吐槽时刻：专家来受死
微信群有人发了两张寄生虫图谱，咨询这是啥？
刚开始我还以为是样本，我还问了些问题。后来他告诉我是形态学质控，而且没有任何信息。
质控图，除了说是粪便标本，然后没有任何信息。
我就想知道，你是认真的吗？
那请问下，看寄生虫为什么要用这个？
再看看罗嫚老师的寄生虫图，再对比下质控图，到底谁认识，谁应该认识?
再看看罗嫚老师的图：
再看看线虫的示意图：
关键部位有哪一个地方看得清，还故意什么信息都不给？你们是有病吗？今天不喷你了，我已经喷过了《形态学室间质评考核到底是为了什么？提高检验人员形态学水平，还是让出题人秀优越感？》
寄生虫感染的粪便检查标准操作程序
粪便样品的采集：
粪便检查应使用新鲜粪便。如果在环境中暴露或保存数小时或数天后再将粪便携送到实验室，抵抗力弱的原虫滋养体则将死亡并消失。某些线虫卵在温暖的天气条件下会孵化，而线虫幼虫的鉴定较常见寄生虫的卵更困难。此外，自由生活的线虫也可迅速侵入地面的粪便中，鉴别孵出的幼虫与这些自由生活的线虫是费时而困难的。
粪便样品的保存和运输：
如果在粪便样品采集后数小时内不能进行检查，则应将样品保存于冰箱中但不能冰冻，否则会破坏虫卵。如果需要检查粪便中贾第虫(Giardia)、毛滴虫(Trichomonads)等的滋养体(Trophozoites)，则需在样品采集后30 min内进行检查。滋养体是原虫摄食营养的活动阶段，不能适应环境而存活，随粪便排出后会很快死亡。
如将粪便寄送到其他实验室检查，应将粪便进行冷藏包装，也可以等体积的5%~10%的缓冲福尔马林溶液保存蠕虫卵。用于固定样本的福尔马林溶液也有灭活其他可能存在的感染性生物的作用。保存原虫的滋养体需用其他特殊的固定剂，如聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)。
用漂浮试验制作的玻片难以运输，除非盖玻片以指甲油进行封片，因为高渗的悬浮溶液通常在制片过程的数小时内即可使虫卵和幼虫结构遭到破坏，变得不可识别。但这种玻片如果放置于含有湿纸巾的密闭容器内，因保持了较高的湿度，可于冰箱中保存数小时至数天。
粪便检查程序:
在对粪便样品进行特殊检查前，应该先检查它的外观:粪便黏稠度、色泽是否存在血液或黏液。这些外观特征都可指征特殊的寄生虫感染。如犬钩虫病时常产生黑色的、焦油样的粪便，而由鞭虫所致腹泻的粪便常含有过量的黏液和明显的血液成分。同时也应该注意是否有成虫或绦虫节片存在。
粪便漂浮检查的离心步骤:略。
离心管充满漂浮液，盖玻片覆盖于管口并与漂浮液密切接触
虫卵（囊）计数方法（粪便定量检查）：略。
改良的麦克马斯特计数法所用的麦克马斯特计数板
贝尔曼法：
贝尔曼法用于分离粪便样本中的线虫幼虫，常用于肺线虫感染的诊断。使用新鲜粪便样本对该方法的结果尤为重要（详情略之）。
（A）由悬挂的漏斗及连接有夹紧的胶管组成的传统贝尔曼装置；
（B）更方便诊断试验操作的以一次性塑料酒杯组成的贝尔曼装置
（* 国内常用竹筷或竹签代替。—译者注）
显微镜的使用：
在使用复式光学显微镜(Compound microscope”)检查寄生虫时，应注意下述
几点:
1.以10x物镜观察载玻片:因为大多数显微镜的目镜备有10x镜头，故放大率可达100x。检查应从盖玻片的一角开始，然后有序地观察完整个玻片。40x物镜(与目镜相乘总放大率为400x)用于更仔细地检查很小的寄生虫如贾第虫或隐孢子虫，但100x物镜(油镜)不能用于漂浮液玻片的检查。这不仅是因为油镜可能会直接接触漂浮液而对物镜产生损伤而且油镜头可能压迫盖玻片而使盖玻片下的液体产生涡流，导致液体中的目标物处于流动状态，从而难于对结构进行观察。
2.大多数寄生虫卵和幼虫色泽淡或完全无色，不易被观察到，故而重要的是使寄生虫与背景的对比度最大化。在观察玻片的过程中增加对比度的最好方法是保持载物台下的聚光镜位于低位，如果这一聚光镜不可用，通常的做法则是减小显微镜的可变电阻或降低可变光圈的光圈数(孔径)来降低光线强度以增加对比度。当然，精细的检查要用更高的功率以增加光线强度。
3.观察玻片时，用焦距微调器上下调节，稍稍改变焦平面可有助于读片。线虫卵通常与原虫包囊或卵囊的差异很小，微调操作可使结构更易观察(图 1.4 至图1.6)。
（图1.4：等孢球虫卵囊；图1.5：钩虫卵；图1.6：弓首蛔虫卵）
显微镜的校准：
测量寄生虫及其结构的大小对鉴定不太常见的寄生虫或外形相似但大小不同的不同种寄生虫很有帮助。显微测量是用嵌入于显微镜目镜筒中的测微计盘(Micrometer disc)或称标线板(Reticle，图1.7)对物镜测微尺(Stagemicrometer，图1.8)的已知参考值进行校准;每种放大率的物镜均应该用接目镜0cular lens)结合测微尺分别进行校准，且应将校准结果张贴于显微镜附近以便参考。校准值仅仅是在被校准的显微镜目镜和物镜联合使用时才是准确的。即使物镜未用物镜测微尺校准，目镜测微尺仍可提供一致的参考值用于比较粪便样本的目标物。目镜测微尺(目镜测微计盘)和物镜测微尺价格并不昂贵，可从销售显微设备的供应商购买。
以测微尺校准40x物镜的步骤如下：
为校准 40x物镜，将物镜测微尺置于显微镜的载物台上，调节焦距至刻度线清晰可见。例如(图19)，物镜测微尺为1mm(1000mm)长，分隔为 100个小格，每一小格代表 10 μm。
叠加目镜测微尺的任何一条适宜的数字线(通常是0刻度线)于物镜测微尺的适当刻度线上(本例中是第一条长线)。图19是这种看加的示意图。
3.寻找准确叠加的两条线。本例中目镜测微尺的49号线准确地叠合于物镜测微尺的 11号线。因此，未知目镜测微尺的49个分格代表物镜测微尺的11个分格，即110mm长(因每个分隔长10mm)。为完成校准，将110 μm 除以 49，则本例中目镜测微尺的校准系数为每格 2.24 mm。4.于显微镜上重复此步骤以校准每个物镜。
4.以校准的显微镜将目镜测微尺的刻度线叠于待测量的虫卵或包囊上，沿着与标本相对的方向计数分格数，例如计数结果为12，将其乘以校准系数(本例中400倍的校准系数为2.24 mm，12x2.24=26.88μm，即为所测量物体的大小)。
后略。
写在最后
就这，洗洗睡！
REFERENCE
1.略
往期回顾
如果您认为本文有价值，还想看更多更及时的内容，记得点下“赞”和“在看”，再星标一下公众号这样每次最新文章发出后，就会第一时间出现在你的订阅号列表里。
