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文丨Lisa
编丨Lisa
发酵产物分离纯化常用的浓缩方法包括以下几种。
1. 蒸发浓缩:利用加热使发酵液中的水分汽化,从而提高产物的浓度。
优点:操作简单,设备成本相对较低,适用于多种发酵产物的浓缩,且能快速有效地提高产物浓度。
缺点:对于一些热敏性的发酵产物,高温可能会导致其变性失活;同时,蒸发过程需要消耗大量的能量,成本较高。例如,在浓缩一些对温度不太敏感的氨基酸发酵液时可以使用蒸发浓缩,但对于某些蛋白质类发酵产物则需谨慎使用。
2. 膜分离浓缩:
超滤:利用超滤膜的筛分作用,允许小分子物质如水分、无机盐等通过,而将大分子的发酵产物截留在膜的一侧,从而实现浓缩。
优点:可以在常温下进行操作,对发酵产物的活性影响较小;能够有效地去除发酵液中的杂质,提高产物的纯度;操作过程简单,易于自动化控制。
缺点:膜的成本较高,且容易受到污染,需要定期进行清洗和维护;对于一些分子量与目标产物相近的杂质,可能无法完全去除。
纳滤:其膜孔径介于超滤膜和反渗透膜之间,在压力作用下,允许一些小分子物质和单价离子通过,而对二价及以上的离子和分子量较大的发酵产物有较高的截留率,从而实现浓缩和分离。
优点:具有较好的浓缩效果,能够在较低的压力下进行操作,能耗相对较低;对热敏性物质的影响较小,可保持产物的活性。
缺点:纳滤膜的选择性相对较低,可能会有一些杂质与目标产物一起被截留;膜的使用寿命有限,需要定期更换。
3. 冷冻浓缩:将发酵液冷冻至冰点以下,使其中的水分形成冰晶,然后通过离心、过滤等方式将冰晶与浓缩液分离,从而达到浓缩的目的。
优点:适用于热敏性发酵产物的浓缩,因为在低温下操作可以最大程度地保持产物的活性;不会引入其他化学物质,对产物的纯度影响较小。
缺点:操作过程较为复杂,需要特殊的冷冻设备和分离设备,成本较高;浓缩倍数相对较低,可能需要多次操作才能达到所需的浓度。
4. 沉淀浓缩:通过加入沉淀剂使发酵产物或杂质沉淀,然后将沉淀物分离,从而实现发酵液的浓缩。例如,对于蛋白质类发酵产物,可以加入有机溶剂、盐类等沉淀剂,使蛋白质沉淀下来,然后去除上清液,达到浓缩的目的。
优点:操作简单,成本较低;可以同时实现产物的浓缩和初步纯化。
缺点:沉淀剂的选择需要根据发酵产物的性质进行,否则可能会影响产物的活性和纯度;沉淀过程可能会受到溶液pH值、温度等因素的影响,需要进行严格的控制。
5. 透析浓缩:利用半透膜的透析作用,将发酵液中的小分子物质如水分、无机盐等透析出去,而大分子的发酵产物则留在透析袋内,从而实现浓缩。
优点:操作简单,不需要特殊的设备;可以在常温下进行操作,对发酵产物的活性影响较小。
缺点:浓缩速度较慢,需要较长的时间才能达到所需的浓度;透析袋的成本较高,且容易破裂,需要小心操作。
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