使用液相的小伙伴，你可能听说过很多影响峰形的因素：流动相的组成和pH
色谱柱的污染/堵塞或塌陷
方法中的进样量、流速和采集频率
碱性化合物和硅羟基的次级作用
溶剂效应
组分共流出
除此之外，还有一个更常见且隐藏更深的因素：死体积。本次课程，让我们一起来认识下死体积的流路及日常操作注意事项。
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死体积可以简单理解为，样品从进入系统之后到被检测到的过程中要流经的体积。如果死体积增加，则样品的扩散空间增加，可能会导致色谱峰的展宽或拖尾。色谱柱体积越小，受柱外死体积的影响越大。
很多小伙伴都知道，由于仪器厂商间的设计差异，不同品牌的不锈钢接头组件，其伸出长度不尽相同。
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如果实验室使用的色谱柱接头位置预留较长，直接使用固定的不锈钢管线连接时，由于伸出不足，在柱接头处会引入额外的死体积，从而导致峰形变差。
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如果实验室存在这种问题，建议使用A-line 接头，手拧易拆装，同时自动调节伸出长度，可确保零死体积连接。
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点击学习：A-Line接头的正确安装
案例分享：六通阀6号口通往柱温箱的连接管线损坏，操作人员将原105mm的红色不锈钢线，更换为700mm的蓝色不锈钢管线，进样后发现色谱峰严重展宽，理论塔板数下降一倍。这是典型的更换管线不当，流路中死体积显著增加带来的峰形问题。需要注意，液相连接管线上的颜色代表着管线的内径。其中红色不锈钢管线代表内径为0.12mm，绿色代表内径为0.17mm，蓝色则代表内径为0.20或0.25mm。故而，如果管线损坏，应更换规格一致的管线（颜色和长度）。![]()
案例分享：操作人员维护六通阀后，原1号位连接管线和6号位连接管线位置接反，进样后发现色谱峰峰形显著展宽。
这是典型的管线连接错误，流路中死体积显著增加带来的峰形问题。如图所示，当1号位管线和6号位管线接反后，样品在自动进样器中流经的死体积增加，从而带来了峰形谱带的异常。在日常维护中，维护前后应梳理管线流路，确保连接正确。2. 如果涉及管线及备件的更换，应选择一致的规格。确保管线的长度和内径、流通池体积等规格一致，且正确安装。想要系统学习仪器的构造和连接？想要了解更多的使用细节，降低仪器宕机率？安捷伦培训中心系统大课等您来学！![]()
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