现货AAV免费试用|AAV体内实验靶向策略-给药方式篇

文摘   2024-12-31 11:44   广东  

AAV(腺相关病毒)因其免疫原性低、安全性高、宿主范围广、组织特异性、长期稳定表达等特点,已被广泛地应用在动物水平的基因表达、基因操作和基因治疗中。选择AAV治疗有利于能够精准靶向目标器官细胞,减少对其他器官的影响。


AAV的靶向策略需要综合考虑血清型选择、注射方式和启动子使用等多个因素,以优化基因治疗的效率和特异性。

往期回顾:不同AAV血清型对肾脏/胰腺组织的侵染

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接下来,以肾脏组织和胰腺组织为例,我们来一同探讨关于AAV不同注射方式的对比。


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肾脏组织

选择合适的给药途径是基因治疗重要的因素。肾脏最常用的给药方式为肾脏实质注射、肾盂内注射和输尿管给药。


哺乳动物的肾脏有过滤功能,排斥大于50KD的蛋白质,此外,肾小球内的足细胞形成直径仅为10nm的狭缝横隔膜,传统的AAV载体全身给药难以在肾脏达到足够的表达水平。为了提高病毒载体对肾脏的转导,除了全身给药方式,研究人员陆续开发了多种肾脏局部给药方法。


表1. AAV肾脏给药方式


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胰腺组织

相比于肾脏多种给药方式,胰脏的给药方式主要就3种:尾静脉给药、腹部给药和胰腺导管给药。下面我们就以表格的方式,对比一下3种给药方式(表2)。在侵染效率上,胰腺导管给药>腹部给药>尾静脉给药。前期的应用中研究人员多数选择了胰腺导管给药,但是胰腺导管给药创伤大,难度高,腹腔注射配合衣壳优化后的血清型AAV8(Y447F+Y733F),也能取得对胰腺较高的感染效率[8]


表2. 胰腺不同的注射方式

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参考文献

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[2].  Rocca, C.J., et al., rAAV9 combined with renal vein injection is optimal for kidney-targeted gene delivery: conclusion of a comparative study. Gene Therapy, 2014. 21(6): p. 618-628.

[3].  Asico, et al., Nephron segment-specific gene expression using AAV vectors. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2018. 497(1): p. 19-24.

[4].  Xu, T., et al., Aldehyde Dehydrogenase 2 Protects Against Acute Kidney Injury by Regulating Autophagy via PI3KC3/Beclin-1 Pathway. SSRN Electronic Journal, 2020.

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[9].   Guo, P., et al., Specific Reprogramming of Alpha Cells to Insulin-Producing Cells by Short Glucagon Promoter-Driven Pdx1 and MafA. 2021.

[10].   Ramzy, A., et al., AAV8 Ins1-Cre can produce efficient β-cell recombination but requires consideration of off-target effects. Scientific reports, 2020. 10(1): p. 10518.

[11].   Wang, J., et al., NR3C1/Glucocorticoid receptor activation promotes pancreatic β-cell autophagy overload in response to glucolipotoxicity. 2023.

[12].   Xiangwei Xiao, P.G.K.P., Pancreatic cell tracing, lineage tagging and targeted genetic manipulations in multiple cell types using pancreatic ductal infusion of adeno-associated viral vectors and/or cell-tagging dyes. Nature Protocols, 2014.



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