导言
层析技术是一种用于分离和纯化混合物中不同成分的关键方法，它在科学研究和生物医药领域中扮演着核心角色。
为了推广这一重要技术，Bio-protocol 与 Cytiva 合作推出了《生物分子层析实验方法》电子合集。这本合集的内容从基础知识延伸到高阶应用，涵盖了蛋白质结构学、免疫学、神经科学等多个前沿领域，并汇总了来自顶级学术期刊的“独门秘籍”。我们期望这本合集能够成为促进层析技术学术研究和实践应用的重要资源。
在上一期内容中，我们讨论了“如何选择合适的层析技术，以实现最佳的纯化效果”。本期小Bio将继续为大家介绍这本手册，本文展示了手册中层析技术的文章，更多文章请到 bio-protocol.org 免费阅览及下载。电子合集的下载途径请见文末。《生物分子层析实验方法》电子合集封面
20篇文章汇总
文章单位索引：
● Co-sedimentation Assay for the Detection of Direct Binding to F-actin
通过共沉淀实验检测 F-Actin 的直接结合蛋白
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.270
作者：Wilson Wong、Jian-Guo Zhang、Jake Baum、Mireille H. Lahoud、Ken Shortman
● Determination of Hydrodynamic Radius of Proteins by Size Exclusion Chromatography
用尺寸排阻层析法测定蛋白质的流体动力学半径
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.2230
作者：Valentina La Verde、Paola Dominici、Alessandra Astegno
● Protein Expression and Purification of the Hsp90-Cdc37-Cdk4 Kinase Complex from Saccharomyces cerevisiae
Hsp90-Cdc37-Cdk4 激酶复合物在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中的表达和纯化
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.2563
作者：Kliment A. Verba、David A. Agard
● Guanine Nucleotide Exchange Assay Using Fluorescent MANT-GDP
用荧光 MANT-GDP 进行鸟嘌呤核苷酸交换实验
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.2795
作者：Tomoharu Kanie、Peter K. Jackson
● Heterologous Expression and Purification of the CRISPR-Cas12a/Cpf1 Protein
CRISPR-Cas12a/Cpf1 的异源表达和纯化
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.2842
作者：Prarthana Mohanraju、John van der Oost、Martin Jinek、Daan C. Swarts
● α-Synuclein Aggregation Monitored by Thioflavin T Fluorescence Assay
通过硫黄素T荧光检测法监测 α-突触核蛋白聚集
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.2941
作者：Michael M. Wördehoff、Wolfgang Hoyer
● Preparation of a Bacteriophage T4-based Prokaryotic-eukaryotic Hybrid Viral Vector for Delivery of Large Cargos of Genes and Proteins into Human Cells
制备可将大量基因和蛋白质送入人类细胞的基于噬菌体 T4 的原核-真核杂合病毒载体
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3573
作者：Jingen Zhu、Pan Tao、Marthandan Mahalingam、Venigalla B. Rao
● Preparation of Yeast tRNA Sample for NMR Spectroscopy
制备酵母tRNA 样本用于核磁共振波谱分析
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3646
作者：Marjorie Catala、Alexandre Gato、Carine Tisné、Pierre Barraud
● Karyopherin-β2 Inhibits and Reverses Aggregation and Liquid-liquid Phase Separation of the ALS/FTD-Associated Protein FUS
核转运蛋白(Karyopherin)-β2抑制并逆转 ALS/FTD 相关蛋白FUS 的聚集和液-液相分离
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3725
作者：Emma Robinson、James Shorter、Lin Guo
● RI-SEC-seq: Comprehensive Profiling of Nonvesicular Extracellular RNAs with Different Stabilities
RI-SEC-seq:对不同稳定性的非囊泡胞外 RNA 的综合分析法
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3918
作者：Juan Pablo Tosar、Fabiana Gámbaro、Mauricio Castellano、Alfonso Cayota
● Expression and Purification of the Human Cation-chloride Cotransporter KCC1 from HEK293F Cells for Structural Studies
用于结构研究的人类阳离子-氯化物共转运体KCC1 在HEK293F 细胞中的表达和纯化
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3966
作者：Si Liu、Jiangtao Guo
● FRET-based Microscopy Assay to Measure Activity of Membrane Amino Acid Transporters with Single-transporter Resolution
基于 FRET 的显微镜检测法，以单体转运蛋白的分辨率测定膜氨基酸转运体的活性
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.3970
作者：Didar Ciftci、Gerard H. M. Huysmans、Xiaoyu Wang、Changhao He、Daniel Terry、Zhou Zhou、Gabriel Fitzgerald、Scott C. Blanchard、Olga Boudker
● Identification of R-loop-forming Sequences in Drosophila melanogaster Embryos and Tissue Culture Cells Using DRIP-seq
通过 DRIP 测序鉴定黑腹果蝇胚胎和组织培养细胞中的 R环形成序列
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4011
作者：Célia Alecki、Nicole J. Francis
● Synchronized Real-time Measurement of Sec-mediated Protein Translocation
同步实时测量由 Sec 介导的蛋白质转位
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4129
作者：Riti Gupta、Dmitri Toptygin、Christian M. Kaiser
● Measurement of the Translational Diffusion Coefficient and Hydrodynamic Radius of Proteins by Dynamic Light Scattering
通过动态光散射法测量蛋白质的平移扩散系数和流体动力学半径
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4195
作者：Ernest T. Parker、Pete Lollar
● Heterologous Expression and High Degree Purification of the Restriction Endonuclease SauUSI
限制性内切酶 SauUSI 的异源表达和高度纯化
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4275
作者：Vinayak Sadasivam Tumuluri、Kayarat Saikrishnan
● Apoplastic Expression of CARD1-ecto Domain in Nicotiana benthamiana and Purification from the Apoplastic Fluids
在本氏烟草(Nicotiana benthamiana) 质外体中表达及提纯 CARD1 胞外结构域的方法
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4387
作者：Nobuaki Ishihama、Anuphon Laohavisit、Kaori Takizawa、Ken Shirasu
● Expression, Purification, and in vitro Enzyme Activity Assay of a Recombinant Aldehyde Dehydrogenase from Thermus thermophilus, using an Escherichia coli host
以大肠杆菌为宿主细胞的嗜热栖热菌重组醛脱氢酶的表达、纯化和体外酶活性测定
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4401
作者：Kim Shortall、Edmond Magner、Tewfik Soulimane
● Production and Crystallization of Nanobodies in Complex with the Receptor Binding Domain of the SARS-CoV-2 Spike Protein
SARS-CoV-2 刺突蛋白受体结合域与纳米抗体形成复合物的生成和结晶
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4406
作者：Audrey Le Bas、Halina Mikolajek、Jiandong Huo、Chelsea Norman、Joshua Dormon、James H. Naismith、Raymond J. Owens
● Preparation of Cas9 Ribonucleoproteins for Genome Editing
制备用于基因组编辑的 Cas9 核糖核蛋白
链接：https://doi.org/10.21769/BioProtoc.4420
作者：Sheng-Wei Lin、Viet Quoc Nguyen、Steven Lin
电子合集下载途径
如果您想要深入了解层析技术的种类选择和具体流程，请扫描下方二维码或点击“阅读原文”，免费下载查阅这本电子合集。该合集还涵盖了生物分子纯化策略、主流层析系统（ÄKTA）的详细介绍、汇集了Bio-protocol 期刊发布的层析实验方案中文版。我们期望这本合集能够成为您实验桌上的一本宝贵电子工具书，助力您的科研工作。
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