电解质检测的影响因素分析
主要参考资料如下：
重要的生物标志物及它们的诊断价值见表8.1-2。
检测方法及影响因素：
直接法和间接法都可用于电解质的测定。在未稀释的血液、血浆或血清中可使用离子选择性电极(ISE)进行直接测量,而间接法(ISE和火焰光度法)可用于对稀释后的样品进行检测。火焰光度计可测定物质的浓度,而ISE测定离子活性。火焰光度计法”:原理为,在火焰中激发 Na+或K+时测量发射光的强度。光强度与原子数量成正比，而这些又与样品中相应离子的水平成正比。火焰光度计由雾化器、燃烧器和光电管组成。预稀释的标本在仪器中蒸发并分配到燃烧器中,燃烧器的火焰由丙烷或乙炔气体和压缩气体燃烧产生。在炽热的非发光火焰中,Na+ 发出特异性光谱。将待测的特异性钠元素波长通过单色器筛选并导入光电倍增管。这个过程会产生一个电信号,通过将其放大后控制读取单元。该单元显示的发射光强度与样品的Na+浓度成正比。
有些火焰光度计依据内标法原理工作。首先使用含锂溶液对校准品、对照品和患者样品进行稀释;然后使用针对锂和钠特异波长的独立光电管检测火焰发射强度。锂作为内标其光电管电压被认为是Na+光电管的参考电压。如果恒定的参比电压发生变化(如由于仪器不稳定等原因所导致的)，那么Na+光电管的电压应进行相应补偿,并且能消除分析结果中由于潜在不稳定性造成的影响。
离子选择性电极电位测定法(ISE)：ISE 技术被用于测定电解质(Na+、K+、CL-Ca2+、Li+、Mg2+)、溶液的pH 和葡萄糖、尿素、尿酸和乳酸等代谢物。
原理为,ISE检测是一种电位分析方法。ISE的测量池中包含离子选择性膜,可以选择性地允许测定离子转移到测量电极的内部电解液中。如标本的离子活性大于内部电解液的离子活性,则会产生膜的正电位。浸入内部电解液中的电极会记录这一电位情况,并根据外部参比电极的恒定电位进行检测。根据溶液含有的离子载体来选用聚合物膜。选择采用包含离子载体的聚合物膜。离子载体是充当离子交换剂的合成分子(如针对Na+ 选用ETH157、227或2120)。
测量发生在ISE测量池内,如图8.2-1。测量池包含ISE电极,通过样品和盐桥与外部参比电极接触。
离子选择性电极:电极中包括一流动池,其中的样品通过膜与内部电解质分隔。内部电极(如Ag/AgCl电极)被浸在内部电解液中。
外部参比电极:外部参比电极被浸没在盐桥中,并由内部元素(通常使用Hg/HgCl)填充液(多为浓缩的KCI)及提供液体连接的装置组成。
注意事项：
分析前影响因素:NCCLS推荐Na+和K+的检测需要注意以下分析前因素:抽血前止血带使用时间不应超过1 min、应使用含有肝素锂的试管采血、样品应储存在室温(20~25℃)直到进行检测、血浆和血细胞应在取样后60min内进行分离。
血清、血浆、全血:对于Na+的检测而言,如果在相同的分析系统上使用ISE直接检测法,那么三种标本类型间没有明显差异。如果存在差异,主要是因为红细胞引起的液体接触电位造成的变化,可以通过使用合适的检测系统和合适的电解质溶液来将这一差异最小化。
直接 ISE、间接 ISE 和火焰光度法测量之间的差异取决于容积置换效应及电解质与有机或无机配体的结合。
溶剂置换效应2:直接和间接法检测NaK和结果的差异主要来自电解质排斥效应。这是由于血浆中脂质和蛋白溶剂置换效应引起的。电解质Na+、K+和CI-完全处于血浆的水相中。由于间接测量法中血浆水的体积分数为93%,因此火焰光度法产生的结果比直接ISE法低7%。有研究显示[2],如果以直接ISE作为参考,蛋白质浓度超过 80g/L的样本中超过16%在使用间接ISE测量法时会造成假性低钠血症。使用以下公式可以计算高蛋白血症中直接和间接ISE测量值之间的 Na+水平差异：
干扰因素:分析物浓度超出参考区间会导致直接ISE和间接 ISE测量值的差异。只有使用直接ISE检测法对未稀释样品进行检测,才能反映出血浆中Na+的病理生理状态。毛细血管和静脉血标本使用直接ISE测定法进行比较后,结果显示出良好的相关性,但是毛细血管标本测定的结果平均偏低 1.7 mmol/L。
但是使用毛细血管标本通过直接ISE检测法在床旁检测(POCT)分析仪上测得的结果与中心实验室使用静脉血浆通过间接 ISE检测法所得的结果之间的相关性可能较差。尽管两者之间平均差异仅为0.6mmol/l,但第2.5分位至第97.5分位之间的变异达到了10.6mmol/L。
高脂血症、高蛋白血症:使用火焰光度计和间接ISE检测法都会得到过低的 Na+检测结果。
溶血2:红细胞中 Na+浓度是血浆中Na+的1/10,如若溶血使得血浆血红蛋白达到500mg/dL的同时,只会使140mmol/l的血浆 Na+浓度下降0.4%。只有在严重溶血时(Hb>1g/dL)Na+浓度才会受显著影响。
可能存在方法学错误:溴化物和碘化物会干扰CL-检测。卤素的浓度会提高氯化物的测定结果(累加效应)。使用离子选择电极法和光度计法(乘法效应)进行检测时会出现严重错误。
稳定性:标本保存于封闭的血清管中结果稳定时间可长达1周;在血液标本采集后应迅速分离血清(血浆),否则会检出 CL-的错误低值。
AI创造
写在最后
就这，洗洗睡！
REFERENCE
1.略
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