凝胶渗透色谱(GPC)是利用不同大小(分子量)的分子在填料孔隙中的排阻程度不同实现分离,属于尺寸排阻色谱法(SEC)中的一种。GPC 色谱柱的填料采用高分子凝胶,流动相为非水溶性的有机溶剂。
飞诺美 Phenogel 系列色谱柱就属于有机相 GPC/SEC 色谱柱,它的一个典型的应用场景是药用辅料的分析,例如使用 Phenogel 测量填充剂和分散剂的分子量分布和批次间一致性。
案例:聚乙二醇 330
色谱柱:Phenogel 5 μm 50 Å、100 Å、500 Å
规格:300 x 7.8 mm
保护柱柱芯:AJ0-9292
保护柱柱套:KJ0-4282
溶剂:THF
流速:1.0 mL/min
检测:示差折光计
进样量:100 μL 0.25 % w/v
温度:室温
样品瓶:AR0-9925-13
过滤器:AF0-1102-52
样品:
1. dp7 546 分子量
2. dp6 458 分子量
3. dp5 370 分子量
4. dp4 282 分子量
5. dp3 194 分子量
6. dp2 106 分子量
7. dp1 62 分子量
有机体系聚合物基质 GPC 色谱柱和常用的硅胶基质 C18 色谱柱在填料性质上有很大不同,使用维护方式也不一样,需要特别注意。
Phenogel 的使用维护指南
色谱柱活化
如无特殊要求,Phenogel 色谱柱通常采用四氢呋喃(THF)填装。活化请使用 THF 冲洗,从低流速开始,逐渐过渡到方法流速,直到压力线以及基线都稳定。若流动相使用非 THF 溶剂,需严格按照溶剂切换注意事项操作。
溶剂切换注意事项
尽管 Phenogel 色谱柱坚固耐用且可承受较强的溶剂变化,但从高溶胀溶剂(A)切换为低溶胀溶剂(B、C 和 D)时应小心操作。错误切换溶剂会导致色谱柱失效。使用中等溶胀溶剂可获得理想结果并提高色谱柱寿命。
将色谱柱专用于固定的溶剂,可更大程度增加色谱柱寿命。这也将有助于减少溶剂切换。如果不加注意,可能会导致色谱柱失效。
将流速降低至 0.2 mL/min(7.8 mm ID)。
背压切勿超过 1500 psi。
务必在烧杯中检查溶剂是否互溶,或者在开始任何溶剂切换之前参阅下文溶剂互溶表。
比较溶剂 1(原溶剂)与溶剂 2(新溶剂)的溶胀特性并遵守以下指南:
如果溶剂 1 和溶剂 2 属于相同的溶胀类别(见下表),请检查溶剂互溶性并继续切换。
如果溶剂 1 和溶剂 2 属于下表箭头所指示的连续溶胀类别,请检查互溶性并继续切换。
如果溶剂 1 和溶剂 2 不属于相同或连续溶胀类别,请先切换为表中箭头所指示的中间溶剂。
溶剂兼容性表
色谱柱清洗
流动相低流速冲洗。
反冲也是可以的,但请将流速降低。
色谱柱再生
流动相低流速过夜冲洗。
色谱柱储存
THF、氯仿、二氯甲烷和甲苯等在室温下为液态并且不会氧化的贮存溶剂可用于贮存色谱柱。如果使用非 THF 溶剂,请确保遵循溶剂切换说明。
确保用堵头塞紧任何不在使用中的色谱柱,以免色谱柱中的溶剂蒸发。色谱柱变干是其失效的最常见原因。
更多关于 Phenogel 的应用和使用信息,欢迎联系艾杰尔飞诺美免费技术服务热线 400-606-8099 获取。