真实案例
每当遇到这种情况，是不是都想大呼一声啊……
为了更好的使用 Chirex 3126，有必要重新认识一下它！
Chirex 3126 属于飞诺美的手性色谱柱系列，Chirex 提供 7 种不同的固定相。这些化学结构坚固的多功能色谱柱可用于对映异构胺、醇、羧酸、羟基酸、氨基酸、酮、内酯、醚、酯和其他生物活性化合物的直接和间接分离。
3126 是 Chirex 系列中当之无愧的“明星”产品。典型应用是非衍生氨基酸及其衍生物的手性分析。
Chirex 3126 的介绍：
固定相：N,S - 二辛基 - (D) - 青霉胺
交联类型：配体交换
图 1. Chirex 3126 固定相示意图
作为配体交换类型的手性色谱柱，Chirex 3126 手性柱通过疏水作用将手性选择配体 (D) - 青霉胺吸附在反相填料上作为固定相。其原理基于手性选择配体和手性分析物通过与金属离子（通常为铜）配位形成可逆的非对映金属络合物而进行分离。由于 (D) - 青霉胺也具有手性，手性化合物的立体化学将决定洗脱顺序。一般来说，能够与手性选择配体形成更为稳定络合物的对映体将保留更强而更晚洗脱。
对于 Chirex 3126 这种特殊的固定相在使用过程中应该注意什么呢？
存储条件：色谱柱一般在硫酸铜 (II) 溶液 1-2mM 中储存色谱柱，阴凉干燥室温。
PH 耐受范围：4.5-7.5
压力耐受：压力不能超过 3000psi (200bar)
温度耐受：最高温度: 60℃
有机相耐受：甲醇<30%、乙腈<15%、异丙醇<15%，且不使用除甲醇、乙腈、异丙醇以外的有机溶剂(使用上述条件之外的其他有机相将剥离结合相并破坏色谱柱)。
平衡活化：仪器系统需要在未接柱子之前用硫酸铜流动相预先冲洗，确保用硫酸铜溶液将系统管路置换完全，避免仪器系统中残留有机相影响，接入色谱柱后，用含有硫酸铜 (II) 的水溶液或流动相活化平衡 2 小时以上。
冲洗：含有硫酸铜 (II) 水溶液或流动相，必要时可通过低流速反冲方法进行冲洗。
再生：通过在低流速过夜冲洗含有铜离子的流动相。
流动相：需要注意的是在方法开发时 Chirex 3126 色谱柱流动相必须始终包含铜离子。硫酸铜 (II) 是 Chirex 3126 的首选缓冲液。且 Cu2+ 浓度控制在 0.2~3mM，增大 Cu2+ 浓度或加入有机改性剂如异丙醇等均可缩短样品保留时间，提高峰形的对称性。
***请使您的 3126 柱子始终含有铜离子。
Chirex 3126 这款能做什么应用呢？
典型应用案例一：未衍生化的“游离”氨基酸分离
Chirex 3126 对多种 α 氨基酸、α 羟基酸和二肽及其衍生物有选择性，涉及到分析单一氨基酸手性体时，Chirex 3126 是不错的选择。
未衍生化的“游离”氨基酸分离
典型应用案例二：L,D 乳酸对映异构体拆分
乳酸（lactic acid）是一种具有良好生物相容性的有机酸，常作为酸味剂和pH调节剂用于食品、化妆品、药品及化学应用中。其分子中含有 1 个手性碳原子，故存在 L (+) - 乳酸和 D (-) - 乳酸 2 种对映异构体。
色谱条件
色谱柱：Phenomenex Chirex 3126 (D) - penicillamine, LC Column 150x4.6mm
货号：00F-3126-E0
流动相：1mM 硫酸铜水溶液
流速：1mL/min
柱温：25℃
进样量：10μL
波长：UV254 nm
如何选择 Chirex 的其他固定相？
固定相的选择取决于手性分子中是否存在/缺少化学基团。
Chirex 色谱柱选择指南
一些其他氨基酸衍生物的分离潜能
推荐色谱柱：Chirex 3011、3014
如：CBZ - 衍生物 (苄氧羰基)；IC - 衍生物 (异氰酸苯酯)；丹磺酰衍生物 (4 - 4 - 二甲基氨基偶氮苯 - 4' - 磺酰基)
