PNAS︱同济大学贾鑫明教授团队揭示BLNK负调控抗真菌免疫的新机制

文摘   2024-10-21 11:13   上海  

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2024年10月16日,同济大学医学院贾鑫明教授团队在《美国科学院院报》 (PNAS(Direct submission))上发表了题为“BLNK negatively regulates innate antifungal immunity through inhibiting c-Cbl-mediated macrophage migration”的研究论文。该研究阐明了B细胞连接蛋白(BLNK)通过抑制巨噬细胞迁移负调控机体抗真菌免疫的新机制,揭示了其在B细胞经典免疫信号传导以外的新功能。这一发现为研发靶向巨噬细胞免疫治疗真菌感染的新策略提供了理论基础。


BLNK作为适应性免疫应答的关键调节因子,是脾酪氨酸激酶(Spleen tyrosine kinase, Syk)偶联B细胞受体(BCR)信号通路的重要下游信号转导蛋白。它通过调控NF-κB和MAPK等信号通路,积极参与B细胞的激活、增殖、分化和免疫应答等基本生命过程。然而,BLNK在先天免疫中的作用,特别是在Syk偶联C型凝集素受体(CLR)信号通路中的功能,尚不明确。

本团队研究发现,在白念珠菌感染过程中,BLNK通过参与Syk介导的CLR信号激活,影响巨噬细胞的伪足小体形成,从而抑制巨噬细胞迁移,进一步负向调控宿主的抗真菌免疫反应。

机制研究表明,白念珠菌细胞壁多聚糖如β-葡聚糖或α-甘露聚糖,通过激活CLR以Syk依赖的方式诱导巨噬细胞中BLNK的磷酸化。值得注意的是,磷酸化后的BLNK通过竞争性抑制Src家族激酶Fyn对c-Cbl第737位酪氨酸的磷酸化,从而抑制巨噬细胞中F-actin细胞骨架的组装及伪足小体的形成(图1),最终影响巨噬细胞迁移;而c-Cbl是巨噬细胞中调节肌动蛋白骨架重排和介导细胞迁移的关键蛋白。

图1. BLNK抑制巨噬细胞伪足小体形成。免疫荧光染色结果显示,真菌多糖刺激后,髓系细胞BLNK条件性敲除小鼠巨噬细胞的伪足小体形成显著增多。


重要的是,缺失BLNK的巨噬细胞在应对白念珠菌感染展现出增强的动员和迁移能力(图2)。这种增强的迁移能力使得髓系细胞BLNK条件性敲除(Lyz2Cre/+Blnkfl/fl)小鼠在白念珠菌感染过程中展现出更强的生存优势,尤其是其肾脏中巨噬细胞的浸润显著增加(图3),进一步提升了小鼠清除病原真菌的能力。

图2. 利用Trans-well迁移分析、巨噬细胞侵袭实验、划痕实验证明,BLNK抑制白念珠菌感染过程中的巨噬细胞迁移。BLNK抑制巨噬细胞伪足小体形成。

图3. 髓系细胞BLNK条件性敲除小鼠在白念珠菌感染过程中,生存率显著上升,肾脏真菌负荷显著降低。


在以往的研究中,BLNK被广泛认知为BCR信号通路中的重要接头蛋白。本研究首次揭示了BLNK在巨噬细胞中的新功能,表明其通过调节Syk介导的CLR信号通路,抑制c-Cbl介导的巨噬细胞迁移,从而负向调控机体的抗真菌免疫(图4)。这一发现深化了对宿主抗真菌免疫调控网络的理解,为开发针对巨噬细胞迁移的免疫治疗新策略提供了新思路。

图4. BLNK抑制c-Cbl介导的巨噬细胞迁移负向调控抗真菌免疫



同济大学医学院博士研究生杨宜衡为论文的第一作者,同济大学医学院贾鑫明教授和同济大学附属第十人民医院口腔科的顾也博副研究员为该论文的共同通讯作者。该研究得到了国家重点研发计划项目、国家自然科学基金项目、上海市卫健委项目、上海市科委扬帆项目的支持。


来源:贾鑫明教授团队、医学院科技办

论文链接:

https://www.pnas.org/doi/10.1073/pnas.2400920121


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