替旋转和摆动针头来松开活检样本
⑤通过旋转和轻柔牵引取出活检针,并将活检样本放入活检组织包埋盒,再放入福尔马林液中做固定。
(十三)术后,患病动物需要做疼痛管理
(一)穿刺部位感染,这种情况很少见。
(二)肌肉、神经和潜在关节表面等软组织结构受到创伤
(三)手术部位出血
(四)术后疼痛
(五)规避措施:
①严格遵循无菌操作
②穿刺点做好标记,可以提前准备好骨骼标本,以便正确找到穿刺点,避免对周围组织造成意外创伤。
③直接对出血部位施压。骨髓出血不会造成问题,因为血液会被快速吸收。
六、禁忌症
(一)弥散性血管内凝血、
(二)接触抗凝血的老鼠药
(三)严重的肝功能衰竭
(四)严重贫血(镇静前输血)